克拉霉素缓释片在不同释放介质中的释放度研究
作者：汪晓凌,梁超峰,谢志宏,周焘,黄霁
【摘要】 目的 研究自制与市售克拉霉素缓释片在不同释放介质中的释放度，分析其在体外的释放行为。方法 参考中国药典和美国药典两种释放度的方法，用HPLC测定自制与市售克拉霉素缓释片释放度，并对其释放模型和f2相似因子进行比较。结果 以BIAXINXL为参比制剂，自制缓释片在两种释放条件下， f2值均大于50；以KLACID MR为参比制剂，自制缓释片在两种释放条件下， f2值均小于50。结论 自制缓释片与市售的BIAXINXL的体外释放行为相似。
【关键词】 克拉霉素 缓释片 释放度 相似因子
Abstract:Objective To study the dissolution of clarithromycin sustained release tablets in different media and analyze their dissolution behavior in vitro. Methods Comparison of CHP2005 and USP31 two different dissolution methods, the dissolution of selfprepared and imported clarithromycin sustained release tablets were determined by HPLC, their kinetics model and similarity factor (f2 value) were compared. Results BIAXINXL was used as reference preparation， f2 value of selfprepared sustained release tablets was more than 50 in two different dissolution conditions. When KLACID MR was used as reference preparation， f2 value was less than 50 in two different dissolution conditions. Conclusion The dissolution behavior of BIAXINXL of selfprepared and imported clarithromycin sustained release tablets was consistent in vitro.
Key words:Clarithromycin；sustained release tablets；dissolution
克拉霉素（clarithromycin，CLM) 是大环内酯类抗生素，为红霉素的更新换代产品，用于治疗敏感菌引起的鼻咽感染、下呼吸道感染、皮肤感染和泌尿道感染［1］。药物释放度是评价药物制剂质量的内在指标，是制剂质量控制的重要手段，在缓、控、迟释制剂的前期开发及质量标准制定中有着重要的意义［2］。本文对自制的与两个市售的克拉霉素缓释片用两种释放介质进行体外释放度试验研究。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Dinoex P680A高效液相色谱仪,D800LS智能溶出仪（天津大学无线电厂）,磁极802离心沉淀器（上海手术器械厂）。
1.2 试药
克拉霉素对照品（中国药品生物制品检定所，含量97.5％，批号130558200501）；自制克拉霉素缓释片（批号：080810，500 mg/片）；克拉霉素缓释片 “KLACID MR”（克拉仙，Abbott Laboratories United Kingdom公司，500 mg/片，批号33472VA）和“BIAXINXL”（BIAXINXL FILMTAB，Abbott Laboratories N. Chicago USA公司，规格5 00mg/片，批号0323972/R338826AA21）；乙腈为色谱纯；其他试剂均为市售分析纯。
2 方法与结果
2.1 含量测定
2.1.1 色谱条件与系统适用性试验 参照中国药典2005年版二部附录VD测定［3］
以Diamonsil C18(5 μm, 250 mm×4.6 mm)为色谱柱；以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾9.11 g，加水溶解并稀释至1 000 mL，加三乙胺2 mL，用磷酸调节pH值至5.5）乙腈（体积比600∶400）为流动相；检测波长为210 nm；流速为1.0 mL/min；柱温45 ℃。理论板数按克拉霉素峰计算不低于3 000；拖尾因子不得过2.0；克拉霉素峰与相邻各杂质峰的分离度应符合要求。
2.1.2 标准曲线制备 取克拉霉素对照品适量，用流动相制成每1 mL含1.969 mg的溶液作为贮备液，分别精密取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL置10 mL量瓶，用流动相稀释至刻度，分别取20 μL进样测定，以峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标作线性回归，得标准曲线方程为： Y=17.143X-0.0674， r=1.000，线性范围为0.098～0.689 mg/mL。
2.1.3 测定方法 取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于克拉霉素35 mg），置100 mL量瓶中，加流动相适量，超声20 min，放置至室温，以流动相稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试液，量取20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图；另取克拉霉素对照品适量，精密称定，加流动相制成每1 mL含 0.35 mg的溶液，作为对照品溶液，同法测定，按外标法计算，即得。
2.1.4 回收率及重复性试验 分别取自制克拉霉素缓释片的空白辅料适量，加入精密称定的克拉霉素对照品，按“2.1.3”项方法制成供试液，测定回收率,并进行重复性试验。结果平均回收率为99.3％（n＝9），RSD为0.86%；重复性试验结果RSD为0.45%（n＝6）。
2.1.5 含量测定结果 自制克拉霉素缓释片含量为99.1％；克拉霉素缓释片“KLACID MR”含量为97.8％；克拉霉素缓释片“BIAXINXL”含量为98.3％。
2.2 释放度测定
2.2.1 释放度方法一 参照《中国药典》2005年版（二部）“克拉霉素片溶出度检查”项及附录XD第一法［3］
取本品，以pH5.0醋酸盐缓冲液(取0.1 mol/L醋酸钠溶液，用冰醋酸调节pH值至5.0)900 mL为溶出介质（以下称为介质1)，转速100 r/min，温度为（37.0±0.5） ℃，依法操作。分别于1、2、4、6、8、10、12 h取溶液适量，过滤，滤液作为供试液，照“2.1.1”项下的色谱条件，取10 μL进样，记录色谱图；另取克拉霉素约28 mg置50 mL量瓶，加甲醇5 mL使溶解，加介质稀释至刻度，制成每1 mL约含0.56 mg 的溶液，同法测定。
2.2.2 释放度方法二 参照《美国药典》USP31NF26TEST2“克拉霉素缓释片释放度”项规定［5］
以含0.5％的十二烷基硫酸钠的磷酸盐缓冲液（pH 6.8）900 mL为溶出介质（以下称为介质2），转速为100 r/min，温度为（37.0±0.5） ℃，分别于1、2、4、6、8、10、12、16、20、24 h取5 mL溶液（同时补充等温度等体积的新鲜介质），滤过，取续滤液在2 500 r/min条件下离心10 min，取上清液作为供试品溶液；照“2.1.1”项下的色谱条件，取10 μL进样，记录色谱图；另取克拉霉素约28 mg置50 mL量瓶，加甲醇5 mL使溶解，加介质稀释至刻度，制成每1 mL约含0.56 mg 的溶液，同法测定。
2.2.3 克拉霉素在两种释放介质中的标准曲线 取克拉霉素对照品适量，甲醇制成每1 mL含1.933 mg的溶液作为贮备液，分别精密取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL置10 mL量瓶，分别加两种释放介质稀释至刻度，按释放度项下测定法测定峰面积，以峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标作线性回归，得标准曲线方程
介质1：Y=7.9596X+0.0073, r=0.999 9；
介质2：Y=8.0637X-0.0019, r=0.999 8。