慢性乙型肝炎核心抗体阳性与阴性患者外周血红细胞膜CR1分子和白细胞介素
作者：吴红光，杨文东，韩景银，陈华丽，张忠广
【关键词】 慢性乙型肝炎；白细胞介素
［摘 要］ 目的：观察同为HBsAg阳性、HBeAg阳性和HBVDNA高复制，抗HBc阳性与抗HBc阴性的慢性乙肝患者的免疫指标，并探讨其临床价值。方法：把患者分为抗HBc阳性组和抗HBc阴性组，进行乙型肝炎病毒标志物（HBVM）、ALT、HBVDNA定量、白细胞介素2受体（sIL2R及mIL2R）、红细胞膜补体受体1型分子（CR1）的数量表达、血清IgM和IgG水平测定。结果：两组HBVDNA复制差异无显著性（P＞0.05）；血清ALT活性抗HBc阳性组显著高于抗HBc阴性组（P<0.01）；两组sIL2R水平显著高于对照组（P<0.01），mIL2R的表达显著低于对照组（P<0.01）；抗HBc阳性组血清sIL2R水平显著高于抗HBc阴性组（P<0.01），mIL2R的表达显著低于抗HBc阴性组（P<0.01）；血清IgM和IgG水平均显著高于对照组（P<0.01），但两组差异无显著性（P＞0.05）；两组红细胞膜CR1分子表达显著低于对照组（P<0.01），抗HBc阳性组红细胞膜CR1分子表达显著低于抗HBc阴性组（P<0.01）。结论：两组患者细胞免疫和RCIA功能均降低，体液免疫呈“亢进”状态，抗HBc阳性组优为显著。本研究对指导慢性乙型肝炎患者的和预后具有一定的价值。
［关键词］ 慢性乙型肝炎；白细胞介素2受体；红细胞膜补体受体1型分子；免疫球蛋白；抗HBc
许多研究证实，肝病的发生与机体的免疫功能紊乱有密切的关系。临床治疗同为HBsAg阳性、HBeAg阳性和HBVDNA高复制，抗HBc阳性与抗HBc阴性的慢性乙型肝炎患者，临床疗效存在差异。我们把患者分为抗HBc阳性组和抗HBc阴性组，进行了免疫指标的观察，并探讨其临床价值。
1 对象与方法
1.1 研究对象 研究对象为2003年3月至2005年3月我院感染科门诊及住院就诊的慢性乙型肝炎患者75例，皆为HBsAg阳性、HBeAg阳性和HBVDNA高复制。其中抗HBc阳性组39例，年龄14岁～67岁，平均39.2岁；抗HBc阴性组36例，年龄17岁～65岁，平均36.8岁。均符合2000年中华医学会传染病与寄生虫学会分会、肝病学会修订的病毒性肝炎诊断与分型标准［1］。正常对照（NC）组为本院同期健康体检者30名，年龄18岁～69岁，平均39.5岁。乙型肝炎病毒标志物（HBVM）均阴性，ALT＜40 U/L。以上各组2周内均未使用类固醇激素及免疫抑制剂。
1.2 方法
1.2.1 主要试剂和仪器 HBVM试剂盒购自山东潍坊3V公司；可溶性白细胞介素2受体（sIL2R）试剂购自白求恩医科大学免疫学教研室；植物血凝素（PHA）为上海伊华临床医学科技公司产品；HBVDNA定量试剂购自深圳匹基生物有限公司；ALT试剂为北京中生公司产品；鼠抗人CR1单抗E11（IgG1），鼠抗人CD2单抗（无关单抗），碱性磷酸酶标记的羊抗鼠IgG，均购自第二军医大学长海免疫室；QM300型特定蛋白分析仪测定血清IgM和IgG，标准液及质控品均为法国产品；芬兰产Multiskan MK3酶标仪、Wellwash 4 MK2洗板机；PE7000型荧光定量PCR仪。
1.2.2 研究项目及方法 HBVM采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法；sIL2R采用双抗体夹心间接ELISA法；T细胞上白细胞介素2受体（mIL2R）的表达采用APAAP免疫组化法测定；HBVDNA定量采用实时荧光聚合酶链法；ALT采用采用赖氏法；根据［2］建立的定量检测红细胞膜补体受体1型分子（CR1）的数量表达的ELISA法，检测结果以患者组的A405值与空白对照的A405值之差，作为测定值。
1.3 统计学处理 计量资料均以±s表示，组间显著性比较采用均数资料t检验及配对资料t检验。
2 结果
2.1 各组外周血sIL2R、mIL2R、IgM 及IgG水平差异 见表1。表1 各组外周血sIL2R、mIL2R、IgM 及IgG的检测结果(略),表1显示：两组sIL2R水平显著高于对照组（P<0.01），mIL2R的表达显著低于对照组（P<0.01）；抗HBc阳性组血清sIL2R水平显著高于抗HBc阴性组（P<0.01），mIL2R的表达显著低于抗HBc阴性组（P<0.01）；血清IgM和IgG水平均显著高于对照组（P<0.01），但两组差异无显著性（P＞0.05）。
2.2 各组外周血红细胞膜CR1分子表达及ALT和HBVDNA水平差异 见表2。表2 各组外周血红细胞膜CR1分子表达及ALT和HBVDNA的检测结果(略),表2显示：两组红细胞膜CR1分子表达显著低于对照组（P<0.01）；抗HBc阳性组红细胞膜CR1分子表达显著低于抗HBc阴性组（P<0.01）；两组HBVDNA复制差异无显著性（P＞0.05）；血清ALT活性抗HBc阳性组显著高于抗HBc阴性组（P<0.01）。
3 讨论
本研究结果显示：抗HBc阳性组与抗HBc阴性组相比，HBVDNA复制均处于高水平，但差异无显著性，说明均存在大量乙肝病毒的复制；血清ALT活性抗HBc阳性组显著高于抗HBc阴性组，说明抗HBc阳性组患者肝细胞损伤严重。可能与以下两方面因素有关。
3.1 抗HBc阳性组与抗HBc阴性组相比 细胞免疫功能显著降低；体液免疫功能呈现亢进，但两组差异无显著性。报道［3］：急慢性乙型肝炎患者的细胞免疫功能受到一定程度的抑制，体液免疫呈现“亢进”，可能与HBV感染白细胞有关。血清HBsAg阳性患者，白细胞中HBsAg的检出率为100%，部分患者的白细胞中携带高复制的病毒。目前认为乙型肝炎肝细胞病变主要由细胞免疫反应所致，免疫反应攻击的靶抗原主要是HBcAg，而效应细胞主要是特异性细胞毒T淋巴细胞，是宿主的免疫反应对感染肝细胞的攻击，导致肝细胞的破坏和溶解［4］。肝细胞的损伤并不取决于病毒数量的多少，而是取决于机体的免疫系统情况。sIL2R来源于细胞膜上P55蛋白，它是由活化淋巴细胞IL2受体（mIL2R）裂解释放入血形成，是淋巴细胞活化的标志。血清sIL2R增多时，表明有大量的活化T淋巴细胞参与免疫反应，造成肝细胞的损伤，使血液中的ALT活性升高。同时，大量的sIL2R与mIL2R竞争结合IL2，使IL2消耗，其作用类似封闭因子，使IL2参与的T细胞亚群分化、增殖功能降低，mIL2R的表达也降低，造成细胞免疫功能受抑制［5］。本研究显示：两组sIL2R水平显著高于对照组，mIL2R的表达显著低于对照组，说明两组细胞免疫功能显著低于对照组。抗HBc阳性组血清sIL2R水平显著高于抗HBc阴性组，mIL2R的表达显著低于抗HBc阴性组，说明抗HBc阳性组细胞免疫功能显著低于抗HBc阴性组。血清IgM和IgG水平均显著高于对照组，但两组差异无显著性，说明体液免疫功能呈现“亢进”，两组差异无显著性。
3.2 抗HBc阳性组与抗HBc阴性组相比，红细胞免疫粘附（RCIA）功能显著降低。红细胞的免疫功能主要有：消除体内的免疫复合物（IC）；促进吞噬细胞的吞噬功能；增强T淋巴细胞免疫功能，更有效地清除IC［6］。文献报道［7］：肝病患者存在红细胞膜CR1分子表达降低，致RCIA功能降低，且急性向慢性、肝硬化至肝癌低下程度呈趋势。本研究显示：两组红细胞膜CR1分子表达显著低于对照组，说明两组RCIA功能显著低于对照组。抗HBc阳性组红细胞膜CR1分子表达显著低于抗HBc阴性组，说明抗HBc阳性组RCIA功能显著低于抗HBc阴性组。RCIA功能降低，可使T、B细胞的调控失去平衡，而导致整个免疫系统的功能降低。RCIA功能低下，可导致血中循环免疫复合物（CIC）浓度升高，并在相应组织中沉积，而引起炎症和组织损伤。
总之，两组患者细胞免疫和RCIA功能均降低，体液免疫呈“亢进”状态，抗HBc阳性组优为显著。因此，在对慢性乙型肝炎患者进行抗病毒过程中，对同为HBsAg阳性、HbeAg阳性和HBVDNA高复制的患者应区别诊治。本研究结果对指导慢性乙型肝炎患者的治疗和预后具有一定的价值。
文献：
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