新疆维吾尔族Rh血型特征

                      作者：兰炯采,周华友,白旭华, 陈小平 邢颜超

【摘要】  本研究探讨新疆维吾尔族Rh血型特点。采用Rh血清学分型，改良抗球蛋白实验，氯仿/三氯乙烯吸收放散实验、RH上游盒、下游盒、杂合盒、D基因10个外显子，RH Dψ假基因等检测1 230份维吾尔族血样本。结果表明： RhD阴性频率为5.8％，未发现Del型。对72份RhD（-）样本进一步研究发现，ccee(57.02％)和 Ccee(29.82％)表型，RHD-/RHD-基因型（94.44％）及D基因外显子全缺失型（91.12％）最常见。未发现RHDψ假基因。结论： 我国新疆维吾洋族Rh血型兼有黄种人与白种人Rh特点。

【关键词】  维吾尔族

    Investigation of the Characteristics of Rh Blood Group of Uygur Nationality in Xinjiang

      Abstract    The study was to investigate  the characteristics of Rh blood group of Uygur nationalilty in Xinjiang. 1 230 blood samples of Uygur  nationalilty  were studied   by Rh serological typing, modified  antiglobulin test, chloroform/trichloroethylene absorption elution test, upstream,  downstream and hybrid Rhesus boxes, 10 exons of D gene, RH Dψpseudogene. The results showed that the  frenquency of RHD negative was 5.8％, and no Del type was found. The further investigation of 72 samples of RhD(-) found that ccee(57.02 ％) and Ccee (29.08％) phenotype as well as RHD-/RHD- genotype (94.44％) and complete deletion type of D gene exon (91.12％)  were all in  high frenquency, no RHDψ pseudugene was detected.  In conclusion,   the Rh blood group of Uygurs nationality in Xinjiang possesses both oriental and caucasian  Rh  characterstics, which enriches the diversity of blood types in  chinesenation.

    Key words    Rh blood group;  RhD antigen;  Uygurs

     Rh血型系统是临床最重要的血型系统之一，也是人类29个红细胞血型系统中最复杂最富有多态性的一个系统。至今已发现60多个Rh血型抗原。研究Rh血型既有临床意义，也有遗传学意义。与临床相关的主要Rh抗原为D、C、c、E和e等5个抗原，其中，RhD抗原(ISBT004.001;RH1)的免疫原性最强，5个抗原免疫原性强弱顺序依次为D﹥E﹥C﹥c﹥e。该系统抗原抗体不相容能引起溶血性输血反应、新生儿溶血病和自身免疫性溶血性贫血［1］。维吾尔族Rh血型血清学和分子生物学都有特征性。现将研究结果报告如下。

    材料和方法

    样本

    维吾尔族随机非亲缘关系血样1 230份由新疆建设兵团中心血站等提供；汉族随机非血缘关系RhD阴性血样228份由南方等提供。

    RhD和RhCE血型血清学实验

    抗?D,?C,?c,?E,?e单克隆和多克隆抗血清由美国Immuncor公司提供。抗球蛋白试剂（广谱及单价）由上海血液中心提供。Rh血清学分型方法，改良抗球蛋白试验，氯仿/三氯乙烯吸收放散试验，均参照相关［2,3］。

    RH基因结构研究

    RH 基因结构研究的 PCR 引物设计按照文献

    结    果

    血型血清学实验

    1 230份随机非亲缘关系维吾尔族血样中初筛 为Rh D阴性者72份，占5.8％；在72份维吾尔族Rh D阴性样本中未查到Del 型，228份汉族Rh D阴性样本中查出Del型42例(18.42％)。 72份维吾尔族RhD阴性样本的表型分布特征及与汉族比较见表2。

    基因结构检测

    72 份维吾尔族Rh D阴性血样RH D 单体型分布及与汉族比较见表3。

    RH Dψ基因的检测

    72份维吾尔族RH D阴性血样和228份汉族Rh D阴性血样中均未检出RH Dψ假基因（37  bp插入片段）。

    讨    论

    Rh血型系统具有丰富的多态性，至今已发现了60多种Rh抗原，其中绝大多数是RhD多态性，D抗原以数量和质量不同可分为正常D和弱D、表位不完全D等，其中极弱D(Del)即吸收放型D［7］。研究Rh血型不但具有重要临床意义，也有遗传学意义。Rh血型尤其D抗原具有民族多态性或人种多态性。白种人RhD阴性约占15％，黑人RhD阴性约占4％，蒙古RhD阴性则不到1％［8］。

    本组1 230随机非亲缘关系维吾尔族血样中，Rh D阴性者72份，占5.8％，这远高于蒙古人种或汉族，但又明显低于白种人。72份RhD阴性血样中仅见ccee、Ccee、CCee 3种表型。其中ccee型（88.89％）多，而且高于汉族。两者相比有极显著差异（χ2=24.33，P<0.005),Ccee表型(5.56％)和汉族人的相比也有极显著性差异（χ2=17.67，P<0.005)，CCee表型和汉族人的相比无差异（χ2=0.0004，P>0.05）。72例随机非亲缘关系维吾尔族Rh D阴性样本中未见1例Del型，而228例汉族RhD(-)样本中则检出Del型42例（18.42％）。RHD基因和RHCE基因结构相识，同源性高达96％-97％。两者都含有10个外显子，开放性阅读框架均为1 251 pb，都编码417个氨基酸残基。在RHD和RHCE基因之间以及RHD上游分别有1个rhesus盒，方向同RHD基因，RHD阴性单体上下游的rhesus盒在等同区内断裂，融合形成一个新的rhesus盒，即杂合rhesus盒（hybrid box），而中间部分的RHD基因全缺失［9］。通过对rhesus上游盒、下游盒和杂合rhesus盒的分析就可以把RHD基因的组合分为RHD+/RHD+纯合型、RHD+/RHD-杂合型和RHD-/RHD-纯合型。72例非亲缘关系Rh(-)新疆维吾尔族人检测结果分别为68例(94.44％) RHD-/RHD-型，2例(2.78％）RHD+/RHD-型,2例(2.78％)RHD+/RHD+型。维吾尔族与汉族相比RHD-/RHD-型(94.44％  vs 61.40％)有极显著差异（p<0.005)，RHD-/RHD-型（2.78％ vs 34.21％）也有极显著差异（p<0.005)，RHD+/RHD+型（2.78％ vs 4.39％）无显著差异（p>0.500）。在白种人中，几乎100%的Rh阴性个体2条染色体上的RHD基因全缺失［19］，即为RHD-/RHD-纯和子型，而RhD阴性在维吾尔族中为94.44％，比在汉族人（61.40％）中高，但又与白中人不完全相同。此外，还有相当一部分RhD阴性的维吾尔族个体(5.56％=2.78％+2.78％)1条或2条染色体上带有RHD基因或RHD基因的部分序列。

    46份维吾尔族RhD(-)样本中,D基因外显子全缺失、部分缺失、无缺失分别占91.12％，4.44％和4.44％。138例汉族则分别为38.23％，19.57％，和42.20％。白种人中RhD(-)的D基因外显子皆为全缺失，黑人与澳大利亚人等部分缺失，日本人有完全缺失，部分缺失和无缺失三种情况［10］。维吾尔族人D基因外显子既不同于白种人皆为全缺失，但全缺失者又远低于汉族，兼具二者特征。进一步研究维吾尔族D基因单体型外显子分布发现，2例RHD+/RHD-和2例RHD+/RHD+中D基因外显子为RHD（1-10）型和RHD?CE(2?9)?D2各1例，这两型皆为汉族常见型别。

    RHDψ假基因（37 bp插入片段）位于RHD基因内含子和外显子交界处。该片段导致210nt出现终止密码。在非洲黑人中RHDψ频率为0.0714。非裔美国人和南非混血儿也有RHDψ［10］。维吾尔族和汉族中都没有发现RHDψ。

    本课题组研究结果显示：维吾尔族Rh血型多态性兼有黄种人和白种人特点。

【】
  1Avent ND,Reid ME. The Rh blood group system: a review. Blood, 2000; 95:375-387

2中华人民共和国卫生部.输血技术操作规程. 天津：天津技术出版社.1998：64-66

3叶应妩、王毓三.全国临床检验操作规程.南京：东南大学出版社.1997：98-101

4兰炯采,周华友, 夏荣等. Rhesus盒检测技术. 中国实验血液学杂志，2005；13：1103-1105

5兰炯采，王从容，魏亚民等.中国汉族血型基因多态性观察.中国实验血液学杂志,2003；11：642-645

6Singleton BK, Green CA, Avent ND, et al. The presence of an RHD pseudogene cotaining a 37 base pair duplication and a nonsense mutation in Africans with the RHD?negative blood group phenotype. Blood， 2000；95:12-18

7李勇、杨贵贞. 人类红细胞血型学实用理论与实验技术. 北京：中国科学技术出版社. 1999：80-86

8赵桐茂.人类学型遗传学. 北京：科学技术出版社. 1987: 91-109

9Wagner FF, Flegel WA. RHD gene deletion occurred in the Rhesus box. Blood，2000；95:3662-3668

10赵桐茂.Rh 基因结构之谜.中国输血杂志，1998；11:216-217??