枣花丹合剂对小鼠镇静催眠作用的实验研究

             作者：周永忠 ，赵迅霞，于赓赓，包佳敏，陈芳花，贺弋

【摘要】  目的探讨枣花丹合剂对小鼠的镇静、催眠及抑制自主活动的作用。方法采用自主活动仪测定小鼠的活动次数，翻正反射法测定注射戊巴比妥钠后小鼠睡眠时间，对抗3-MP诱导惊厥实验来观察枣花丹合剂对正常小鼠的镇静催眠作用。结果枣花丹合剂高、中、低剂量组均能增加入睡小鼠的动物数，其中高剂量组具有明显抑制其自主活动及对抗惊厥的作用。结论枣花丹合剂对小鼠具有明显的镇静催眠效果。

【关键词】  枣花丹合剂; 镇静; 催眠; 小鼠

　枣花丹合剂是在借鉴临床各类镇静催眠药物的基础上由酸枣仁、落花生枝叶、丹参经一定组方组合而成。此复方已经临床证实可以显著地增加人夜间慢波睡眠时间[1]，但其治疗疗效尚不确切，且缺乏基础实验研究的相关资料，故需做进一步深入研究。本实验通过药物对小鼠行为学活动的影响来观察枣花丹合剂对正常小鼠的镇静催眠作用。

　　1 材料与仪器

　　1.1 动物昆明种小鼠265只，体质量(20±2)g，雄性，由宁夏医科大学实验动物中心提供。

　　1.2 仪器YLS-1A 多功能自主活动仪购自山东省医学科学院设备站。电子分析天平，上海天平仪器厂生产，型号：JA5003。旋转蒸发仪 上海安亭电子仪器厂生产，型号ZFQ-85A。离心机 珠海黑马仪器有限公司生产，型号1M1015B。

　　1.3 药品与试剂炒酸枣仁、落花生枝叶、丹参(以上各药均购自宁夏中医研究院)。戊巴比妥钠、3-巯基丙酸(3-MP)均购自Sigma公司。地西泮注射液(Diazepam，DZ)：上海旭东海普药业有限公司。

　　2 方法

　　2.1 动物分组将265只小鼠随机分为5组：枣花丹合剂大剂量组(ZHD大剂量组)、枣花丹合剂中剂量组(ZHD中剂量组)、枣花丹合剂小剂量组(ZHD小剂量组)。安定组、生理盐水组。每组45只，各组又随机分为A、B、C三个小组，每小组15只。依据预实验所测得ZHD最大耐受量为45 g/kg ，以45 g/kg为高剂量组，再以稀释至最大耐受量的1/2作为中剂量组, 1/4作为低剂量组,将ZHD分为大、中、小剂量组，分别给予45 ，22.5，11.25 g/kg·d枣花丹合剂灌胃。安定组按4 mg/kg·d灌胃。生理盐水组灌服与其它组等容积生理盐水，各组连续给药7 d，2次/d，于末次给药前8 h禁食，前1 h禁水，于末次给药30 min后开始记录小鼠睡眠时间、自主活动等指标。小鼠每次灌胃剂量为：0.4 ml/20g。

　　2.2 观察指标

　　2.2.1 小鼠自主活动次数小鼠连续灌胃7 d, 于末次给药30 min后将各不同剂量组中A小组15只小鼠置于ZYC-1型自主活动仪内(每台同时观测5只小鼠),测小鼠的自主活动次数，实验要求在安静、光线较暗的环境中检测。小鼠适应环境5 min，计数10 min内小鼠的的活动次数，并进行各组对比。

　　2.2.2 小鼠戊巴比妥钠阈下剂量协同实验对ZHD高中低不同剂量组的B小组小鼠分别灌胃45，22.5和11.25 g/kg的， 30 min后给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠20 mg/kg，观察20 min内小鼠翻正反射消失1 min以上的动物数并计算睡眠小鼠百分率。

　　2.2.3 戊巴比妥钠的小鼠的潜伏期及睡眠时间给所有的B组小鼠灌胃给药，30 min后给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠30 mg/kg，观察睡眠小鼠数以计算睡眠小鼠百分率，并记录入睡小鼠的睡眠时间(翻正反射消失到恢复的时间为睡眠时间。翻正反射消失 达1 min以上者确定为阳性，即已入睡)。

　　2.2.4 小鼠抗惊厥实验对各不同剂量组的C小组小鼠连续给药7 d,于末次给药30 min后腹腔注射20 μl/kg剂量的3-MP，观察有无惊厥现象的发生，计算其惊厥的发生率，以证实枣花丹合剂无镇静作用。

　　2.2.5 数据处理所得数据均用±s表示。用SPSS10.0软件单因素方差分析，方差不齐时用非参数法进行统计学处理 。