姜黄素不同提取方法比较研究

                 作者：陈雁虹,秦波,张媛媛,程伟,吕圭源,叶祖光

【摘要】  目的 对5种提取姜黄素的不同方法进行比较。方法 以各法提取所得的姜黄素含量与得膏率作为评价指标,优选姜黄素的提取工艺。结果 80 ℃乙醇温浸提取姜黄素所得的含量最高,为姜黄素的优选提取工艺。结论 该法提取姜黄素含量高,操作简单,稳定可行。

【关键词】  姜黄；姜黄素；提取方法

    姜黄(Curcuma longa L.)来源于姜科植物姜黄的干燥根茎,主要产于我国四川、云南、广西、广东、福建、台湾等地。姜黄性温,味辛、苦,具有破血行气、通经止痛的作用,常用于胸胁刺痛、闭经、癥瘕、风湿肩臂疼痛、跌扑肿痛等[1]。    姜黄的化学成分包括姜黄素类化合物(curcumins)、萜类化合物(Terpenoids)、甾醇类化合物(sterols)、糖类化合物(Carbohydrates)及微量元素等。其中姜黄素类化合物主要包括姜黄素(curcumin)、去甲氧基姜黄素(demethoxy-curcumin)和双去甲氧基姜黄素(bisdemethoxycur-cumin)[2]。姜黄素(C21H20O6)为醇溶性二苯基庚烃类化合物,不溶于冷水,微溶于乙醚和苯,加热时溶于乙醇、乙二醇,易溶于冰醋酸和碱溶液。　　姜黄素在高温、强酸、强碱或强光环境中稳定性较差[3],因此提取温度不宜过高。目前,其主要提取方法有甲醇、乙醇有机溶剂提取法、碱水热提法、酶解提取法、外场辅助提取法等,本实验选用碱水热提、酶解提取、乙醇回流提取、乙醇温浸提取、乙醇渗漉提取5种方法,对各法提取所得的姜黄素含量与得膏率进行了考察比较,为姜黄素的研究提供参考和依据。

1  仪器与试药

    FZ102微型植物试样粉碎机(北京市永光明医疗仪器厂)；DZKW-S-4电热恒温水浴锅(北京市永光明医疗仪器厂)；DZF-6050真空干燥箱(上海一恒科技有限公司)；AB135-S电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多公司)；Agilent 1100高效液相色谱仪(安捷伦科技有限公司)。
   
　　姜黄(购于北京人卫中药饮片厂,四川产)；姜黄素对照品(中国药品生物制品检定所,批号110823-200603)；半纤维素酶(hemicellulase,Sigma)；其他所用试剂均为分析纯,HPLC分析所用试剂为色谱纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  提取方法

　　2.1.1  姜黄碱水回流提取[2] 

　　姜黄粉碎过40目筛,取50 g,加水,用1%氢氧化钠溶液调pH值至9.2,于沸水中提取3次,加水量分别为原药材重量的10、8、6倍。提取时间分别为60、54、30 min。

　　2.1.2  姜黄酶解后碱水回流提取[4] 

　　姜黄粉碎过40目筛,取50 g,加6倍量水在90 ℃水浴中保温1 h,降温,加入半纤维素酶1.75 mg,并加水至10倍量,用1%盐酸溶液调pH值至4.5,于50 ℃水浴中酶解2 h,酶的浓度为0.35 mg/mL,酶解后用1%氢氧化钠溶液调pH值至9.2,按“2.1.1”项下方法用碱水提取。

　　2.1.3  姜黄乙醇回流提取 

　　姜黄粉碎过40目筛,取50 g,于80%乙醇中加热回流提取3次,3次的乙醇用量均为原药材重量的6倍。提取时间每次2 h。

　　2.1.4  姜黄乙醇温浸提取
 
　　姜黄粉碎过40目筛,取50 g,于80%乙醇中加热至80 ℃,保温温浸提取3次,乙醇用量均为原药材重量的6倍。提取时间每次2 h。

　　2.1.5  姜黄乙醇渗漉提取[5] 

　　姜黄粉碎过40目筛,取100 g,以80%乙醇为溶剂避光浸渍6 h后渗漉提取,乙醇用量为原药材重量的4倍,漉速为9 mL/(min·kg),收集3.3倍药材重的漉液。

　　2.2  浸膏得率的测定

    按各法提取后,合并提取液、滤过,滤液60 ℃减压回收溶剂后水浴浓缩至一定浓度。真空干燥至恒重,得浸膏,精密称量,计算浸膏得率[浸膏得率(%)＝浸膏净重(g)/药材量(g)×100%],结果见表1。