液-质联用测定乌头饮片中生物碱的含量

　　2.4  对照品溶液的制备

    精密称取乌头碱、次乌头碱对照品各6 mg及新乌头碱对照品8 mg,置同一100 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀释定容至刻度,摇匀；精密量取1 mL置100 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。

　　2.5  线性关系考察

    分别将乌头碱(0.060 8 mg/mL)、次乌头碱(0.064 6 mg/mL)、新乌头碱(0.082 4 mg/mL)混合溶液稀释10、50、100、1 000、10 000倍,依次注入液-质色谱仪,记录峰面积。分别以进样量(ng)为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,乌头碱回归方程为：Y＝1.556×105＋2.725×109X,r＝0.999 3；次乌头碱回归方程为：Y＝1.230×105＋3.078×109X,r＝0.999 5；新乌头碱回归方程为：Y＝1.725×105＋2.931×109X,r＝0.999 4。结果表明,乌头碱在0.006 08～6.08 ng、次乌头碱在0.006 46～6.46 ng、新乌头碱在0.008 24～8.24 ng范围线性关系良好。

　　2.6  含量测定结果

    按照上述确定的方法,对其余24批样品进行了测定,结果见表1。表1  不同饮片中生物碱含量测定结果（略）

　　3  讨论
   
　　本试验分别以二氯甲烷、乙醚、二氯甲烷-乙醚(1∶1)为溶剂,超声提取生川乌样品,结果以3个成分总量计,二氯甲烷-乙醚(1∶1)提取效率为最高。以二氯甲烷-乙醚(1∶1)为溶剂,分别超声提取15、30、45 min,提取生川乌样品,结果以超声提取30 min为宜。采用液-质联用技术测定乌头类中药及其炮制品中乌头碱、次乌头碱及新乌头碱的含量,具有灵敏、专属性强等优点,尤其适用于被测样品中只含微量乌头类生物碱或背景干扰较为复杂的情况。我们对收集的不同来源的多个制川乌、制草乌、白附片和黑顺片样品进行了含量测定,结果同一品种不同样品之间含量差异较大,所以对炮制品进行准确的含量测定,对于临床用药安全具有重要意义。

【参考文献】
  　　[1] 赵英永,崔秀明,张文斌,等.草乌药材HPLC指纹图谱研究[J].中国中药杂志,2006,31(13)：1056－1058.

　　[2] 王兆基,关锡耀,徐树棋,等.毒性中药生川乌质量标准研究[J].中成药, 2006,28(5)：651－655.

　　[3] 王 瑞,刘 芳,孙毅坤,等.不同附子炮制品中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量的HPLC测定[J].药物分析杂志,2006,26(10)：1361－1363.

　　[4] 张 梅,鲁 静,蒋 渝,等.川乌和制川乌中单酯及双酯型生物碱成分的含量测定[J].药物分析杂志,2005,25(7)：807－812.