HBsAg HBeAg含量及前S1抗原与乙肝病毒DNA间关系探讨
作者：钱瑛，胡志刚，乔伟振，陈国千
【关键词】 HBsAg；HBeAg；前S1抗原；乙肝病毒DNA
我国在世界上属于乙型肝炎病毒（HBV）感染的高发区，乙肝表面抗原（HBsAg）的携带者已超过10%。随着新型的时间分辨荧光免疫法(TRFIA)的应用，使HBV免疫检测趋于超微量化。为了解HBsAg、HBeAg含量以及前S1抗原与乙肝病毒DNA之间的关系，本文对乙肝患者和乙肝病毒携带者共97例进行了HBsAg和HBeAg含量、乙肝病毒DNA及前S1抗原的检测，现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 对象
2005年7月至11月在我院门诊和病房就诊的急、慢性乙肝患者和乙肝病毒携带者97例，其中男65例，女32例，年龄15岁~68岁。健康对照22例，男15例，女7例，年龄23岁~52岁。留取清晨空腹静脉血5 ml,分离血清，-20℃冻存待检。
1.2 检测方法
1.2.1 HBsAg、HBeAg定量
Wallac公司生产的Auto DELFIA1235时间分辨荧光免疫分析仪，上海新波公司配套试剂盒，HBsAg阳性界值10 ng/ml, HBeAg阳性界值0.03 Ncu/ml。
1.2.2 乙肝病毒DNA
Roche公司生产的Lightcycler荧光定量PCR仪,上海复星医药集团提供荧光定量试剂盒,>103 copy/ml为阳性。
1.2.3 前S1抗原
双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA），上海阿尔法生物技术有限公司配套试剂盒。
1.3 统计学分析
采用两组独立样本的t检验,相关性分析，配对分类资料χ2检验，所有数据用EXCEL2003软件自带的统计功能处理。
2 结果
2.1 不同HBsAg、HBeAg含量与HBV?DNA关系
HBV?DNA阳性组HBsAg、HBeAg含量大于阴性组，差异均有显著性，结果见表1。HBV?DNA阳性组HBsAg、HBeAg含量与HBV?DNA含量成正相关，相关系数（r）分别为0.328，P<0.01；0.484，P<0.01。表1 HBsAg、HBeAg含量与HBV?DNA关系(略)注：*HBsAg含量与阴性组比较P<0.01；**HBeAg含量与阴性组比较P<0.01。
2.2 HBV?DNA与HBeAg、Pre?S1间的关系
结果见表2。HBV?DNA阳性率70.1%（68/97），HBeAg阳性率39.2%（38/97），Pre?S1阳性率64.9%（63/97），经配对资料χ2检验，HBV?DNA阳性率大于HBeAg阳性率，差异有显著性，HBV?DNA 与Pre?S1阳性率差异无显著性。表2 HBV?DNA与HBeAg、Pre?S1间的关系（略）注：HBV?DNA与HBeAg相比χ2=23.36，P<0.05；HBV?DNA与Pre?S1相比χ2=1.23，P>0.05。
3 讨论
乙肝病毒复制是一个相当复杂的过程，目前还存在许多未解之迷。HBsAg作为HBV感染的特异标志，是由S 基因编码的蛋白，本文结果显示虽然其含量与HBV?DNA含量成正相关，但关系不够密切。这可能是因为部分慢性乙肝患者中，HBsAg低表达或S区基因变异使常规检测试剂无法检出，但此时仍有病毒复制。而在无病毒复制者中，仍可能存在的小球形颗粒的包膜蛋白几乎全部是S蛋白［1，2］，表现出HBsAg含量较高。
HBV?DNA是反映病毒复制活动最直接、可靠的指标［3］。一般认为HBeAg阳性和含量与乙肝病毒的复制情况及传染性的强弱成正相关［4］。本实验结果：HBeAg含量与HBV?DNA含量成正相关，相关程度中等（r=0.484），也验证了这一理论。HBV?DNA阳性率（70.1%）大于HBeAg阳性率（39.2%），P<0.05，说明 HBV?DNA比HBeAg更敏感。在HBV?DNA阳性患者中，有48.5%（33/68）的患者HBeAg为阴性，可能是由于与HBeAg表达有关的前C区或(和)C区发生启动子/终止密码突变，从而表现为HBeAg阴性，这些乙肝病毒异变株与重肝发生或慢性肝炎恶化有关［5］。因此单一的HBeAg作为判断乙肝病毒复制活跃与否的指标是不够的。
同样作为病毒复制的指标， Pre?S1与HBV?DNA相比，HBV?DNA阳性率（70.1%）与Pre?S1 抗原阳性率（64.9%）比较差异无显著性（P>0.05），说明Pre?S1与乙肝病毒复制密切相关。有研究［1］证明：小球形颗粒的包膜蛋白组成随病毒是否复制而异，在肝内病毒非复制期，大蛋白（由 S 、 Pre?S1 及 Pre?S2基因区所编码）在血清中很低和无，大量滞留在肝细胞中，因此可以根据检测血液中大蛋白的有无，来判断病毒携带者体内的 HBV 病毒是否在进行复制。本实验4例患者Pre?S1阳性而HBV?DNA阴性；9例HBV?DNA阳性而Pre?S1阴性。前者可能是与HBV?DNA存在基因型和病株的变异有关，后者可能是与前S1基因突变有关。因此两者各有意义，可相互补充。
【】
［1］成军.肝炎分子病毒学［M］.人民军医出版社,1997.
［2］骆抗先.乙型肝炎基础和临床［M］.人民卫生出版社,2001.
［3］何敏,杨朝霞,刘微，等.HBV?DNA定量检测方法的评价［J］.国外医学生物化学与检验学分册，2005,26：123?124.
［4］王健,闵福援.乙肝病毒血清标志物的检测方法及其临床意义［J］.中华检验医学杂志，2005，28：113?115.
［5］Funk ML,Rosenberg DM,Lok AS.World?wide epidemiology of HBeAg?negative chronic hepatitis B and associated precore and core promoter variants［J］.J Viral Hepat,2002,9:52?61.
