复方黄芪多糖对环磷酰胺所致小鼠毒副作用的影响

【摘要】  观察不同途径给予复方黄芪多糖对环磷酰胺所致小鼠毒副作用的影响.［方法］通过灌胃及腹腔注射给予小鼠相应剂量的复方黄芪多糖，并行大剂量环磷酰胺腹腔注射，观察小鼠外周血象、免疫器官指数及肝组织丙二醛的含量变化.［结果］复方黄芪多糖腹腔注射组小鼠白细胞及淋巴细胞数明显高于环磷酰胺组，脾脏指数明显升高，肝组织丙二醛含量明显降低.复方黄芪多糖灌胃大剂量组小鼠脾脏指数明显高于环磷酰胺组.［结论］复方黄芪多糖具有拮抗环磷酰胺所致小鼠毒副作用的功能，给药途径以腹腔注射为宜.

【关键词】  黄芪多糖 环磷酰胺 鼠

    Effects of the compound astragalus polysaccharides for toxic and side?effects of cyclophosphamide in mice

    ABSTRACT:OBJECTIVETo study the effects of compound astragalus polysaccharides (Co?ASP) administrated in different ways for the toxic and side?effects of cyclophosphamide (CY) in mice.METHODSMice were randomly divided  into the control，CY，Co?ASP+CY injection group and Co?ASP by intragastric administration with high dose and low dose. After the given of Co?ASP，CY was intraperitoneally injected in high does and the peripheral blood hemogram，the immunity organ and the hepatic malondialdehyde (MDA) content changes were observed.RESULTSAs compared with the group of CY, Co?APS injection group significantly increased WBC and lymphocytes and decreased GRA spermatozoa and the hepatic MDA contents, In addition, thymus index was significantly more higher in intragastric administration groups of high dose of Co?APS than in CY group.CONCLUSIONCo?ASP may have the function of antagonizing the toxic and side?effects of CY in mice, and the best administration route of the Co?ASP is intraperitoneal injection.

    Key words:astragalan;cyclophosphamide;mice

    环磷酰胺是临床上常用的广谱抗肿瘤药物，但因它的毒副作用较大，故临床应用受到限制.本研究将黄芪多糖配伍人参总皂苷制备了复方黄芪多糖制剂，探讨了不同途径给予复方黄芪多糖对环磷酰胺所引发的毒副作用的影响.

    1  材料与方法

    1.1  材料  采用昆明种小鼠，雌雄兼用，体重为18～22g，由延边大学医学部实验动物科提供.膜荚黄芪采集于吉林省和龙市，由延边大学药学院生药学教研室鉴定为膜荚黄芪(Astragalus membraneaceus　Fisch.)的干燥根.环磷酰胺为江苏恒瑞医药股份有限公司产品，丙二醛（MDA）测试盒为南京建成生物工程研究所产品.所用试剂均为分析纯.

    1.2  方法

    1.2.1复方黄芪多糖注射液的制备  黄芪药材经水提取，乙醇沉淀，透析，得白色粉末状粗多糖(苯酚?硫酸法［1］测定多糖质量浓度为832g/kg).人参药材经700mL/L乙醇回流提取，通过D101大孔吸附树脂柱等步骤得黄色人参总皂苷粉末（比色法［2］测定质量浓度为629g/kg）.分别称取提取纯化的黄芪多糖2.0g和人参总皂苷0.4g，加入蒸馏水溶解并定容至200mL，分装，在120℃条件下灭菌30min，冷却，待用.

    1.2.2  分组及给药  取60只小鼠，随机分为5个组，即正常对照组、环磷酰胺组、复方黄芪多糖腹腔注射组（10mL/kg）、复方黄芪多糖灌胃大剂量组（20mL/kg）和小剂量组（10mL/kg），每组各为12只，适应环境3d，给予各药物组小鼠相应途径和剂量药物，灌胃给予正常对照组和环磷酰胺组小鼠生理盐水20mL/kg，共10d.实验开始后第5、8日除正常对照组外其他各组给予腹腔注射85mg/kg环磷酰胺.

    1.2.3  对小鼠外周血象的影响  于实验第11日眼球取血，置于抗凝试管内，进行血常规测定.

    1.2.4  对小鼠免疫器官指数的影响  取血前称取各组小鼠体重，取血后剖取脾脏和胸腺，分别称取质量，脾脏指数与胸腺指数.脾脏指数=脾脏质量（mg）／小鼠体重（g）；胸腺指数=胸腺质量（mg）／小鼠体重（g）.

    1.2.5  对小鼠肝组织MDA含量的影响  剖取肝脏，用生理盐水制成匀浆，按照MDA试剂盒说明书进行操作，测定肝组织中MDA的含量.

    1.2.6  统计学处理  应用SPSS12.0统计软件对数据进行统计学处理，组间比较采用t检验.

    2  结果

    2.1  对小鼠外周血象改变的影响  由表1可见，环磷酰胺组小鼠外周血白细胞及淋巴细胞数明显降低，与正常对照组比较均有显著性差异(P＜0.01）.复方黄芪多糖腹腔注射组及灌胃大剂量组小鼠白细胞及淋巴细胞数明显高于环磷酰胺组，相比较均有显著性差异（P＜0.05）.表1  复方黄芪多糖对小鼠外周血象的影响与环磷酰胺组比较，* P＜0.05， ** P＜0.01

    2.2  对小鼠免疫器官指数的影响  由表2可见，复方黄芪多糖腹腔注射组和灌胃大剂量组小鼠脾脏指数均明显高于环磷酰胺组，相比较均有显著性差异(P＜0．01)；复方黄芪多糖腹腔注射组和灌胃小剂量组小鼠胸腺指数均高于环磷酰胺组，但无显著性差异.

    2.3  对小鼠肝组织MDA含量的影响  由表2可见.复方黄芪多糖灌胃大剂量组及腹腔注射组小鼠肝组织MDA含量明显低于环磷酰胺组，相比较均有显著性差异(P＜0.05).表2  复方黄芪多糖对小鼠免疫器官指数和肝组织MDA含量的影响与环磷酰胺组比较，* P＜0.05,** P＜0.01

    3  讨论

    环磷酰胺在体内经肝细胞色素P?450氧化生成中间产物醛磷酰胺，在肿瘤细胞内分解出磷酰胺氮芥，可与细胞的DNA发生烷化作用，形成交叉联结，从而抑制肿瘤细胞的增殖［3］.因环磷酰胺与DNA上述作用无特异性，故对正常的组织细胞也具有杀伤作用，特别是对增殖分化较快的骨髓造血组织、淋巴组织、胃肠黏膜上皮细胞、毛囊和生殖器细胞等的增殖具有明显的抑制作用.患者用药后常出现骨髓造血功能和机体免疫力低下及脱发等毒性反应，成为限制用药剂量和发挥疗效的主要障碍.本实验结果表明，腹腔注射2次一定剂量环磷酰胺，可使小鼠外周血白细胞及淋巴细胞数减少，脾脏指数下降，还可使小鼠肝组织MDA含量升高.黄芪多糖是黄芪的主要天然有效成分，具有提高机体免疫功能和巨噬细胞活性，双向调节血糖的作用.人参总皂苷具有抗疲劳，延缓衰老，调节中枢神经系统，提高机体免疫功能，改善心脑血管供血不足及抑制肿瘤细胞生长等作用［4］.据报道，黄芪多糖及人参总皂苷在增强小鼠免疫功能方面有一定的协同作用［5］.本实验结果表明，复方黄芪多糖抑制环磷酰胺所致小鼠免疫器官指数的下降，使外周血白细胞及淋巴细胞数增多，降低肝组织中MDA含量.

【】
  ［1］ 钟建平，钟春燕，赵道辉，等.苯酚?硫酸法测定保健食品多糖含量［J］.卫生检验杂志，2001，11（6）：675.

［2］ 张全英，施爱明，袁心慧.参麦注射液中人参皂苷含量测定［J］.中草药，2000，31（10）：750.

［3］ 王新禹， 梁前进.环磷酰胺的毒副作用机制及应对措施［J］.药学进展，2006，30（10）：452.

［4］ 张春枝，安利佳，金凤燮.人参皂苷生理活性的研究进展［J］.食品与发酵，2002，28（4）：70.

［5］ 张善玉，朴惠顺，申英爱.黄芪多糖与人参总皂苷联用的免疫调节作用初步研究［J］.中国药房，2005，16（21）：1620.