HPLC测定止嗽丸中甘草苷的含量
作者：吴义忠，朱焕容，许丽芬
【摘要】 目的 建立止嗽丸中甘草苷的含量测定方法。方法 采用HPLC法，色谱柱：Hypersil C18柱(5 μm;4.0 mm×250 mm):流动相: 乙腈0.5％冰醋酸（体积比20∶80）；流速:1.1 mL/min；检测波长:276 nm；柱温:30 ℃；进样量:10 μL。结果 甘草苷在0.020～2.001 μg范围内与峰面积呈良好的线形关系：r=1.000，平均回收率98.7%，RSD为0.38%。结论 所建立的方法简便可行、重现性好、可作为止嗽丸质量控制的方法。
【关键词】 止嗽丸 HPLC 甘草苷 质量标准
止嗽丸收载于卫生部药品标准中药成方制剂第一册(1989)，由紫菀（制）、白前、甘草等七味中药组成，具有止咳去痰、疏风理肺之功效，用于风邪犯肺、咳嗽咽痒、痰不易咯出者。原质量标准中，只有性状和检查项，无其他检验项目。本文采用HPLC法对处方中甘草所含甘草苷进行含量测定，以便对该制剂进行质量控制。
1 仪器与试药
LC20A高效液相色谱仪，可变紫外检测器(日本岛津)。
甘草苷对照品（由中国药品生物制品检定所提供，批号：111610200503）；止嗽丸为实验室样品；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱:Hypersil C18柱(5 μm;4.0 mm×250 mm):流动相: 乙腈0.5％冰醋酸（体积比20∶80）；流速1.1 mL/min；检测波长276 nm；柱温30 ℃；进样量:10 μL。
2.2 对照品溶液的制备
取甘草苷对照品适量，加体积分数70％乙醇制成每1 mL含20 μg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备
取本品粉末约1 g，置具塞锥形瓶中，精密加入体积分数70％乙醇100 mL，称定重量，超声处理30 min，取出，再称定重量，用体积分数70％乙醇补足减失的重量，滤过，即得。
2.4 方法的专属性考察
在上述的色谱条件下，将甘草苷对照品溶液、供试品溶液、甘草阴性对照溶液注入液相色谱仪中，得HPLC图（见图1），结果显示阴性对照无干扰。
A.甘草苷对照品; B.止嗽丸样品; C.甘草阴性对照
图1 HPLC图谱（略）
Figure 1 HPLC chromatograms
2.5 线性关系的考察
精密称取甘草苷对照品适量，加流动相制成每1 mL分别含甘草苷2.001、4.002、10.00、20.01、40.02、200.1 μg的溶液，分别吸取10 μL进样测定峰面积。以峰面积为纵坐标，对照品的质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程:y=29543x+144.52，r=1.000。表明甘草苷进样量在0.020～2.001 μg范围内与峰面积呈良好的线形关系。