清宫止血合剂对药物流产后大鼠血浆TXB2和 6/|Keto/|PGF１α影响的实验研究
作者：武权生,宋 燕,杨亚玲,薛守宇,王芳
【摘要】 目的 探讨清宫止血合剂对大鼠药物流产后血浆中血栓素B2(TXB2)和6-酮前列腺素1ɑ(6/|Keto/|PGF1ɑ)含量的影响。方法 通过给早孕大鼠灌服米非司酮和米索前列醇造成流产模型。将大鼠随机分成6组，分别为空白组、模型组、新生化组及清宫止血合剂高、中、低剂量组。测定各组大鼠血浆中TXB2和6/|Keto/|PGF1ɑ的含量。结果 清宫止血合剂可使大鼠血浆6/|Keto/|PGF1ɑ含量显著降低、TXB2含量显著升高（P<0.05或P<0.01），且呈明显量效关系。结论 清宫止血合剂能调节大鼠血浆TXB2 和6/|Keto/|PGF1ɑ水平，这可能是其药物流产后出血的作用机制之一。
【关键词】 清宫止血合剂;药物流产;阴道出血;实验研究
药物流产具有口服简便、作用快、副作用小、避免手术痛苦、减少并发症等优点，但是目前药物流产后阴道出血时间长和出血量多的主要副作用尚未得到很好的解决[1]。清宫止血合剂具有益气活血、化瘀止血之功效，临床上主要治疗药物流产后出血的不良反应，此方临床治疗观察中取得肯定疗效。本课题在中医妇科理论指导下，研究清宫止血合剂对大鼠血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮前列腺素1ɑ(6|Keto|PGF1ɑ)水平的影响，对其作用机理进行探讨，为临床治疗提供实验依据。
1 材料和方法
1.1实验动物
SPF级健康Wistar育龄大鼠108只，其中雌性72只，雄性36只，体质量(250±30) g,由甘肃中医学院实验中心提供。
1.2实验药物与试剂
米非司酮片：25 mg/片，上海华联制药公司，批号2006325，灌胃前用蒸馏水配制成0.83 mg/mL的混悬液备用。米索前列腺醇片：0.2 mg/片，北京紫竹药业有限公司，批号41020705，灌胃前用蒸馏水配制成0.01 mg/mL的混悬液备用。清宫止血合剂（当归、桃仁、益母草、茜草、蒲黄、马齿苋、川牛膝、炒山药等），由本院中药制剂室常规煎煮，浓缩成分别含生药3.36 g/mL、1.68 g/mL、0.84 g/mL的水煎剂。新生化颗粒：10 g/次，30 g/d，广西制药厂生产，批号060320,灌胃前用蒸馏水配制成0. 3 mg/mL的混悬液备用。6|Keto|PGF1ɑ 、TXB2放射免疫试剂盒，购自南京建成生物研究所，批号2006615。
1.3主要仪器
DFM-96型多管放射免疫γ计数器，由众成机电技术公司生产，批号000612；HANGPING秤，上海精科公司天平仪器厂生产，型号JY4001；LXJ-64-01高速光学仪器离心机由北京医疗仪器修理厂生产；青岛澳柯玛可控低温冰箱，型号GEM-185。
1.4造模及分组
参照王晓东[2]的方法造模。将72只健康未孕的雌性Wistar大鼠和36只雄性大鼠于16:00—17:00按2∶1比例合笼，次日上午8:00—9：00进行阴道涂片检查，以发现精子为妊娠第1 d。并以此为标准筛选出48只孕鼠，除不造模的8只孕鼠(为空白组)外，将受孕的40只大鼠随机分为模型组、新生化组、清宫止血合剂高、中、低剂量组。5组均于妊娠第7 d早晨8:00时按体质量灌胃，给予米非司酮8.3 mg/kg,18:00时给予米索前列醇0.1 mg/kg。各组动物正常饮食，自由摄水。次日各组动物开始灌胃给药。空白组、模型组均灌等量生理盐水10 mL/kg；新生化组灌新生化混悬液（剂量为3.5 g/kg）；清宫止血合剂高、中、低剂量组分别灌不同质量浓度的清宫止血合剂水煎剂（剂量分别为27 g/kg、13.5 g/kg、6.75 g/kg），每天1次，连续7 d。
1.5检测样品制备
取一次性5 mL空注射器2支，各吸取消炎痛-EDTA-钠液约0.1 mL,快速静脉穿刺取血4 mL，即刻在注射器内颠倒混匀，注入试管中，4 ℃，3500 r/min离心15 min，吸取上清液，移入EP管。-20 ℃保存，待测TXB2和6|Keto|PGF1α。
1.6样品测定
TXB2和6|Keto|PGF1α用放射免疫法测定，全部检测程序严格按照药盒说明书进行。
1.7数据处理
数据用SPSS11.0 for windows统计分析软件进行处理，所有数据用均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验。
2实验结果
见表1。表1各组大鼠血浆中TXB2及6|Keto|PGF1α含量的比较结果显示，模型组大鼠血浆6|K|PGF1ɑ较空白组显著增高（P<0.01）,而TXB2含量则显著降低(P<0.05)，TXB2/6|Keto|PGF1ɑ比值亦显著降低（P<0.05）,说明模型组大鼠血浆中TXB2/6|Keto|PGF1ɑ系统失调，提示造模成功。经用药后，清宫止血合剂高、中、低剂量组及新生化组血浆6|Keto|PGF1ɑ含量与模型组比较显著降低（P<0.05），TXB2含量及TXB2/6|Keto|PGF1ɑ比值则显著升高（P<0.05或P<0.01），说明各组药物能够通过调节TXB2/6|Keto|PGF1ɑ比值，起到治疗作用。与新生化组比较，清宫止血合剂高、中剂量组6|Keto|PGF1ɑ含量显著降低（P<0.05），TXB2含量及TXB2/6|Keto|PGF1ɑ比值显著升高（P<0.05），清宫止血合剂低剂量组与新生化组之间未见明显差异（P>0.05）。与清宫止血合剂低剂量组比较，清宫止血合剂高、中剂量组能明显降低大鼠血浆6|K|PGF1ɑ含量（P<0.01或P<0.05），TXB2含量则明显升高（P<0.05），且以高剂量组作用为优，说明清宫止血合剂可使TXB2含量升高，6|Keto|PGF1ɑ含量降低，TXB2/6|Keto|PGF1ɑ比值升高，且呈明显量效关系，使血管收缩，从而达到止血的目的。
3讨论
中医并无“药流后出血”这一病名的记载，根据历代的论述结合其临床表现，药流后不规则出血属于祖国医学“产后恶露不绝”、“堕胎下血”、“胞衣残留”等范畴。发病机理主要为冲任不固、气血运行失常。导师认为病机关键是“瘀血留滞胞中”，但又有“多虚”、“多瘀”的特点，故以“益气活血、化瘀止血”为大法立方。方中当归甘温，既能补血又能活血，为主药。药理研究证明当归具有抗血小板凝集、抗血栓、扩张血管等作用[3]。益母草可祛瘀血、生新血，现代药理研究表明其有兴奋子宫、改善微循环、抑制内外凝血系统、促进纤溶活性的作用[4]。茜草具有凉血、活血、止血之功，常与益母草配合用于产后瘀血阻滞引起的出血。全方药味组成具有益气活血、化瘀止血之功，能使胞宫内瘀血尽去，新血归经，恶露自止。
临床上药流后以出血时间长、出血量多为多见症状，体内TXB2/6|Keto|PGF1α系统的失调在其过程中具有重要意义。TXB2和6|K|PGF1α都是不稳定的花生四烯酸代谢产物，二者的生物活性很强而作用相互拮抗，在体内形成一对精巧的调节作用[5]。TXB2具有促进血小板聚集、促凝和缩血管作用[6]，6|K|PGF1α是一种强有力的血小板聚集抑制物，有较强的抗凝和扩血管作用[7]。生理情况下，二者维持着动态平衡。药流时TXB2/6|Keto|PGF1α比例失调，微循环障碍，宫腔内暴露的小血管内凝血机制失常，导致药流后出血时间长、出血量多。本实验结果表明：清宫止血合剂能明显降低大鼠血浆中6|Keto|PGF1α的含量，升高TXB2/6|Keto|PGF1α值，说明清宫止血合剂可能是通过降低6|Keto|PGF1α含量，收缩子宫内血管，从而加快血栓形成而起到治疗作用。
【文献】
/[1/]黄玲,胡美怡,马艳,等.可能缩短药物流产后出血时间的药物应用研究/[J/].生殖与避孕,2006,26(1):57-59.
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/[3/]黄世佐.当归止血古今谈/[J/].新疆中医药,1996,56(4):33-34.
/[4/]Luigi F,Paolo V,Luisa A,et al. Reproductive prognos is after hysteroscopic metroplasty in 102 women life/|table analysis /[J/]. FertilSteril,2003,59(4):768-772.
/[5/]Laper J. Incidence delo consommation de margarine sar frequence delamaladie/[J/]. Press Med,1983,12(43):2767.
/[6/]Morel D W,Dicorleto P E,Chisolm G M.Endotheilal and smooth muscle cells after low density lipoprotein in vitro by free redicaloxidation/[J/].Arterosclerosis,1984,4(4):357.
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