泻肺平喘灵颗粒扩张模型豚鼠支气管的实验研究

                   作者：袁斌 韩新民 杨江 宋伟 郜明   

【摘要】  目的 观察泻肺平喘灵颗粒对组胺所致豚鼠支气管痉挛的影响。方法 采用组胺建立豚鼠支气管痉挛模型40只，随机分为5组，即空白对照组、阳性对照组、泻肺平喘灵高剂量组、泻肺平喘灵中剂量组、泻肺平喘灵低剂量组。空白对照组给予0.9%氯化钠注射液，阳性对照组给予氨茶碱，泻肺平喘灵组分别给予高、中、低剂量泻肺平喘灵颗粒，30 min后记录各组支气管气道内压，再次静脉注射组胺并记录各组支气管气道内压。结果 给药30 min后泻肺平喘灵颗粒高、中剂量组气道内压与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.05），与阳性对照组比较差异无统计学意义（P>0.05），而低剂量组作用不明显（P>0.05）。2次注射组胺后，泻肺平喘灵颗粒高剂量组及阳性对照组与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.05），但与空白对照组给药30 min后比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 高、中剂量泻肺平喘灵颗粒可扩张支气管，在一定范围内对抗组胺对支气管的收缩作用，对实验性豚鼠支气管痉挛有较好的效果。

【关键词】  支气管痉挛；动物；实验；组胺；中成药；颗粒剂
   
　　【Abstract】  Objective  To observe the effect of Xiefeipingchuanling granula on bronchospasm  caused by histamine in guinea pig. Methods  The bronchospasm models of guinea pig were established by intravenous injection with histamine. The 40 model guinea pigs were randomly divided into 5 groups, blank control group, positive control group, guinea pigs in Xiefeipingchuanling granula high-dose group, middle-dose group and high-dose group. The guinea pigs in blank control group were given 0.9% NS; the guinea pigs in positive group were given aminophyllline; the guinea pigs in three treatment groups were given different doses of Xiefeipingchuanling granula，after 30 min the air pressure in airway was recorded, then intravenous injection with histamine was performed again and air pressure in airway was recorded. Results  30 min after administration there was a significant difference in air pressure in airway between high-doses as well as middle-dose groups and blank control group (P<0.05),however there was no significant difference between the two groups and positive control group (P>0.05), After 2-time administration with histamine，there was a significant difference between high-dose group and positive control group as well as blank control group（P<0.05），but 30min after administration there was no significant difference between high-dose group and blank control group(P>0.05). Conclusion  The high-does and middle-dose Xiefeipingchuanling granula can dilate bronchus and resist the effect of bronchoconstriction caused by histamine，which is effective in treating experimental bronchospasm of guinea pigs.
   
　　【Key words】  Bronchospasm；Animal；Experiment；Histamine；Chinese patent herbal medicine；Granula

　　哮喘是小儿的常见病，给小儿的生长发育和生活、学习带来威胁。我们的临床研究发现泻肺平喘灵颗粒对小儿热性哮喘疗效确切。为了解其作用机制，我们通过建立支气管痉挛动物模型，应用泻肺平喘灵颗粒干预，观察其对支气管痉挛的影响。

　　1  材料与方法

　　1.1  材料

　　1.1.1  实验动物  三色豚鼠40只，由院上海实验动物中心提供［合格证号：SCXK（沪2002-0010）］。

　　1.1.2  药品及试剂  泻肺平喘灵颗粒剂（药物组成：炙麻黄1 g,杏仁1 g,丹参2 g,虎杖1 g,生大黄1 g,瓜蒌皮3 g,葶苈子0.5 g,白芥子1 g,生甘草0.5 g。所用药物为天江制药颗粒剂，100 g颗粒相当于生药700 g,由南京中医药大学附属提供）,氨茶碱（南京白敬宇制药有限公司，批号：050104），磷酸组胺（中国科学院上海生物化学研究所提供）。

　　1.1.3  仪器  ALC－V8动物呼吸机，上海奥尔科生物科技有限公司生产；PowerLab/8 s生理记录仪，澳大利亚AD Instrument生产；MLT0699血压换能器，澳大利亚AD Instrument生产。

　　1.1.4  主要药品制备  取泻肺平喘灵颗粒47 g，用蒸馏水稀释至145 mL（3.24 g生药/mL），为泻肺平喘灵颗粒的大剂量组用药；取大剂量药液45 mL 用蒸馏水稀释至135 mL（1.08 g生药/mL），为泻肺平喘灵颗粒的中剂量组用药；取中剂量药液35 mL用蒸馏水稀释至105 mL（0.36 g生药/mL），为泻肺平喘灵颗粒的小剂量组用药。氨茶碱浓度配为0.1 g/mL。

　　1.2  实验方法

　　1.2.1  动物分组  豚鼠40只，体质量(250±50)g，随机分为5组（空白对照组、阳性对照组、泻肺平喘灵高剂量组、泻肺平喘灵中剂量组、泻肺平喘灵低剂量组），各8只。

　　1.2.2  模型制备  实验前动物禁食24 h，麻醉后分离气管做V形切开，调节呼吸机，设定潮气量20 mL，频率70次/min，吸呼比为2∶1，用连接呼吸机导管做豚鼠气管插管，打开豚鼠胸腔形成气胸，消除豚鼠自发性呼吸，稳定后颈外静脉注射磷酸组胺（4 μg/mL，0.1 mL/100 g体质量）。

　　1.2.3  给药方法  空白对照组给予0.9%的氯化钠注射液1 mL/100 g体质量;阳性对照组给予氨茶碱溶液1 mL/100 g体质量;泻肺平喘灵组分别给予高、中、低剂量泻肺平喘灵颗粒溶液1 mL/100 g体质量。5组均采用腹腔微创术分离出十二指肠，直接肠腔内给药。30 min后采用PowerLab/8 s生理治疗仪分别记录各组气道内压；稳定后颈外静脉再次注射磷酸组胺（0.1 mL/100 g体质量）并记录各组此时气道内压。

　　2  结果

　　2.1  各组前后支气管气道内压的比较  见表1。

　　表1  各组治疗前后支气管气道内压的比较（略）

　　与空白对照组给药30 min后比较，*P＜0.05；与空白对照组2次予组胺后比较，△P＜0.05

　　由表1可见，泻肺平喘灵高、中剂量组，给药30 min后支气管气道内压与空白对照组给药30 min后比较差异有统计学意义（P＜0.05)，与阳性对照组此时气道内压比较差异无统计学意义(P＞0.05)。予2次组胺后，泻肺平喘灵高剂量组及阳性对照组支气管气道内压与空白对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05)，但与空白对照组给药30 min后比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

　　2.2  各组肺溢流图  见图1。

　　图1  各组肺溢流图（略）

　　由图1直观可见，在整个实验过程中，空白对照组及泻肺平喘灵低剂量组均不能抑制组胺引起的豚鼠支气管痉挛，阳性对照组及泻肺平喘灵高、中剂量组均可抑制组胺引起的豚鼠支气管痉挛的作用。

　　3  讨论
   
　　组胺是重要的支气管作用物质，来自于肥大细胞，而在支气管哮喘发作时肥大细胞的作用极为突出，所以组胺在哮喘发病中的作用一直受到重视。虽然后来发现了作用更为强大的白三烯，但组胺收缩支气管的作用仍不能忽视。本研究通过组胺造模，观察发现泻肺平喘灵高、中剂量下均有显著的扩张支气管作用（P＜0.05)，而小剂量时则作用不明显（P＜0.05）。提示泻肺平喘灵颗粒在一定血药浓度下可拮抗组胺引起的支气管痉挛，其效果与氨茶碱比较差异无统计学意义(P＞0.05)。
   
　　泻肺平喘灵颗粒组方是依宣肺通腑、活血化瘀之法而设，其中麻黄味苦，性温，可平喘、散寒，其主要成分麻黄碱是拟肾上腺素药,对支气管平滑肌的松弛作用缓和持久。药研究表明，麻黄水提物具有镇咳作用，麻黄还具有抗炎及免疫抑制作用［3］。杏仁，《药性赋》称其味苦、甘，性温，有毒，可升可降，阴中阳也，可利胸中气逆之喘促，润大肠气闭难便。现代药理学研究表明，杏仁具有舒张支气管平滑肌的作用，能缓解支气管痉挛，主要成分苦杏仁甙有镇咳、平喘、祛痰作用。其他药物如葶苈子、白芥子均有类似作用［4，5］。我们通过临床观察发现小儿哮喘主要表现为痰瘀互结，所以将化痰逐瘀定为主要治法［1］。另外，肺与大肠互为表里之脏，腑气不通，肺气不得降，方中大黄、杏仁均有通腑而利肺的作用。
   
　　前期的研究中［2］，泻肺平喘灵颗粒通过宣肺通腑、活血化瘀，治疗小儿热性哮喘取得了良好疗效。其作用机制是多方面的，其中扩张支气管，对抗组胺对支气管的收缩作用是其作用机制之一。

【】
  　　［1］ 韩新民，李江全，任现志.活血通腑法是治疗哮喘发作期的重要法则［J］.南京中医药大学学报，2003，19（5）：304-305.

　　［2］ 李惠群，韩新民.清热活血通腑法治疗小儿哮喘50例［J］. 南京中医药大学学报，1996，12（5）：51-52.

　　［3］ 陈荣明,朱耕新,许芝银. 麻黄中不同提取物对细胞免疫的影响［J］.南京中医药大学学报，2001，7（4 ）：234-236.

　　［4］ 刘波，张华.葶苈子炮制前后芥子甙的含量比较［J］.中成药，1990，12(7):19.

　　［5］ 张学梅，刘凡亮,梁文波，等.白芥子提取物的镇咳、祛痰及平喘作用研究［J］.中草药，2003，34 （7 ）：635-637.