高效液相色谱法测定消疬(Ⅱ)糖浆中芍药苷含量

【摘要】  目的：测定消疬(Ⅱ)糖浆中芍药苷的含量。方法：用高效液相色谱法，Hanbon Lichrospher C18色谱柱，流动相为乙腈－0.1％磷酸(13∶87)；检测波长230 nm，流速1.0 mL/min，柱温为室温，灵敏度0.02 AUFS。结果：芍药苷线性范围为1.6 μg-8.0 μg，平均回收率98.28％，RSD为1.32％(n=5)。结论：方法简便可靠，专属性强，准确度高，重现性好，可有效控制制剂的质量。

【关键词】  白芍；芍药苷/分离提取；色谱法，高压液相

    　　消疬(Ⅱ)糖浆是常州市第三人民根据临床中医验方自制的制剂。该方由白芍、夏枯草、当归、地龙等18味中药组成，临床上有清热化痰，软坚散结的功效，适用于瘰疬，痰核，未溃、已溃各期。白芍为方中主药，芍药苷为其主要有效成分，为了控制产品的质量，选其作为测定指标。

    1  实验材料

    Waters?600E高效液相色谱仪，Waters?2487双通道紫外检测器(美国Waters公司)，JS?3030色谱工作站(大连江申分离技术有限公司)，超声清洗机(无锡超声设备厂)，芍药苷对照品(药品生物制品检定所，批号：0736?200118)，消疬(Ⅱ)糖浆(由常州市第三人民医院制剂室提供，批号：061109、060428、060508、060910、060618，处方药材由镇江药材公司提供，经鉴定为正品)。多效蒸馏水(由本院制剂室提供)，乙腈为色谱级，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。

    2  实验方法与结果

    2.1  色谱条件［1］  色谱柱：Hanbon Lichrospher C18 (4.6 mm×150 mm)。流动相：乙腈∶0.1％磷酸(13∶87)；流速1.0 mL/min，检测波长：230 nm，柱温：室温。理论板数按芍药苷峰应不低于2000，见图1。

    图1  对照品溶液(A)和供试品溶液(B)的HPLC图谱  S：芍药苷

    2.2  对照品溶液的制备      精密称取干燥至恒重的芍药苷对照品8 mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

    2.3  供试品溶液的制备［2］  　　精密量取消疬(Ⅱ)糖浆5 mL，边振摇边加入无水乙醇约30 mL，超声处理10 min，滤过，残渣用50％乙醇10 mL洗涤2次，合并滤液和洗液，水浴蒸干，残渣加水10 mL使溶解，再用水饱和正丁醇提取3次，每次15 mL，合并正丁醇溶液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至10 mL，用微孔滤膜(孔径0.45 μm)过滤，滤液作为供试品溶液。

    2.4  标准曲线的绘制  　　分别精密吸取对照品溶液2 μL，4 μL，6 μL，8 μL，10 μL进样，测定峰面积。以峰面积为纵坐标(Y)，进样量(μg)为横坐标(X)，进行线性回归，得回归方程：Y=1591.63X+504.91(r=0.9994)，线性范围：1.6 μg-8 μg。

    2.5  精密度试验  　　精密量取对照品溶液10 μL，按上述色谱条件测定，连续进样5次，测得芍药苷对照品峰面积值，RSD=1.53％。

　　2.6  加样回收率试验  　　精密量取已知含量的样品1 mL，分别加入芍药苷对照品适量，按样品测定法进行测定，结果见表1。表1  加样回收率试验结果

　　2.7  样品中芍药苷的含量测定  　　取2.3项供试品溶液10 μL进样，在上述色谱条件下测定峰面积，结果见表2。 表2  样品中芍药苷含量

　　3  小结

    　　本制剂为糖浆剂，且有多味动物药，其成品中含有大量的糖分和蛋白质，为避免其对芍药苷含量测定产生影响，故先用醇沉法将样品中大量糖份和蛋白质沉淀分离除去。消疬(Ⅱ)糖浆为纯中药制剂，成分较复杂。薄层鉴别方法可靠，专属性强，以白芍中芍药苷的含量测定来控制质量标准，方法简便、快捷、准确、重现性好，可有效控制消疬(Ⅱ)糖浆的质量［3?5］。

【】
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［2］孙冬梅,陈路林.健胃舒颗粒质量标准的研究［J］.中成药,2002,24(10):752?755.

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［4］宗 颖,王 玉,张 辉.高效液相色谱法测定胰胆宁胶囊中芍药苷含量［J］.吉林中医药,2006,26(8):64?65.

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