鸦胆子油亚纳米乳注射液处方工艺研究

　　3  制剂工艺考察

　　3.1  基本制备工艺

    按处方量称取蛋黄卵磷脂、泊洛沙姆188与甘油,加适量的注射用水于烧杯中,在适宜温度下进行混合,转入高速剪切机10 000 r/min剪切3次,每次2 min,制得水相；称取处方量的精制鸦胆子油,在适宜温度下边搅拌边将其缓慢滴入水相中,转用高速剪切机10 000 r/min剪切20 min,制得粗乳,加注射用水定容至1 000 mL,再转用高压均质机,采用高压匀化的方法制成细乳；加油酸钠1 g,并用NaOH调节pH,充氮气,加塞,加铝盖密封。115 ℃旋转灭菌30 min,即得成品。

　　3.2  正交优选
   
　　亚纳米乳的质量与乳化技术有很大的相关性。为寻求最优制剂工艺,并结合大生产的实际,采用正交设计法考察初乳温度、均质压力、均质次数和pH值这4个因素不同水平对亚纳米乳粒径的影响,以0.5 μm以下粒子所占百分数φ和Ke值作为指标。因素水平及试验结果见表2～表5。表2  L9(34)因素水平表（略）表3  L9(34)试验设计及结果（略）表4  试验结果φ值的方差分析（略）注：*差异有统计学意义(下同)表5  试验结果Ke值的方差分析（略）
   
　　由R1值可以看出,各因素对亚纳米乳剂粒径影响大小顺序依次为D＞A＞B＞C,即pH值＞初乳温度＞均质压力＞均质次数。由以上结果直观分析,较好的制备工艺为A2B3C3D2,从方差分析来看,A、D差异有统计学意义,其余均无统计学意义。而且从直观分析来看,均质6次较均质3次粒径变化较明显,而均质9次与均质6次粒径变化很小。由R2值可以看出,各因素对稳定性参数Ke值影响大小顺序依次为A＞B＞C＞D,即初乳温度＞均质压力＞均质次数＞pH值。由以上结果直观分析,较好的制备工艺为A2B3C2D3。从方差分析来看,A、B差异有统计学意义,其余均无统计学意义。结合生产实际,决定采用A2B3C2D2作为最终制备工艺,即：初乳温度70 ℃,均质压力900 bar,次数6次,pH值7.5。
 
　　3.3  验证试验
   
　　鸦胆子油亚纳米乳注射液处方：精制鸦胆子油100 mL,蛋黄卵磷脂8 g,泊洛沙姆188 4 g,甘油22.5 g,油酸钠1 g,注射用水适量,制成1 000 mL。
   
　　制备工艺：按处方量称取蛋黄卵磷脂、泊洛沙姆188与甘油,加适量注射用水于烧杯中在70 ℃下进行混合,转入高速剪切机,以10 000 r/min剪切3次,每次2 min,制得水相；称取处方量的精制鸦胆子油,在70 ℃下边搅拌边将其缓慢滴入水相中,转用高速剪切机以10 000 r/min剪切20 min,制得粗乳,加注射用水定容至1 000 mL,再转用高压均质机,均质压力900 bar,均质6次,匀化制得细乳；加油酸钠1 g,并用NaOH调节pH 7.5,充氮气,加塞,加铝盖密封,115 ℃旋转灭菌30 min,即得成品。

    按上述方法制得3批样品,检测各项指标,结果见表6。表6  验证试验结果（略）

　　4  讨论

    提高亚纳米乳的稳定性是本处方优选的关键之一。在本试验中,当乳化剂为蛋黄卵磷脂∶泊洛沙姆188＝2∶1时,所制得到亚纳米乳稳定性最好,其原因可能是形成复合凝聚膜,使得乳化膜强度增大,乳剂不易破乳。

    文献[3]指出,蛋黄卵磷脂在高压灭菌时会降解产生少量的游离脂肪酸,使得乳剂在灭菌前后pH值有明显变化,而pH值的变化则会导致Zeta电位迅速降低。综合以上因素并根据相关要求,将正交试验中pH值的水平选定在6.5、7.5、8.5。
   
　　亚纳米乳稳定性评价的指标很多,如粒径大小、离心分离时间、Zata电位的测定、粘度的测定、电导法及稳定性参数的测定等。稳定性参数Ke的测定对设备要求较低,且可以简单快速的评价亚纳米乳的稳定性,因此,用其筛选处方具有一定的优势。但稳定性参数Ke也有一定的局限性,测定结果误差较大,因此,应取多个样品、多次测量来减少误差,并尽可能结合其他评价指标作出正确的评价。

    采用优化后的处方及制备工艺制得的鸦胆子油亚纳米乳注射液,外观呈乳白色,将其4 000 r/min离心15 min未见分层也无小油滴析出,符合2005年版《中华人民共和国药典》对注射用乳剂的要求,适合于静脉注射使用。

【参考文献】
  　　[1] 许洪霞,刘英华,程晓薇.鸦胆子抗肿瘤的研究[J].沈阳药学院学报, 1979,11(10)：27－30.

　　[2] Rote Liste. German drug reference[M]. Berlin：Edition Cantor Aulendorf,1998.84.

　　[3] Benita S, Levy MY. Subnanomulsion as colloidal drug carriers for intravenous administration：comprehensive physicochemical characterization[J]. J Pharm Sci,1993,82(11)：1069－1079.