恶性黑色素瘤细针吸取细胞病理学观察

                      作者：张灿云,王化修,粟海燕,杨华

【摘要】  目的:观察恶性黑色素瘤的针吸细胞病特点,探讨细针吸取在诊断恶性黑色素瘤中的价值。方法：细针吸取物涂片，HE染色，光镜下观察，4例涂片同时作HMB?45免疫组化标记。结果：19例细胞涂片具有典型异质性，18例瘤细胞胞质内见黑色素颗粒，4例免疫组化标记HMB?45（+）。结论：原发部位或转移灶细针吸取辅免疫组化标记对恶性黑色素瘤的诊断有重要价值。

【关键词】  恶性黑色素瘤；细针吸取；细胞病理学

　　Fine Needle Aspiration Cytopathology Study of Malignant Melanoma

　　Abstract Objective To observe the fine needle aspiration cytopathology(FNAC) features of malignant melanoma(MM) and to investigate the value of FNAC in confirming the diagnosis of MM.Methods The cellular smears were obtained by fine needle aspiration and stained with HE.Immunohistochemistry was used to detect the expression of HMB?45 in 4 cases. Results The cellular smears showed heterogeneity in 19 cases, melanin was observed in cytoplasm of 17 cases,HMB?45 protein was mainly localized at cytoplasm(positive case was 4,positive rate was 100%). Conclusion FNAC assisted with immunohistochemistry is helpful in confiming the diagnosis of malignant melanoma .

　　Key words：Malignant melanoma;Fine needle aspiration; Cytopathology

　　尽管一些罕见部位恶性黑色素瘤（malignant melanoma，MM）的病例报道不断增多，但绝大多数MM发生于体表皮肤、黏膜，且伴有浅表淋巴结转移。因此，采用细针吸取细胞病理学（fine needle aspiration cytopathology，FNAC）诊断MM是适宜的，但MM细胞形态变化多样，经验不足者常造成误诊。我们用FNAC诊断MM获得满意效果，现将资料完整的19例报告如下。

　　1  材料与方法

　　1．1  材料  19例MM病例中，男性15例，女性4例。发病年龄：31岁～40岁1例,41岁～50岁1例,51岁～60岁4例,61岁～70岁7例,71岁～80岁6例；病程在2个月～2 a;9例属色素痣恶性变。有明显原发病灶者15例：足部皮肤9例，手部皮肤2例，头顶部、髂部、腘窝皮肤各1例，上腭肿块1例；4例无明显原发病灶。穿刺部位：腹股沟淋巴结8例，颈淋巴结3例，锁骨上淋巴结1例，腋下淋巴结2例；上腭肿块1例，背部肿块1例，足部肿块3例。

　　1．2  方法  采用细针穿刺细胞学“一体化”工作程序。询问病史，检查确定肿物大小、部位、质地后，针吸部位常规消毒，用10 ml一次性注射器接上7号～8号针头，直接刺入肿块内，抽足负压后在不同方向抽吸2次～3次，见吸取物足够即退针。将吸取物涂片2片～4片，并仔细观察吸取物性状，稍干后固定于95%酒精内，15 min后做HE染色（可同时将未固定的涂片作瑞氏染色）。封片后，光镜下观察，4例同时作HMB?45免疫组化标记。

　　2  结果

　　2．1  FNAC诊断  19例经FNAC辅以免疫组化直接诊断MM，其中14例细胞学诊断为淋巴结转移性MM，4例诊断为原发性皮肤MM，1例上腭肿块诊断为上腭部黏膜MM。

　　2．2  MM细胞形态学特点  FNAC涂片中所见瘤细胞数量多少不等，瘤细胞形态变化多样，多呈圆形、多角形、长梭形等，散在或成团、成片状分布并有腺样结构。细胞质一般较丰富，细胞核大而多形，染色质呈粗颗粒状或细密，有的细胞核中可见嗜酸性核仁和空泡。在圆形细胞中多见核位偏心，可见双核及多核瘤巨细胞、核分裂像易见、细胞界限清楚、细胞体积大小不等。最有诊断价值的是瘤细胞胞质中存在棕褐色黑色素颗粒，呈大小不等的砂砾状或均匀细密的细沙状。本组18例瘤细胞胞质中可见黑色素颗粒。

　　2．3  免疫组化  4例免疫组化HMB?45（+），其中包括1例光镜下未见黑色素颗粒的病例。阳性表达率100%，阳性表达产物分布于胞质内。

　　3  讨论

　　针吸细胞病由于吸取物新鲜、固定、染色及时，无人为色素和沉着物污染，所以能清晰显示瘤细胞形态结构及瘤细胞内色素颗粒特征，其诊断黑色素瘤是准确可靠的。FNAC诊断时，首先根据细胞形态判定是否符合MM的细胞形态学特征：既有恶性肿瘤细胞的一般特点，又呈多样性［1］。无论是皮肤还是黏膜MM，通常都有典型的异质性、生物多样性和生物反应性等特点，细胞形态复杂多样，如长梭形、三角形、大细胞、小细胞、印戒样细胞等多种形态［2］。马博文等［3］观察皮肤MM细胞学涂片将其分为上皮样型、梭形细胞型、痣细胞型、气球样型、巨细胞型、浆细胞样型、淋巴细胞样型、多色素细胞型等多种形态细胞学类型。诊断MM的特征性依据是细胞质内或质外见到黑色素颗粒［4］，但必须注意鉴别，确认是黑色素还是含铁血黄素。可用组织化学方法鉴别，应与某些非MM病变中出现的黑色素颗粒鉴别，如色素痣、色素性基底细胞癌、滑膜肉瘤、透明细胞肉瘤、色素性绒毛结节性滑膜炎、腱鞘巨细胞瘤等。另外，MM有无色素细胞型［5］，胞质多无黑色素颗粒或仔细查找仅见极少数黑色素颗粒，则通过免疫细胞化学HMB?45（+）具有重要辅助诊断价值（S?100一般不用于FNAC涂片免疫组化，因固定于乙醇的细胞与S?100蛋白抗体不反应，如要进行S?100蛋白检查，可将涂片固定于甲醛中，然后进行免疫细胞化学染色）。本组1例光镜下未见明显黑色素颗粒，但免疫细胞化学HMB?45（+），结合其细胞形态学特征诊断为MM。FNAC诊断MM操作简便、诊断快速（一般可在45 min内发出诊断报告）、结果准确可靠，且能避免活检手术创伤大、伤口不易愈合及不适当手术造成肿瘤细胞扩散等弊端。有作者［3］报道27例MM原发病灶FNAC并没有迅速发生转移的情况出现，似乎FNAC比不彻底的切除活检更为安全。因此，FNAC诊断MM安全可行，有较大的实用价值，值得推广使用。

【】
  　　［1］ 许欣，胡维维，陈凤兰,等.恶性黑色素瘤细针穿刺细胞学检查14例分析［J］.实用癌症杂志,2003,18(3):303?305.

　　［2］ 纪小龙,徐薪,申明识.黏膜黑色素瘤的常见临床病理特点［J］.诊断病理学杂志,2002,9(2):108?110.

　　［3］ 马博文,曹刚,房新志,等.原发性皮肤恶性黑色素瘤的针吸细胞病理学观察［J］.诊断病理学杂志,2001,8(2):85?87.

　　［4］ 何长青,李进.转移性恶性黑色素瘤细针吸取细胞形态学观察［J］.临床与实验病理学杂志,2005,20(4):497?498.

　　［5］ 常桂兰.恶性黑色素瘤40例临床细胞学分析［J］.齐鲁医学检验,2003,14(1):46?47.