雄激素受体在乳腺癌组织中的表达及临床意义

【摘要】  目的：研究雄激素受体(AR)在乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法：用免疫组化EnVision二步法检测AR在121例乳腺癌组织中的表达，并结合临床病理资料进行分析。结果：AR在乳腺癌组织中的阳性表达率为73?6%(89/121)；AR的表达与患者年龄、组织学分类呈负相关(r=_0?262，P=0?004；r=_0?355，P=0?000)，与临床TNM分期及5年生存期有统计学意义(P<0?05)，但与淋巴结转移无统计学意义。AR与ER蛋白表达呈正相关(r=0?251，P=0?006)。结论：AR表达与乳腺癌的生物学行为有关，可作为乳腺癌内分泌的和预后判断指标。

【关键词】  乳腺癌 雄激素受体 免疫组织化学

    ［Abstract］Objective: To study the expression of androgen receptor(AR)in breast carcinoma and its clinical significance. Methods: The breast carcinoma samples(121 cases)were collected. The expression of AR in breast carcinoma was detected by immunohistochemistry. Results: In all the breast carcinoma samples, the positive rate of AR expression was 73?6%. The expression of AR was negatively correlated with age and histological grades(r=_0?262，P=0?004；r=_0?355，P=0?000). The expression of AR had correlation with clinical TNM stages and 5_year survival(P<0?05)but no correlation with the lymph node metastasis. The expression of AR was positively correlated with ER protein. Conclusion: AR expression is related to cancerous biology in breast carcinoma. It plays a role in endocrinotherapy and its prognostic indexes.

    ［Key Words］breast carcinoma; androgen receptor; immunohistochemistry

    乳腺癌是一种性激素依赖性肿瘤，其发生、与性激素受体状况密切相关。其中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)在乳腺癌的发生、发展中起着重要的促进作用，因此，ER、PR阳性患者应用雌激素拮抗剂治疗可提高5年生存率。但ER、PR均阳性者也有20%～30%的患者治疗无效［1］。究其原因可能是其他激素(雄激素)对乳腺癌的发生、发展也有重要影响，但目前的研究结果不尽相同［2，3］。因此，我们运用免疫组化EnVision二步法，检测乳腺癌手术切除标本癌组织石蜡切片中的雄激素受体(AR)表达，旨在进一步了解AR与乳腺癌的关系，为乳腺癌的内分泌治疗、预后判断和将来的基因治疗积累资料并提供依据。

    1资料与方法

    1?1一般资料

    收集汕头大学医学院病理科2000_01～2002_12有完整随访资料及术前均未接受过放、化疗的121例(年龄32～74岁，平均50?7岁)乳腺癌手术切除标本的组织蜡块。高分化癌28例，中分化48例，低分化45例。其中45例组织切片带有正常乳腺组织；76例乳腺癌伴腋下淋巴结转移。将蜡块固定于切片机上连续切片(厚4?μm)，常规苏木精_伊红染色。

    1?2免疫组化

    切片经常规脱蜡、水化后，用体积分数3%的H2O2去除内源性过氧化物酶，0?01?mol/L枸橼酸缓冲液微波炉抗原修复。一抗鼠抗AR单克隆抗体(Cat?No?M_0021，工作浓度1∶100)和EnVision二步法试剂均为上海长岛生物技术有限公司代理美国Antibody Diagnostica公司产品。用已知阳性切片作阳性对照，正常小鼠非免疫血清和PBS代替一抗作阴性对照；DAB显色，苏木精对比染色，光镜观察。

    1?3结果判定

    采用半定量分析法，乳腺癌细胞核呈显著棕黄色为阳性，根据染色强度及阳性细胞数量分为：“+”肿瘤细胞核着显著棕黄色，阳性细胞<15%；“++”阳性细胞在16%～50%之间；“+++”阳性细胞>50%；“-”肿瘤细胞不着色或等同于背景染色。

    1?4统计学处理

    AR表达的比较用χ2检验。

    2结果

    2?1AR在乳腺癌组织的定位与表达乳腺癌组织切片经免疫组化染色后，阳性信号呈浅棕色至深棕色颗粒位于细胞核，部分切片癌细胞质也见着色。高分化乳腺癌AR染色多呈强阳性，随着癌组织分化的降低，AR的表达逐渐减弱(图1～3，封3)。AR蛋白阴性表达(图4，封3)。正常乳腺组织和癌旁增生的乳腺组织呈阴性或弱染色反应(图5，封3)。

    2?2乳腺癌组织AR的表达与临床病理的关系

    121例乳腺癌组织AR的不同表达与其年龄、组织学分类、临床TNM分期、淋巴结转移和5年生存期见表1。AR在乳腺癌中的阳性表达率为73?6%(89/121)，AR表达与患者年龄、组织学分类呈负相关(r=_0?262，P=0?004；r=_0?355，P=0?000)，与临床TNM分期及5年生存期(不考虑术后放、化疗对5年生存期的影响)有统计学意义(χ2=8?202，P=0?042；χ2=10?970，P=0?012)。AR蛋白表达与淋巴结转移无统计学意义，但随着淋巴结转移数的增加，其阳性率逐渐下降。AR与ER蛋白表达呈正相关(r=0?251，P=0?006)。
表1AR蛋白表达与乳腺癌临床病理的关系

   3讨论

    流行病学研究显示［4］：乳腺癌患者越年轻，恶性程度就越高，且易发生淋巴结与远处转移，预后极差。本研究发现，AR蛋白表达与年龄、组织学分类呈负相关，与临床TNM分期有统计学意义，提示随着AR表达程度的增高，患者预后越好，与报道的相同［5］。AR蛋白表达与淋巴结转移无统计学意义，但随着淋巴结转移数的增加，其阳性率逐渐下降。AR阳性乳腺癌者的淋巴结转移率［60?7%(54/89)］略低于AR阴性者［68?8%(22/32)］但无统计学意义，与文献报道不完全一致［6， 7］。AR蛋白表达与淋巴结转移之间的关系还需进一步研究。生存期大于5年者AR阳性率为80?7%，小于5年者为57?9%，AR蛋白表达与5年生存率有统计学意义，提示乳腺癌AR蛋白的检测有利于判断其分化程度、生物学行为及预后，对乳腺癌的临床辅助治疗有一定指导作用。

    在诱导乳腺癌中，雌激素是主要的致癌因子，而雄激素主要起促进乳腺癌形成和加速其的作用。雄激素一方面能直接或与雌激素协同刺激乳腺癌细胞的生长和增生，另一方面也可通过间接地转化为雌激素的途径而发挥其作用。本研究中AR的阳性率为73?6%，大多与ER同时表达，与ER表达呈正相关，这与报道相似［8］。在ER阳性的乳腺癌中，AR阳性率为83?8%(67/80)，而在ER阴性的乳腺癌中，AR阳性率为53?7%(22/41)，与文献报道不同［2］，可能与病例数和构成比的不同有关。由此可以解释，部分ER阳性的乳腺癌患者用内分泌无效，而部分ER阴性的乳腺癌患者用内分泌治疗仍有效。有学者的实验为乳腺癌的雄激素拮抗剂治疗效果提供了依据，因此在乳腺癌患者中检测AR蛋白可作为独立的指标来指导内分泌治疗［9， 10］。

    总之，AR蛋白水平的测定对估计乳腺癌的生物学特性和预后判断有重要意义，综合观察AR蛋白水平的表达与淋巴结转移情况更有临床价值。同时在乳腺癌中联合检测ER蛋白，能够较好地了解癌组织对激素治疗的敏感性，对乳腺癌的内分泌治疗有重要指导意义。

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