CD99蛋白在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

                 作者： 玄延花，刘双平，任香善

［摘要］ ［目的］ 探讨CD99蛋白表达在胃腺癌诊断中的意义. ［方法］ 采用免疫组织化学方法给111例胃腺癌和20例正常胃黏膜组织进行CD99蛋白表达检测. ［结果］ CD99蛋白在正常胃黏膜细胞膜上呈高度表达，在胃腺癌细胞中呈低度表达，在正常胃黏膜和胃腺癌组织免疫组织化学染色积分数分别为7.92±3.14，1.85±3.05，两者间有显著性差异.CD99蛋白在早期胃癌组织中的表达高于进展期中，且进展期Ⅰ期病变中的积分数高于进展期Ⅳ期. ［结论］ CD99蛋白的免疫组织化学检测可作为胃腺癌早期诊断的指标.

    ［关键词］  胃肿瘤;CD99;免疫组织化学

    （Department of Pathology and Forensic Medicine，Yanbian University College of Basic Medicine，Yanji133000，Jilin，China） ABSTRACT:OBJECTIVE To evaluate the pathologic significance of the expression of CD99in gastric adenocarcinoma.METHODS The immunostaining was done using a CD99antibody in111of gastric adenocarcinomas and20of normal gastric mucosa.RESULTS The expression of CD99was very rare in gastric adenocarcinoma，only several cases of gastric cancer cells showed weak positive signals，but its expression was frequently observed in normal gastric mucosa.The immunoreactive score of CD99was7.92±3.14and1.85±3.05，respectively.The expression of CD99was significantly higher in early gastric cancer and stageⅠtissues than advanced gastric cancer and stageⅣ.CONCLUSION The expression of CD99was a useful marker for the diagnosis of gastric adenocarcinoma.

    Key words:stomach neoplasms;CD99;immunohistochemistry

    CD99蛋白是由mic2基因编码的广泛存在于各种细胞内的跨膜蛋白，其分子质量为32ku.CD99表达检测在Ewing肉瘤、原发性神经外胚瘤、淋巴母细胞瘤、横纹肌肉瘤和软骨肉瘤等间叶组织肿瘤的诊断中有重要意义 ［1～3］ .本研究观察了CD99蛋白在111例胃腺癌和20例正常胃黏膜组织中的表达情况，探讨了CD99蛋白在胃腺癌早期诊断中的意义.

    1 材料和方法

    1.1 材料  111例胃腺癌和20例正常胃黏膜组织蜡块标本均由韩国忠北大学附属医科大学校病理科提供，行常规HE染色，选取适当蜡块进行免疫组织化学检测.111例胃腺癌中早期为29例，进展期为82例;进展期中Ⅰ期为38例，Ⅱ期为12例，Ⅲ期为36例，Ⅳ期为25例.111例胃腺癌患者中发生淋巴结转移者为69例，未发生者为42例. 1.2 方法

    1.2.1 免疫组织化学染色  CD99单克隆抗体（克隆YG32）为韩国Dinona公司产品，免疫组织化学检测试剂盒购自Santa-cruz公司.染色按照说明书步骤进行，4μm厚切片，常规脱蜡，梯度酒精脱水.在抗原修复液中95～99℃条件下处理15min，室温冷却20min，缓冲液清洗5min，加入1∶200稀释的CD99抗体，室温下孵育60min，二抗室温下孵育30min，3，3′-diaminobenzidine，DAB显色，Mayer苏木素复染.染色结果示棕褐色的阳性颗粒位于细胞浆内，阳性染色细胞数多于10%时可判定为CD99蛋白阳性表达.

    1.2.2 结果判定  在显微镜下观察，按每张切片的阳性细胞比例及着色深浅计分，行半定量分析.阳性细胞着色判定（A）:低于5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，高于75%为4分;阳性强度判定（B）:无着色或与背景均匀一致的呈淡黄色为0分，浅棕黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分.根据两项指标的积分数（积分=A×B）进行结果判定.

    1.3 统计学处理  统计学分析应用SPSS统计软件，采用Chi-square（χ 2 -test）统计方法进行.

    2 结果

    在正常胃黏膜标本中，CD99蛋白特异性地高 度表达在黏膜上皮细胞膜上;而在胃腺癌标本中CD99蛋白只表达在周围淋巴细胞和血管内皮细胞膜上，低表达于癌细胞中.正常胃黏膜及胃腺癌标本的免疫组织化学染色积分数分别为7.92±3.14，1.85±3.05，两者间有显著性差异（P<0.001）.CD99蛋白在早期胃腺癌中的表达积分数为2.38±2.96，进展期中为1.12±2.89，两者间差异有统计学意义（P<0.05）.进展期胃腺癌各分期标本中的CD99蛋白表达积分数如下:Ⅰ期为2.26±3.01，Ⅱ期为1.58±3.85，Ⅲ期为1.14±3.09，Ⅳ期为0.60±1.76;Ⅰ期与Ⅳ期比较差异有统计学意义（P<0.05）;发生与未发生淋巴结转移的胃腺癌标本中CD99蛋白的表达积分数分别为1.20±2.98，1.86±2.87，两者间差异无统计学意义（P>0.05）.可见在进展期胃腺癌组织中，尤其是在Ⅳ期病变组织中CD99蛋白表达率很低，且与淋巴节转移无显著关系.

    3 讨论

    CD99蛋白主要参与细胞间粘附、泡状运输、调节细胞骨架、活化T细胞及调节细胞凋亡等 ［4，5］ .Kim等 ［5］ 报道，CD99蛋白低表达在霍奇金淋巴瘤细胞和Reed-Sternberg细胞的形成过程中起重要作用.CD99蛋白在上皮细胞上的表达明显少于淋巴细胞上，表达水平亦低于淋巴细胞.本实验结果表明，CD99蛋白在胃腺癌组织中的表达水平显著低于正常胃黏膜组织，且在进展期胃腺癌，尤其是Ⅳ期癌组织中几乎未见表达，提示CD99蛋白低表达在胃腺癌形成和过程中起重要作用，其免疫组织化学检测结果可作为胃癌早期诊断的指标.

　　［参 考 文 献］

    ［1］ Granter SR，Renshaw AA，Fletcher CD，et al..CD99 reactivity in mesenchymal chondrosarcoma［J］.Hum Pathol，1996，27（12）:1273.

    ［2］ Choi YL，Chi JG，Suh YL.CD99immunoreactivity in ependymoma［J］.Appl Immunohistochem Mol Morphol， 2001，9（2）:125.

    ［3］ Scotlandi K，Perdichizzi S，Bernard G，et al..Targeting CD99in association with doxorubicin:an effective com-bined treatment for Ewing's sarcoma［J］.Eur J Cancer， 2006，42（1）:91.

    ［4］ Kim SH，Shin YK，Lee IS，et al..Viral latent mem- brane protein1（LMP-1）-induced CD99down-regulation in B cells leads to the generation of cells with Hodgkin's and Reed-Sternberg phenotype［J］.Blood，2000，95（1）:294.

    ［5］ Kim SH，Choi EY，Shin YK，et al..Generation of cells with Hodgkin's and Reed-Sternberg phenotype through down regulation of CD99（Mic2）［J］.Blood，1998，92（11）:4287.