林罗氏平衡液细菌内毒素检查法的研究

【摘要】  目的 建立林罗氏平衡液细菌内毒素检查方法。方法 按《药典》2005版附录细菌内毒素检查法及中国药品检验标准操作规范细菌内毒素检查法进行试验。结果 林罗氏平衡液原液，用灵敏度为0.5EU/ml的TAL检测，对鲎试剂的凝集反应无干扰作用，检查其细菌内毒素的方法可行、有效。结论 可用细菌内毒素检查法代替热原检查法检测林罗氏平衡液。

【关键词】  林罗氏平衡液；热原；细菌；内毒素类；实验室技术和方法

　　林罗氏平衡液(Ringer-locke Balanced Salt Solution)是我院临床常用药物［批准文号：桂卫药制字(1998)178009号］。具有补充体液、纠正和维持人体酸碱平衡的作用。临床上常用于酸中毒、外伤或出血性休克［1］。该品种质量标准规定进行热原检查。本文按《中国药典》2005年版［2］及中国药品检验标准操作规范［3］规定的方法进行实验，对以细菌内毒素检查法取代热原检查法的可行性进行研究。

　　1  实验材料

　　鲎试剂(TAL)：规格0.1ml/支，灵敏度(λ)0.5 EU/ml，批号0210152、0209243，湛江安度斯生物有限公司；批号020705，北海市兴龙生物制品有限公司。细菌内毒素工作标准品（WSE）：规格70EU/支，批号2001-3，中国药品生物制品检定所。细菌内毒素检查用水(BET水)：规格2ml/支，批号030105，北海市兴龙生物制品有限公司。林罗氏平衡液：规格500ml/瓶，批号：021031、021203、021216、030107、030208、030228、030326、030416，本院制剂室配制。旋涡混合器（江苏海门麒麟医用仪器厂），电热恒温水浴箱（上海跃进医疗器械厂），101A－1B电热鼓风干燥箱（上海安亭仪器厂）。所有试验用器皿经250℃干烤2h处理。

　　2  实验方法和结果

　　2.1  细菌内毒素限值的  “钦HQ-87-20标准”规定本品热原检查剂量为M=10ml/kg·h-1。本品为静脉用药，内毒素域值为K=5EU/kg·h-1。本品内毒素理论限值L=K/M=0.5EU/ml。

　　2.2  最大有效稀释倍数（MVD）的计算  MVD=C·L/λ=(1.0×0.5)/0.5=1。

　　2.3  鲎试剂灵敏度的复核  按《中国药典》2005年版二部内毒素检查法操作［2］，用细菌内毒素检查用水（BET水）将内毒素工作标准品制成2.0、1.0、0.5、0.25λ等系列浓度，对所用两个厂家的三批鲎试剂灵敏度进行复核，结果所用三个批号鲎试剂灵敏度值均在0.5～2λ之间，λc =λb，符合规定。

　　表1  鲎试剂灵敏度复核结果（略）

　　2.4  供试品的干扰试验  按《药典》2005年版［1］及中国药品检验标准操作规范［2］的细菌内毒素检查法，采用两个厂家共3个批号λ0.5EU/ml的鲎试剂，分别用林罗氏平衡液原液和BET水将细菌内毒素工作标准品稀释成2.0 、1.0 、0.5 、0.25 λ 4个系列浓度，考察本品对细菌内毒素检查法的干扰情况，见表2。

　　表2  供试品干扰试验结果（略）

　　结果表明，用BET水稀释的内毒素标准溶液的反应终点浓度的几何平均值(Es)在0.5～2λ之间，并用供试品原液稀释的内毒素标准溶液的反应终点的几何平均值（Et）在0.5～2Es之间，故认为供试品原液对细菌内毒素检查无干扰作用。

　　2.5  样品细菌内毒素检查法与热原检查法的比较试验  取林罗氏平衡液原液5批，按细菌内毒素检查法操作［2，3］，与热原检查法［2］进行对照，见表3。

　　表3  林罗氏-平衡液细菌内毒素检查法与热原检查法结果（略）

　　两种方法检查结果一致，用于临床无一例出现输液反应。

　　3  讨论

　　实验表明，林罗氏平衡液原液对细菌内毒素检查无干扰，用灵敏度为0.5EU/ml的鲎试剂检测内毒素是有效的，并与家兔法的结果一致。细菌内毒素检查方法简单，结果准确、可靠，完全可代替细菌内毒素检查法替代热原检查法作为日常检测林罗氏平衡液。

【】
  　　［1］ 庞邦斌.平衡液质量控制及处方改进［J］.中国药房，2004，15(6):345.

　　［2］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）［S］.北京：化学出版社，2005.附录Ⅺ D.

　　［3］ 中国药品生物制品检定所.中国药品检验标准操作规程［S］，2005.287.