白介素13在荨麻疹发病中的作用
作者：刘贵庭，严振球，廖金英
【摘要】 目的 研究白介素13（IL?13）在急、慢性荨麻疹发病中的作用。方法 对22例急性荨麻疹患者和21例慢性荨麻疹患者，采用流式细胞仪检测淋巴细胞内IL?13，IL?4，干扰素γ（IFN?γ）；用ELISA法测定血清IL?13总IgE，并与正常人组进行比较。结果 经流式细胞仪检查发现，急性荨麻疹患者淋巴细胞IL?13的表达显著升高，与正常人组差异有统计学意义；而慢性荨麻疹患者的IL?13表达略有升高，与正常人组差异无统计学意义；IL?4的表达在两组患者中差异均无统计学意义。ELISA检测血清IL?13的结果与流式细胞仪检测结果相符；急慢性荨麻疹患者IL?4的表达与正常人组差异无统计学意义；IFN?γ的表达在荨麻疹患者中无明显改变。IgE的表达在急、慢性患者中均显著升高。但IL?13的表达和IgE抗体的量无相关性。结论 IL?13在急性荨麻疹的发病中发挥了重要作用。
【关键词】 荨麻疹；白细胞介素13；白细胞介素4
Abstract： Objective To investigate the role of interleukin (IL)?13 in the patients with acute and chronic urticaria.Methods In 22 patients with acute urticaria, 21 patients with chronic urtiearia and 19 normal controls, the levels of IL?13, IL?4 and interferon (IFN)?T of the peripheral T lymphocytes were measured by flow cytometry. The serum cancontrations of IL?13 and total IgE were tested by ELISA.Results The results of flow cytometry showed that the level of IL?13 of the patients with acute urticaria was significantly higher than that of the nornal controls (P<0. 0 5 ). Although the expression level of IL?13 also increased in the patients with chronic ulticaria, there was no significant difference when compared with that of the normal controls. There was no significant difference in the expiession level of IL?4 between the acute and the chronic urticarial patients. The IL?13 findings measured by ELISA was consistent with those by flow cytometry. There were no changes in the expression of IFN?T in the parients. The toral serum IgE level of the patients with acute and chronic urticaria was significantly higher than that of normal controls (P<0.01). Conclusion IL?13 may play an important role in the pathogenesis of acute urticaria.
Key words： urticaria; interleukin?13; interleukin?4
人白介素13（IL?13）在变态反应过程中有着重要而独特的作用，它不像IL?4作用于T淋巴细胞向Th2分化的起始阶段，它在体内的持续时间较长，作用的靶细胞较多，所以主要对过敏性疾病的效应阶段起着优势性的主导作用[1]。为了研究IL?13在急、慢性荨麻疹发病中的作用，我们用流式细胞仪进行了此两类患者淋巴细胞内IL?13，IFN?γ水平的检测，并用ELISA方法测定患者血清内IL?13和IgE的表达，分析IL?13与IgE的相关性，以探讨IL?13在急、慢性荨麻疹发病中的作用。
1 对象和方法
1?1 研究对象
正常人20例，男8例，女12 例，年龄20~45岁，平均33．56岁，均为健康志愿者。急性荨麻疹22例，男10例，女12例，年龄16~58岁，平均37?62岁，发病时间为2~10 d。慢性荨麻疹21例，男7例，女14 例，年龄18~57岁，平均39．8岁，发病时间5个月~3年。此类患者均行特异性过敏原检测，找到1种或1种以上的特异性IgE。所有病例均为2005年1~10月我科急诊、门诊患者，1个月内未用过糖皮质激素及1周内未用过抗组胺药，个人无其他过敏性疾病史，无家族遗传过敏史。
1?2 实验方法
1?2?1 标本采集
病例组与对照组采集外周静脉血3 ml（均于荨麻疹发作期采集标本），取1．5 ml 置于加有0．5 ml 0．5%肝素抗凝剂的试管中，混匀。另1．5 ml 分离血清，置于4 ℃ 待测。
1?2?2 淋巴细胞内IL?13，IL?4和IFN?γ测定
取上述全血样本，以1：1加入DMEM培养剂混匀，并以1：100的比例用PMA和伊屋诺霉素（Ionomycin）刺激4 h，然后经混匀、离心、溶血及细胞膜打孔后，将细胞分为两组，一组加FITC标记的IFN?γ，PE标记的IL?13及Cychrome标记的CD4单克隆抗体；另一组加FYTC标记的IL?4，PE标记的IL?13及Cychrome标记的CD4单克隆抗体。孵育30 min 后，进行流式细胞仪（Becton?Dickinson公司）计数分析。
1?2?3 血清IL?13测定
采用人IL?13检测试剂盒（奥地利Bender Medsysterns公司），用ELISA方法进行患者血清IL?13的检测，操作方法严格按照说明书。
1?2?4 血清总IgE测定
采用美国Biotech公司的IgE检测试剂盒（Biotech Inc公司），用ELISA方法进行患者血清总IgE检测，操作严格按照说明书。
1?2?5 统计学方法
采用SPSS软件进行t检验、非参数检验（部分数据偏态，对数转换不成功）及直线相关分析，P<0.05为有统计学意义。
2 结果
2?1 流式细胞仪测定结果
经FACS检测，急性荨麻疹患者中表达IL?13的CD4+T淋巴细胞的百分比明显高于正常人组（P<0．05），而IL?4，IFN?γ与正常人组差异无统计学意义；慢性荨麻疹患者IL?13的表达与正常人组比较差异无统计学意义。详见表1。表1 急慢性荨麻疹患者IL?13，IL?4，IFN?γ流式细胞仪测定结果（略）
2?2 ELISA检测结果
采用ELISA方法检测患者血清IL?13，结果急性荨麻疹组为26．05 ng/L，正常人对照组为15．16 ng/L，经秩和检验，Z=3．84，P<0．01；而慢性荨麻疹组为19?83 ng/L，与正常人对照组比较Z=0.1，P>0．05。总IgE检测结果显示急、慢性荨麻疹患者的血清总IgE水平分别为27 680 IU/L和25 250 IU/L与正常人对照组（13 260 lU/L）比Z值分别为2．91和2．95，P均<0．01。
2?3 急、慢性荨麻疹患者血清IL13水平与IgE的相关性
采用直线相关分析发现，急慢性患者，血清IL?13的表达与血清总IgE水平无相关性，t值分别为0．138和0．226，P值均>0．05。
3 讨论
本研究通过流式细胞技术和ELISA方法检测IL?13在急、慢性荨麻疹患者中的表达，发现急性患者的IL?13表达明显升高，而慢性患者无改变。说明IL?13在急性荨麻疹发病中发挥较明显的作用。Irinyi等[2]进行了慢性原发性荨麻疹患者的IL?13表达的检测，发现IL?13的产生在患者和对照组之间无差别。本实验慢性荨麻疹患者的结果和该小组结果相符。分析其原因：可能由于急性荨麻疹是典型的Ⅰ型变态反应性疾病，致敏性IgE大量产生，炎性活性物质的分泌对疾病的发生起了重要的作用。另外，我们还利用流式细胞技术进行了IL?γ的检测，发现无论急性患者还是慢性患者，其表达均无明显变化。说明荨麻疹是Th2型变态反应为主导的疾病，而非Th1型。值得一提的是，本研究还利用流式细胞技术进行了患者血清IL?4检测，结果发现IL?4在急、慢性荨麻疹患者中的表达较正常人组差别无统计学意义。这可能是由于IL?4主要作用于T细胞向Th2型细胞分化的起始阶段，而一旦活性Th2细胞分泌产生IL?13，它在体内的持续时间较长，作用于整个变态反应的效应过程，IL?4的作用在此阶段中则不明显[3,4]。此更进一步证明了IL?13在变态反应性疾病中有重要作用。在本研究中，我们还利用ELISA方法进行了血清总IgE检测，发现在急、慢性患者中均显著升高。在IL?13和IgE的相关性分析中，发现两类患者的IL?13表达与IgE的产生均无统计学意义。其原因可能为影响IgE的因素很多，且总IgE升高，不一定说明变应原特异性IgE也升高。其水平与荨麻疹的病程和严重程度无相关性，而与不同的年龄、饮食结构的变化和采血的不同时间等多方面因素有关。
【】
/[1/] Hershey G K.IL?13 receptors and signaling pathways:an evolving web/[J/].Allergy Clin Inrmunol,2003,111;677-690.
/[2/] Irinyi B,Aleksan M,Antal?Szalmas P,et al.Cytokine production of CD4+and CD8+ peripheral T lymphocyres in patients with chruric idiopathic urticaria/[J/].Acta Derm Venereol,2002,82:249-253.
/[3/] Wills?karp M.The gene encading interleukin?13:a suseepfibility lpcasfor asthma and erlated traits/[J/].Respir Res,2005,6:19-23.
/[4/] Zurawski G,De Vries J E.Interleukin 13 elicits a subsel of the activities of its close relative interleukin 4/[J/].Stem Cells,2005,23:169-174.
