自动分析仪两种血氨测定方式的比较

【摘要】  采用清洗仪器反应杯后单独测定与其他试验一起随机测定两种方式来测定血氨，对两种测定方式的准确性、重复性作比较，在20例患者的样品测定中，两种方式所测得的血氨均值差异有显著性。两种方式所测血氨值的批内CV值分别为3.42%和11.29%。结果表明，随机测定血氨因为易受到其他试验试剂的影响，其结果误差较大。

【关键词】  血氨；干扰；重复性

    重症肝炎、肝硬化、肝癌、肝性脑病患者肝脏清除氨的能力下降导致血氨升高［1］，且血氨水平和肝脏病损的范围和程度相关，测定血氨有助于诊断和疗效观察。采用酶动力学法测定血氮简便、标本微量、准确［2］，利用生化分析仪测定血氨操作简便、快速，但与其他的生化项目测定比较，血氨测定存在不明确的干扰因素，致使测定结果的重复性较差。

　　1  材料和方法

　　1.1  试剂 

　　英国朗道试剂，R1：0.15 mol/L三乙醇胺缓冲液，pH 8.6,0.26 mmol/L辅酶II NADPH，3.88 mmol/L a?酮戊二酸。R2：谷氨酸脱氢酶（GLDH），含量≥1 200 U/L。标准液：294 μmol/L氨标准液。

　　1.2  仪器 

　　日立7170全自动生化分析仪。

　　1.3  原理 

　　a?酮戊二酸+NH3+NADPHGLDH>谷氨酸+NADP+。

　　1.4  测定方法 

　　主要参数：R1 250 μl， R2(10倍稀) 50 μl，副波长600 nm，主波长340 nm,取点15～34，两点终点法。

　　1.4.1  方式1
 
　　用1 mol/L NaOH执行仪器反应杯清洗程序后单独测定。

　　1.4.2  方式2 

　　与其他试验标本一起随机测定。

　　2  测定结果

　　2.1  方法性能评价 

　　用同一种方法的两种方式，对20例患者标本的血氨测定，即清洗仪器反应杯后单独测定与其他试验一起随机测定，结果见表1。经配对资料t检验，两种方式测定结果差异有显著性（P<0.01），结果表明，随机测定血氨因为易受到其他试验试剂的影响，其结果误差较大。表1  清洗反应杯后测定值与随机测定值（略）

　　2.2  重复性评价试验 

　　对同一120 μmol/L定值血用两种方式测定各测定20次，方式1测定值为(120.4±4.11)μmol/L,批内CV为3.42％；方式2测定值为(134.9±15.2)μmol/L,批内CV为11.29％，两种方式的测定结果差异有显著性（P<0.01）。

　　3  讨论

    酶动力学法准确度和精密度良好，适宜用半自动［3］和全自动生化分析仪测定。但在实际工作中发现，由于样品中的血氨含量甚微，影响测定因素较多，致使测定结果的重复性较差。实验结果表明，测定血氨标本，用1 mol/L NaOH 清洗仪器反应杯后测定与其他试验一起随机测定结果有较大的差别，我们在对20例患者的标本用同一种试剂不同的测定方式所测得的血氨结果表明，随机所测得的血氨结果比清洗仪器反应杯后测得的结果普遍偏高，可能是反应杯由其他试验携带污染，导致结果偏高。使用1 mol/L NaOH清洗仪器反应杯后，单独测定测得血氨结果的批内CV为3.42％。而随机测定血氨结果的批内CV为11.29％，这也表明了在生化分析仪随机测得的血氨结果差异大，准确性差。

    血氨测定易受环境及其他返流干扰因素的影响，而使测定结果不准确和不稳定。因此，血氨不可以和其他的试验同时测定，血氨标本在清洗仪器反应杯后测定，目的是将对血氨测定的影响因素降至最低，以保证血氨测定的准确性。

    本试剂盒提供的试剂1和试剂2的比例为100:1,在日立7170全自动生化分析仪参数设置时,两者的体积比例不宜直接采用,故将试剂2稀释用20％乙二醇10倍后使用。用具有稳定酶制品的乙二醇溶液做稀释剂［4］，稀释后的试剂2置冰箱可保存数月。

【】
  　　［1］黄宇泽.196例重肝患者血氨含量测定［J］.陕西医学检验，2000，15(1)：38.

　　［2］王志诚,徐明玉.酶动力学法测定血氨的全自动快速分析［J］.上海医学检验杂志，1995，10（1）：26.

　　［3］马振愚.用半自动生化分析仪二点酶动力学法测定血氨［J］.陕西医学检验，1999，14(2):9.

　　［4］倪星忠.临床生化酶试剂方法［M］.第1版.上海：华东师范大学出版社，1993：14?15.