康美肤烧伤膏对烫伤创面ＩＬ－６、ＩＬ－８表达的影响及疗效观察
[摘要] 目的：观察康美肤烧伤膏对烫伤创面的疗效及IL-6、IL-8的表达情况。方法：用免疫组织化学方法分析在烫伤后第1、3、5、7、14天创面组织白细胞介素表达水平的变化。结果：IL-6、IL-8在康美肤烧伤膏组和对照组于伤后的表达均有高峰，对照组和治疗组的表达高峰时间均为伤后第3天，峰值低于对照组。结论：康美肤烧伤膏对创面具有一定疗效，与IL-6、IL-8的表达有关。
[关键词] 康美肤烧伤膏；白细胞介素6；白细胞介素8
[Abstract] Objective：To treat the burned wounds with Kangmeifu Burns Ointment and observe the expression levels of Interleukin in the process of wound healing. Methods：Immunohistochemistry analysis methods were conducted to examine the expressions of Interleukin in both groups at 1,3,5,7,14 days after scalding． Results：IL-6、IL-8 had one peaks respectively in both groups. The peaks in the blank control group and Kangmeifu Burns Ointment treated occurred at the 3 days,and the peak value was a little lower than that in the blank control group． Conclusion：Kangmeifu Burns Ointment can inhibit the process of wound tissue healing through enhancing IL-6、IL-8 expression．
[Key word] Kangmeifu Burns Ointment；IL-6；IL-8
康美肤烧伤膏是根据闽南名医黄金钢验方，由福建地产药材九龙藤、金线莲、冰片等组成的中药外用软膏剂，临床上主治各种Ⅱ度烧伤，对浅Ⅱ度、深Ⅱ度和残余创面愈合均有一定的作用[1]。在创面愈合过程中，白细胞介素（IL-6、IL-8）等细胞因子参与多方面和多层次的调控[2]。为探讨其在促进创面愈合过程中的分子机制，本文进行了下述实验，以探讨康美肤烧伤膏对烫伤创面愈合中IL-6、IL-8表达的影响。
1材料与方法
1.1材料、试剂与动物
康美肤烧伤膏（自制）；白细胞介素(IL-6、IL-8)试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)；SD大鼠，体重180～220 g，雌雄各半，由福建医科大学动物中心提供。合格证号：SGXK（闽2004-0002号)。
1.2模型建立
造模前24 h，大鼠用8%硫化钠脱毛，面积约30 cm2，用戊巴比妥钠(30 mg/kg)腹腔麻醉，浸入100℃水浴槽孔(面积约30 cm2)内持续烫15 s，造成面积约30 cm2的圆形深Ⅱ度创面，病理切片证实。将大鼠随机分成2组，各１５只。治疗组：伤后创面用康美肤烧伤膏均匀涂抹，1次/d；对照组：伤后创面不用药，用清水清洗，1次/d。分别于伤后1、3、5、7、14 d取创面组织标本，用4％甲醛固定，石蜡包埋，备用。
1.3观察指标
1.3.1大体及组织学观察观察大鼠两组创面愈合时间、分泌物、结痂及感染情况；烫伤后不同时间两组创面的病理组织学观察。
1.3.2免疫组织化学染色分析创伤后第1、3、5、7、14天，取部分创基及少许周围正常皮肤，置液氮中保存备用。创面组织经4％甲醛固定，常规石蜡包埋。4 μm厚连续切片，免疫组化染色按相应试剂盒说明进行，苯胺显色，苏木精伊红复染，脱水透明，中性树胶封片。将IL-6和IL-8的表达情况分为三个等级：阴性（－）胞浆或胞膜未见着色；阳性（+）胞浆内颗粒较细，显色高于背景；强阳性（++）胞浆内阳性颗粒粗而多，显色明显。
2结果
2.1大体及组织学观察
大鼠烫伤后2 d创面干燥结痂，痂皮呈淡黄色，质地较软，无异常分泌物及感染等。治疗组第14天创面愈合率为(43.83±6.42)％，明显高于对照组的(33.08±5.34)％(P<0.05)。组织学观察可见治疗组创面炎性渗出及水肿程度均较对照组轻（图1）。
图1大鼠Ⅱ度烫伤皮肤创面组织学观察
Ａ正常皮肤；Ｂ烫伤创面；Ｃ康美肤烧伤膏组创面组织炎症反应轻；
Ｄ愈合组创面组织炎症渗出明显
结果见表1。由表可知，IL-6呈高水平表达，两组创面均于伤后第1天开始，在中性粒细胞和单核细胞中表达IL-6，第3天达高峰，第5天起表达水平逐渐下降。但用药组的IL-6峰值较对照组低，差异有统计学意义(P<0.05)。IL-8呈高水
表1 两组创面不同时相点IL-6、IL-8表达的比较（只）
与对照组比较，*P<0.05
平表达，用药组与对照组在伤后第l天，均可见淋巴细胞和单核细胞IL-8的表达；第3天成纤维细胞中亦有明显表达，第5天起表达水平缓慢下降；但对照组明显低于用药组，两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表l。
3讨论
研究表明，IL-6能诱导B细胞的终末分化，刺激浆细胞瘤和杂交瘤的生长，诱导肝细胞产生急性期蛋白质，刺激造血干细胞，刺激T细胞和胸腺细胞[3]。IL-8能趋化和激活中性粒细胞，趋化嗜碱性粒细胞和释放组胺，促进T淋巴细胞参与免疫应答作用，增加内皮细胞的通透能力[4]。IL-6、IL-8是介导应激、炎症、免疫反应等急性期反应重要的介质之一[5-7]，在烧伤早期和脓毒症等两者显著升高，其变化与动物烧伤后脏器功能衰竭的发生、预后有密切关系。
由本实验可知，在烫伤创面组织IL-6表达中，组和对照组两组创面均于伤后第1天开始，在中性粒细胞和单核细胞中表达，第3天达高峰，第5天起表达水平逐渐下降。但治疗组的创面愈合中，第14天创面愈合率明显大于对照组的(P<0.05)；同时，IL-6的表达峰值明显低于对照组，差异有统计学意义。在IL-8表达中，伤后第l天用药组和对照组创面淋巴细胞和单核细胞中均有表达，伤后第3天在成纤维细胞中亦有大量表达，而后随着炎症的消退表达逐渐减弱。表明IL-8作为一种促炎性细胞因子，参与了创面修复的病理生理过程。伤后第3天，用药组IL-8的表达明显低于对照组，此现象一直维持到实验观察结束。实验表明康美肤烧伤膏对创面愈合具有一定疗效，与IL-6、IL-8的表达有关，也提示了IL-6、IL-8的表达水平可作为烧烫伤治疗过程创面愈合的指标。
[参考]
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