丹参多酚酸口腔崩解片的质量标准研究
作者：周毅生，孟江，咸银库，廖华卫，刘林，段芳
【摘要】 目的 建立丹参多酚酸口腔崩解片的质量标准。方法 采用薄层色谱法鉴别丹参多酚酸口腔崩解片中主要成分丹酚酸B，采用高效液相色谱法及紫外可见分光光度法分别测定丹参多酚酸口腔崩解片中的丹酚酸B及丹参总酚酸的含量，并测定其崩解时限和片重差异。结果 丹参多酚酸口腔崩解片平均崩解时限为23.5 s，且片重差异符合规定；丹酚酸B在41.04～205.2 μg·mL-1范围内色谱峰面积与进样量间线性关系良好，r=0.999 6，平均回收率为99.96％，RSD为0.55％；原儿茶醛在41.36～248.16 μg·mL-1范围内色谱峰面积与进样量间线性关系良好， r=0.999 6， 平均回收率为96.67％， RSD为1.54％。 结论 建立了该制剂的质量标准，其鉴别与含量测定方法简便、可靠，可作为该制剂的质量控制指标。
【关键词】 丹参多酚酸 丹参酚酸B 口腔崩解片 质量标准
Abstract:Objective To establish the quality standard of orally disintegrating tablets of salvianolic acids. Methods The main ingredient of the tablets, salvianolic acid B, was identified by TLC. The contents of salvianolic acid B and total salvianolic acids in the orally disintegrating tablets of salvianolic acid were measured by HPLC and UV. The disintegration time and tablet weight were determined．Results The tablets of salvianolic acids disintegrated in 26.5 seconds, and the tablet weight was fit for the criterion．A good linearity of salvianolic acid B was obtained within the range of 41.04-205.2 μg·mL-1 with the correlation coefficient 0.9996．The recovery was 99.96 ％ and RSD 0.55 ％．A good linearity of protocatechuic aldehyde was obtained within the range of 41.36-248.16 μg·mL-1 with the correlation coefficient 0.9996．The recovery was 96.67％ and RSD 1.54％．Conclusion The method for identifying and determining salvianolic acids is useful for the quality control of orally disintegrating tablets of salvianolic acids.
Key words:salvianolic acids B; salvianolic acid ; orally disintegrating tablets; quality standard
丹参多酚酸是中药丹参中的水溶性成分，具有显著的抗心肌缺血作用，降低心脏耗氧量，并能对抗诱导的血小板聚集和抑制血栓的形成。临床试验研究表明，丹参多酚酸对于冠心病、心绞痛，疗效显著、确切，病人使用安全［1］，其中丹酚酸B具有较高的生物活性。口腔崩解片是近年来国内外研究开发的一种速释新剂型，不需用水或只需少量水，亦无需咀嚼，而只需将药物置于舌面上，遇唾液迅速崩解后，随吞咽动作入胃起效，方便老人、儿童、吞咽困难或特殊环境下的患者用药［2］。本研究通过对丹参多酚酸口腔崩解片的质量标准研究，为该制剂的质量控制提供依据。
1 仪器与试药
1.1 试剂与试药
丹参多酚酸口腔崩解片(自制,规格:0.25 g/片)；丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检定所，批号：111562200605)；原儿茶醛对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110810200506)；乙腈、甲醇和甲酸为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
1.2 仪器与设备
Waters自动进样液相色谱仪，alliance_2966型光电二极管阵列检测器(美国)；UV2450型紫外可见分光光度计(日本岛津)；色谱柱 Luna C18(2) 100A (5 μm,250 mm×4.60 mm)及配套预柱(广州菲罗门科学仪器有限公司)；电子分析天平(赛多利斯startorius/BP211D)；ZFI型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)；DL360A超声波清洗器(上海之信仪器有限公司)。
2 丹参多酚酸口腔崩解片的鉴别
2.1 理化鉴别 取本品研细后的粉末适量，加水超声处理20 min，放冷，过滤，在滤液中加1滴FeCl3乙醇溶液，立即出现污蓝色沉淀。
2.2 薄层鉴别 取10片自制的丹参多酚酸口腔崩解片研碎，精密称定0.25 g，置50 mL容量瓶中，加水30 mL，超声20 min，定容至刻度，放冷，过滤，取续滤液5 mL，稀释定容至10 mL，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，制成0.2 mg·mL-1的75%甲醇溶液，作为对照品溶液。分别吸取供试品溶液、对照品溶液各5 μL点于同一硅胶G板上，以三氯甲烷甲醇甲酸(体积比8∶3∶1)为展开剂，展开，取出，晾干。喷以5%FeCl3乙醇液，供试品溶液与对照品液在相应的位置上有相同颜色的斑点，结果见图1。
1.样品液；2.对照液；3.样品液；4.空白液
图1 丹参多酚酸口腔崩解片薄层鉴别图（略）
Figure 1 TLC of orally disintegrating tablets
3 丹参多酚酸口腔崩解片的检查
3.1 崩解时限测定方法 取样品1片，置事先于(37±1) ℃水浴中预热的10 mL干燥烧杯中，加入(37±1) ℃ 的水2 mL，静置，观察至完全崩解并能全部通过2号筛的时限，不得超过1 min。压制3批样品，每批分别测定6 片。结果各批的平均崩解时间为23.5 s。
3.2 重量差异检查 参照《中国药典》2005年版中重量差异检查的要求：片重0.25 g，重量差异限度为±0.75 %。对所压制的3批样品分别检查，结果均符合规定。
4 丹参多酚酸口腔崩解片的含量测定
4.1 丹酚酸B的含量测定
4.1.1 色谱条件 按《中国药典》2005年版一部丹参含量测定项下：色谱柱 Luna C18(2) 100A （5 μm，250 mm×4.60 mm）及配套预柱；流动相：甲醇乙腈甲酸水(体积比30∶10∶1∶59)；流速：1.0 mL·min-1； 检测波长： 286 nm； 进样体积： 10 μL； 柱温：30 ℃； 理论塔板数按丹酚酸B计算应不低于2 000。色谱图见图2。
4.1.2 丹酚酸B对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B对照品适量，加体积分数75%甲醇溶液，溶解定容至25 mL量瓶中，得到质量浓度为0.205 2 mg·mL-1的丹酚酸B对照品溶液。
4.1.3 供试品溶液的制备 取10片自制的丹参多酚酸口腔崩解片，在研钵中研碎，精密称定0.25 g，置50 mL量瓶中，加水30 mL，超声20 min，定容至刻度，放冷，过滤，取续滤液5 mL，稀释定容至10 mL，即得。
4.1.4 空白辅料溶液的制备 按丹参多酚酸口腔崩解片的处方配比，精密称取混合均匀的辅料2.489 g，取约0.25 g，依“4.1.3”项进行处理，即得。
4.1.5 标准曲线的建立 分别精密吸取对照品溶液2、4、6、8、10 mL，稀释定容至10 mL，分别进样10 μL，记录色谱图。以色谱峰面积（A）对丹酚酸B质量浓度（ρ）作回归，回归方程为：A=9544.8ρ-60876，r=0.999 6，表明丹酚酸质量浓度在41.04～205.2 μg·mL-1范围内线性关系良好。