HPLC法测定祖卡木颗粒中大黄素和大黄酚的含量

               作者：希尔艾力吐尔逊,吐尔洪卡地尔,斯拉甫艾白

【摘要】  目的 测定祖卡木颗粒中大黄素和大黄酚的含量。方法 采用高效液相色谱法,Shim-pack ODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),柱温35 ℃,流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),检测波长为254 nm,流速1.0 mL/min。结果 大黄素在0.4～4 μg/mL间呈良好的线性关系,r=0.999 4,平均回收率95.43%,RSD=1.42%；大黄酚在0.848～8.48 μg/mL间呈良好的线性关系,r=0.999 2,平均回收率95.80%,RSD=1.40%。结论 该法具有操作简单、准确的优点,分离效果显著。

【关键词】  祖卡木颗粒；高效液相色谱法；大黄素；大黄酚；含量测定

    Abstract：Objective To determine the contents of emodin and chrysophonol in Qingrejiedu granules. Methods HPLC method was used. Separation was performed on a Shim-pack ODS C18 column (150 mm×4.6 mm, 5 μm), column temperature was 35 ℃. The mobile phase consisting of methanol- 0.1% phosphoric acid water solution (85∶15) and UV detection wavelength at 254 nm, the flow rate was 1.0 mL/min. Results Emodin showed a good linearity in the range of 0.4～4 μg/mL, r=0.999 4, average reclaim rate was 95.43%, RSD=1.42%. Chrysophanol showed a good linearity in the range of 0.848～ 8.48 μg/mL, r=0.999 2, average reclaim rate was 95.80%, RSD=1.40%. Conclusion The HPLC method was simple, sensitive and specific, easy to operate.

    Key words：Qingrejiedu granules；HPLC；emodin；chrysophanol；content determination

    祖卡木颗粒由大黄、睡莲花、薄荷、菊花等药材经过提取加工浓缩制成的颗粒,具有调节异常气质、清热、解毒的作用。用于感冒引起的发热无汗、咽喉肿痛、鼻塞流涕。为确保药品质量,我们以方中大黄素及大黄酚作为指标成分,用HPLC法进行含量测定,结果被测成分分离完全,操作简单,定量准确[1-2]。

　　1  仪器与试药
   
　　SPD-10AVP型高效液相色谱仪(日本岛津公司),包括LC-10ATVP泵,SPD-10AVP检测器,CTO-10ASVP柱温箱, SCL-10AVP系统控制器；LibrorAEG-200电子天平(日本岛津公司)；LS-3120超声波发生器(美国科学系统公司)。

　　祖卡木颗粒由本所自制。大黄素对照品(中国药品生物制品检定所,批号0766-200011),大黄酚对照品(中国药品生物制品检定所,批号0736-200116)。硅胶G(青岛海洋化工有限公司生产)。甲醇为色谱级,其它试剂均为分析纯；水为超纯水。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件

    Shim-pack ODS C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)；检测波长：254 nm；流动相：甲醇-0.1%磷酸(85∶15)；流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃。分别取样品溶液、阴性样品溶液和对照品溶液各10 μL,按上述色谱条件分别进样测定,绘制色谱图,结果理论塔板数大黄素大于4 000,大黄酚大于5 000。

　　2.2  对照品溶液的制备

    精密称取大黄素、大黄酚对照品各5 mg,分别置50 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀；分别精密吸取大黄素溶液0.5 mL、大黄酚溶液1 mL,分别置25 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,得每1 mL含大黄素2 μg及每1 mL含大黄酚4 μg的溶液。冰箱保存,备用。