芒果苷对垂体后叶素诱发小鼠心肌缺血的保护作用
作者：韦健全，郑子敏，潘勇，罗莹，黄健，赖术，许小林
【摘要】 目的 观察芒果苷（mangiferin）对垂体后叶素（pituitrin, PIT）诱发小鼠心肌缺血的影响。方法 采用腹腔注射PIT 30u/kg建立小鼠急性心肌缺血模型，观察芒果苷对小鼠Ⅱ导联心电图（ECG），心肌超氧化物岐化酶(SOD)，丙二醛（MDA）及血清磷酸肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）的影响。结果 芒果苷对PIT诱发小鼠Ⅱ导联ECG异常有改善(P<0.05)。芒果苷使心肌SOD活性明显升高，使心肌MDA含量、血清CK及LDH水平降低(P<0.05或0.01)。结论 芒果苷对垂体后叶素诱发小鼠心肌缺血的损伤有保护作用。
【关键词】 芒果苷；垂体激素类，后叶；心肌缺血；小鼠；动物实验
Abstract: Objective To evaluate the protection of mangiferin (MAN) against mice myocardial ischemia induced by pituitrin (PIT). Methods Acute myocardial ischemic models were obtained by intra-peritoneal administration of PIT 30u/kg in mice. Meanwhile, the mice were also intraperitoneal admnistration with different concentrations of MAN once daily for 7 days. The fluctuations of lead II on ECG, the myocardial SOD and MDA, the serum levels of LDH and CK were measured. Results MAN could ameliorate the abnormal changes of ECG (P<0.05), and up-regulate SOD activity, down-regulate myocardial MDA, serum CK and LDH levels (P<0.05 or 0.01). Conclusion MAN can protect against myocardial ischemia induced by PIT in mice.
Key words: mangiferin; pituitrin; myocardial ischemia; mice; animal experiments
芒果苷(mangiferin)是一种四羟基吡酮的碳糖苷，属双苯吡酮类化合物，是芒果叶的主要成分之一。它具有抗应激［1］、抗脂质过氧化［2］，降血糖［3］，抗肿瘤、免疫调节［4］等作用。因此，本研究采用垂体后叶素诱发小鼠心肌缺血模型，观察芒果苷的保护作用，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 药物 芒果苷由广西中医学院药化室提供；垂体后叶素为南京新天生物化学制药有限公司产品，产品批号030516。
1.2 动物 昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18～22g，由右江民族医学院实验动物中心提供。自由饮水以及普通饲料喂食，先进行适应性喂养3天，第4天开始进行实验。
1.3 试剂仪器 磷酸肌酸激酶(CK)、超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、考马斯亮蓝试剂盒，南京建成生物工程研究所产品；乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒为四川迈克科技有限公司产品；XDH-B型心电图机，上海光电医用有限公司生产；RA-50半自动生化仪，德国Bayer生产；722分光光度计，上海精密仪器有限公司生产。
1.4 方法
1.4.1 对垂体后叶素诱发小鼠心肌缺血心电图的影响 将60只小白鼠随机分为5组，每组12只，分别为正常对照组（生理盐水）；模型组：（生理盐水加垂体后叶素）；芒果苷大、中、小剂量组（芒果苷60.0、30.0、15.0mg/kg加垂体后叶素)。灌胃量为0.1ml/10g，每天1次，连续7天。实验期间动物自由取食和饮水。末次给药1h后，将小鼠用0.3%戊巴比妥钠0.1ml/10g腹腔注射麻醉后，腹腔注射垂体后叶素30u/kg(3u/ml～0.1ml/10g)，记录30s，1 min、2 min、5 min、10 min、15 minⅡ导联心电图。以J点(QRS波群的终点与ST段交接处)移位(升高或降低≥0.1mV)，或T波改变(高耸、双相或倒置)，或出现Q波，作为阳性反应，统计阳性反应动物数，进行分析［5］。
1.4.2 对垂体后叶素诱发小鼠心肌缺血血清及心肌酶的影响 小鼠50只，随机分成5组，分组及给药同1.4.1除正常对照组外，每组动物均于第5天开始腹腔注射30u/kg连续3天。
血清CK和LDH的测定于末次给药后1h，腹腔注射垂体后叶素，2h后眼球取血，离心取血清待测。血清CK活性测定与LDH活性测定，按试剂盒说明进行。
心肌SOD和MDA测定：眼球取血后的小鼠，取心肌组织，生理盐水冲洗后称湿质量，按1∶9浓度加入0.15mol/L、pH7.4磷酸盐缓冲液，在冰水浴条件下制成10%组织匀浆，3000r/min离心15min，取上清液，分别测定心肌组织SOD活性及MDA含量。
1.5 数据处理 计数资料用χ2检验；计量数据以±s表示，组间比较采用t检验。使用SPSS11.0统计软件进行统计分析。
2 结果
2.1 芒果苷对小鼠心电图的影响 正常对照组心电图全部正常，芒果苷大剂量组与模型组比较差异有显著性（P<0.05），说明芒果苷大剂量对PIT诱导的心肌缺血有保护作用，见表1。
2.2 芒果苷对小鼠心肌SOD及MDA的影响 模型组与正常对照组比较SOD活性明显降低，MDA含量明显升高。芒果苷大剂量组与模型组比较，SOD活性明显升高。芒果苷中、大剂量组与模型组比较，MDA含量明显降低(P均<0.01)，见表2。
2.3 芒果苷对小鼠血清CK和LDH的影响 芒果苷大、中剂量组血清CK和LDH与模型组的比较差异有高度显著性（P均<0.01），说明芒果苷有抗心肌缺血作用，见表3。
表1 芒果苷对小鼠心电图的影响（略）
与模型组比较，a:χ2=11.02, P<0.01；b:χ2=4.26, P<0.05
表2 芒果苷对小鼠心肌SOD、MDA的影响（略）
与模型组比较，d:t＝2.77,P<0.05；a:t＝3.36,b:t＝9.19,c:t=5.00,e:t=7.07,P均<0.01
表3 芒果苷对小鼠血清CK和LDH的影响（略）
与模型组比较，a:t=8.54,b:t=3.36,c:t=4.09,d:t=3.49,e:t=6.78,f:t=3.86,P均<0.01
3 讨论
心肌缺血在临床上可表现为心绞痛、心肌梗塞、心律失常甚至猝死，是危害人们健康的最常见疾病之一。研究表明心肌缺血及损伤的发生和血管内皮功能紊乱及炎症反应［6］、氧自由基损伤［7，8］等密切相关。
心电图是临床诊断冠心病的常用方法之一。动物心电图与人体心电图在记录原理、方法、基本波形方面无本质差异，故当动物发生心肌缺血或损伤时，可通过心电图反映出来。心肌缺血损伤可导致心肌细胞通透性增高，使一些可溶性的心肌酶类大量释放到血液中，从而使血清心肌酶的含量显著升高，通过检测血清LDH、CK、GOT可提高诊断的准确性。使用垂体后叶素建立小鼠缺血模型是成熟的实验方法［9］。垂体后叶素诱发小鼠心肌缺血，可以使心肌SOD活性下降和心肌MDA含量升高，而SOD活性增加和MDA含量减少，则说明心肌组织中自由基的清除增加和产生减少，从而减少心肌组织的损害［10］。
在腹腔注射垂体后叶素诱导小鼠急性心肌缺血模型上，芒果苷60.0mg/kg对PIT诱发小鼠Ⅱ导联心电图异常有改善。芒果苷60.0mg/kg使心肌SOD活性明显升高，芒果苷30、60mg/kg 使心肌MDA含量降低，芒果苷30.0、60.0mg/kg使血清CK和LDH水平明显降低，实验结果显示，预先给予芒果苷对垂体后叶素所致的小鼠心肌缺血具有防护作用。
【】
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