人生长激素受体在结肠癌组织中的表达及其临床意义
作者：周东 粱道明 张毅 廖庚进 杨蔚 陈嘉勇
【摘要】 目的: 研究生长激素受体（growth hormone receptor，GHR）在人结肠癌组织中的表达水平，为临床结肠癌患者术后合理使用重组人生长激素（rhGH）提供理论依据。方法: 应用免疫组织化学方法对结肠癌组织及其癌组织远端10 cm的正常结肠组织进行GHR的检测，研究GHR在不同的病理类型、分期，不同分化程度结肠癌组织中的表达水平。结果: GHR在结肠癌组织中阳性表达率明显高于正常的结肠组织，且GHR的表达在不同的临床分型、分期和分化程度上差异显著。结论: GHR在结肠癌组织中呈高表达；结肠癌根治术后的患者化疗时配合使用rhGH可能增强效果。
【关键词】 结肠肿瘤 生长激素 生长激素受体
Expression of growth hormone receptor in human colonic carcinoma and clinic explication
【ABSTRACT】 Objective: To explore the expression of growth hormone receptor （GHR） in human colonic carcinoma. Methods: The expression levels of GHR were measured by immunohistochemical techniques（Envision） in 45 specimens of colonic carcinoma and the normal tissue adjacent to the colonic carcinoma. Results: GHR expression rate was higher obviously in the colonic carcinoma tissue （77.8%） than normal colonic tissue （55.6%）, there was a statistic significance in pathological staining （P<0.05）, tumor differentiation level （P<0.05）. Conclusion: Over-expression of GHR in colonic carcinoma tissues was observed.
【KEY WORDS】 Colonic cancer·Growth hormone·Growth hormone receptor
原发性结肠癌根治术患者大多存在营养不良、低蛋白血症及免疫力低下，常规的全胃肠外营养支持（total parenteral alimentation，TPN）提供了热卡和蛋白质合成底物，却不能很好地逆转应激时蛋白分解代谢状态［1］。重组人生长激素（human growth hormone recombinant，rhGH）是人工合成的生长激素（growth hormone，GH），能明显改善机体的营养代谢状况和免疫防御功能，提高患者对各种抗癌治疗的耐受性。由于潜在的促细胞增殖作用，临床上对术后肿瘤患者使用GH尚存争议。GH通过其受体（GHR）介导发挥生理作用[2]，对结肠肿瘤组织GHR表达的研究，有助于为结肠癌患者术后合理使用GH提供理论依据。
1 资料与方法
1.1 一般资料 收集我院1998年1月~2005年1月行手术治疗并经病理确诊的原发性结肠癌患者45例，其中男性20例，女性25例。年龄38~74岁，平均年龄59.1岁，其中<60岁19例，≥60岁26例。Dukes分期：Ⅰ期13例，Ⅱ期16例，Ⅲ或Ⅳ期16例。肿瘤病理组织学分级：高分化18例，中分化15例，低分化12例。病理组织分类：乳头状腺癌35例，粘液腺癌10例。
1.2 试剂和仪器 鼠抗人GHR单克隆抗体（Mab263），英国Serotec公司生产，批号：160304；即用型免疫组织化学超敏SP试剂盒，福州迈新公司生产，批号：410289720S；酶底物显色剂DAB，福州迈新公司 产品，批号：90708031C。Olympus光学显微镜，型号CH-BI45-T-2。
1.3 组织GHR表达强度的判定 所有病例手术切除的结肠癌组织和距癌组织远端10 cm的正常结肠组织石蜡标本切片，免疫组化SP法染色。细胞膜、细胞质及细胞核上出现棕黄色颗粒染色为阳性细胞。400倍光镜下随机选取5个以上不少于1 000个细胞的视野，1 000倍镜下观察细胞染色情况，阳性细胞百分比。根据整张切片着色的范围和强度，判定GHR表达强度。整张切片无染色或阳性细胞≤25%为GHR表达阴性（-），25%<阳性细胞≤50%或染色较弱者为弱阳性（+），50%<阳性细胞≤75%或细胞染色中等程度为中度阳性（++），阳性细胞＞75%及细胞染色强为强阳性（+++）。
1.4 统计学处理 用SPSS11.5软件统计包对所获数据进行χ2检验，检验水准α= 0.05。
2 结果
GHR在正常的结肠组织细胞和结肠癌细胞中均有表达，定位于细胞膜和细胞质，以细胞质多见，呈灶状、弥散性分布的棕黄色颗粒，PBS空白对照切片未见阳性细胞（图1）。肿瘤组织GHR阳性表达率（77.8%）较正常结肠组织（55.6%）明显升高，两者比较有统计学差异，P=0.02；临床分期越高，GHR阳性表达率越高，Ⅰ与Ⅱ、Ⅲ+Ⅳ期比较差异有统计学意义，P=0.001；高分化癌组织阳性率明显低于中、低分化癌组织（P=0.002）； 但GHR阳性表达与性别、年龄和病理类型无关，P>0.05（表1）。
3 讨论
原发性结肠癌根治术后患者需禁食，使机体本已存在的营养不良情况恶化，患者常常不能耐受后续的放、化疗而致失败。营养不良的程度与围手术期患者病死率的增加有关［３］。大多数学者认为肿瘤根治术后短期结合化疗应用rhGH可增加肿瘤患者体内蛋白质的合成，改善细胞免疫和体液免疫功能，对于加强机体对肿瘤复发和转移的防御，克服手术和化疗引起的免疫功能下降、加速创口愈合和减少并发症等方面有重要临床意义［4－７］。结肠癌患者行根治术后体内仍可能残留肿瘤细胞，这部分肿瘤细胞大部分处在G0期，对化疗不敏感，常导致肿瘤的复发和转移。在GH作用下，结肠癌细胞可从静止期进入分裂期，增加对化疗的敏感性，有利于消灭潜伏散在的肿瘤细胞。
GH促生长作用主要通过自分泌和旁分泌途径, GHR在GH发挥生理作用的过程中起着必不可少信号传递作用。在体内GH水平低于或等于生理浓度时，GH与GHR形成具有活性的1∶2形式的复合体；随着GH水平的升高，GH与GHR将优先形成1∶1形式的复合体，但这种复合体在信号传导上是无活性的［８］。正常的结肠细胞存在GHR的表达，本研究结果示，GHR在结肠癌组织中呈现高表达，且与临床分期和组织分化程度相关。杨小东等［9］认为GHR mRNA在结肠癌组织中上调可能是GHR高表达的原因。本研究检测到结肠癌的GHR的高表达是否具有正常的信号传导能力以及其与GH如何结合等问题有待于作进一步的研究。
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