玉郎伞多糖对大鼠不同脑区腺苷酸环化酶的影响
2.3 环磷酸腺苷（cAMP）的测定
严格按照环磷酸腺苷放射免疫分析试剂盒要求测定各反应管中cAMP产生量。反应结束后, 3 000 r/min离心15 min，小心吸去上清液。在γ放射免疫计数器上测定沉淀CPM数。根据标准曲线计算cAMP的产生量。
2.4 数据统计处理数据用以±s的形式表示，采用SPSS13.0统计软件,选用单因素方差分析（ANOVA）来检验各组数据之间的差异性。
3 结果
大鼠连续灌胃21 d后，FLU（20 mg/kg）和YLSPS中、高剂量（300，600 mg/kg）组前额皮层cAMP量有所增加，与空白组相比具显著性差异（P<0.05或P<0.01）。而在下丘脑和海马区cAMP量略有下降。结果提示YLSPS在300～600 mg/kg的条件下可激活大鼠前额皮层AC活性，在600 mg/kg的条件下可抑制正常大鼠下丘脑、海马AC活性。结果见表1。表1 YLSPS对大鼠各脑区AC活性的影响（略）
4 讨论
现普遍认为抗抑郁药最终是通过影响细胞内的信号转导，引起神经细胞和突触的适应性变化起作用的，从而提出抗抑郁药的信号转导机制。影响信号转导的时间与抗抑郁药产生临床效应的时间相一致，这合理解释了其临床效应滞后现象。
近年来的研究证实，抑郁患者大脑皮层腺苷酸环化酶（adenylyl cyclase，AC）活性降低，大脑神经细胞内cAMP信号通路（cAMP signal pathway）功能紊乱［2］。抑郁症与cAMP信号通路的功能异常密切相关, 经抗抑郁剂处理后能逆转AC活性水平低下的状态［3］，诱导cAMP通路代偿性增强［4］。
cAMP通路的激活可能是抗抑郁剂产生治疗效果的途径之一。在cAMP信号通路中，细胞外信号与相应受体结合，通过调节细胞内第二信使cAMP的水平而引起反应的信号通路。信号分子对cAMP水平的调节，是靠AC进行的。AC至少已被克隆出8种亚型，且分布具有组织及细胞特异性。大鼠大脑中存在3种AC，分别是AC-Ⅰ,AC-Ⅱ和AC-Ⅴ，其中AC-Ⅰ在海马及皮质表达水平非常高。研究表明，AC是G蛋白偶联信号转导途径中一个重要的酶，AC可能是新型组织及细胞特异性药物的作用靶点［5］。抗抑郁剂对cAMP通路的激活具有特异性，因此AC也就成为药物筛选的相对特异的指标之一［6］。
前期实验结果证明，YLSPS对行为绝望动物模型和慢性应激小鼠模型具有显著的抗抑郁作用，能直接或间接提高慢性应激小鼠脑中NE、5-HT、 DA含量。为深入探讨YLSPS抗抑郁作用的机制，本研究采用放射免疫方法考察YLSPS对大鼠不同脑区AC活性的影响。结果表明， YLSPS在150～600 mg/kg的条件下可依赖性地激活正常大鼠前额皮层AC活性，这与李云峰等［7］的实验结果相符。因此，YLSPS影响大鼠前额皮层AC活性可能是其抗抑郁活性的重要机制之一。而YLSPS在600 mg/kg的条件下对正常大鼠下丘脑、海马AC活性却有所抑制，这尚需进一步研究。
【参考文献】
［1］段晓群，焦 杨，张士军，等.玉郎伞多糖对肝星状细胞增殖和Ⅰ型胶原合成的影响［J］.中国现代医学杂志，2008，18（4）：423.
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［4］D Sa C,Eisch AJ,Bolger GB,et al.Differential expression and regulation of the cAMP-selective phosphodiesterase type 4Asplice variants in rat brain by chronic antidepressant administration［J］.Eur J Neurosci,2005,22(6):1463.
［5］Ono S,Aosasa S,Mochizuki H.Effects of a protease inhibitor on reduction of surgical stressin esophagectomy［J］.Am J Surg,1999,177(1):78.
［6］李云峰，刘艳芹，杨 明，等.无毒棉籽水提物中抗抑郁活性成分的筛选研究［J］.军事医学科学院院刊，2004，28（3）：250.
［7］李云峰，龚正华，张汉霆，等.抗抑郁剂对大鼠皮层腺苷酸环化酶活性的影响［J］.军事医学科学院院刊，1999，23（2）：130.