乳腺浸润性导管癌中Survivin表达及其与ER PR的相关性研究

                作者：陈秀娇 吴永廉 蔡庆发 郑建盛 张鹏飞

【关键词】  乳腺癌;Survivin;ER;PR;免疫组织化学

    摘 要  目的:研究Survivin蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达情况及其与ER、PR的相关性，探讨其与乳腺癌发生的内在联系。方法:①采用免疫组织化学SP法检测Survivin、ER和PR在乳腺浸润性导管癌中的表达情况。②统计学处理:本结果采用χ 2 、Fisher精确概率法检验。结果:①Survivin蛋白在乳腺浸润性导管癌和对照组癌旁正常组织中的阳性表达率分别为76.0%（38/50）和0.00%（0/15），两者具有显著性差异;②Survivin蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达与ER、PR和发病年龄无关，与淋巴结转移、临床分期和病理分级密切相关。结论:Survivin蛋白在乳腺癌组织中高表达，在正常组织不表达，且与临床分期、病理分级、淋巴结转移有关，可作为乳腺癌预后判断的指标之一。

    关键词  乳腺癌;Survivin;ER;PR;免疫组织化学

   乳腺癌是威胁妇女生命的常见疾病，国内外发病率始终处于不同程度的上升状态，与其它恶性肿瘤一样，其形成和发展受多种因素影响，病因及影响预后的因素尚不能完全阐明。本研究采用免疫组织化学SP法，检测Survivin在乳腺浸润性导管癌中的表达，并与传统ER和PR指标作相关性分析，探讨其与乳腺癌发生、发展和预后的内在联系，为临床提供客观理论依据。

    1 材料与方法

　 1.1 临床资料

    选取1999年～2001年我院附属病理科资料完整的存档标本65例。其中浸润性导管癌患者50例，手术前均未经放疗、化疗等任何治疗，按照美国癌症联合委员会编撰的《AJCC癌症分期手册》的最新TNM分期标准，其中Ⅰ期11例，Ⅱ期19例，Ⅲ期20例。根据Scarff-Bloom-Richardson组织学分级，Ⅰ级13例，Ⅱ级24例，Ⅲ级13例。ER阳性35例，阴性15例;PR阳性47例，阴性3例。所有患者均为女性，平均年龄50（31～83）岁。对照组为正常的乳腺组织15例（取自距肿物5cm以上的癌旁组织）。所有病例均行常规HE染色，由两名病理医生复查确定。

　 1.2 免疫组织化学染色兔抗人Survivin多克隆抗体（即用型），ER、PR鼠抗人单克隆抗体，即用型免疫组化超敏S-P试剂盒，DAB染色试剂盒均购自福州迈新生物公司。标本福尔马林固定，常规石蜡包埋切片，免疫组织化学染色程序严格按试剂说明书进行，用已知阳性切片作阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。

　 1.3 结果判断

    Survivin蛋白阳性表达主要位于细胞质和部分细胞核内，ER、PR阳性表达位于细胞核，以细胞质或细胞核出现棕黄色颗粒为阳性信号。根据阳性细胞数和着色深度计分，每例均随机观察计数5个高倍视野（×400），确定其每个视野的阳性率，取平均数，按下列计分:阳性细胞≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分;阳性细胞表达的着色深度:基本不着色为0分，黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。将两项积分相乘:≥1为阳性，<1为阴性。

    1.4 统计学方法

    采用卡方检验和Fisher精确概率法，所有统计学处理均采用SPSS11.5统计软件包进行。

    2 结果

    50例乳腺浸润性导管癌病例Survivin蛋白表达阳性者38例，阳性率为76.0%（38/50），见图1;15例癌旁正常组织均未见Survivin蛋白阳性表达，阳性率为0.00%（0/15）。如表1所示，其阳性表达率在两组间的比较经卡方检验，有显著性差异，P<0.05。50例乳腺浸润性导管癌病例ER、PR表达阳性者35例，PR表达阳性者47例，见图2、3。表1 Survivin蛋白在浸润性导管癌和癌旁正常组织的表达比较（略）

    2.1 乳腺浸润性导管癌Survivin蛋白表达与ER、PR相关性分析 （见表2）表2 乳腺浸润性导管癌Survivin蛋白表达与ER、PR的关系（略）

    本组病人50例，ER阴性15例，Survivin蛋白表达阳性13例，阳性率为86.7%;ER阳性35例， Survivin蛋白表达阳性25例，阳性率为71.4%;PR 阴性3例，Survivin蛋白表达阳性2例，阳性率为66.7%;PR阳性47例，Survivin蛋白表达阳性36例，阳性率为76.6%。

    2.2 Survivin蛋白表达与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系 （见表3）表3 乳腺浸润性导管癌Survivin蛋白表达与临床病理特征的关系 如表3所示，Survivin蛋白表达与患者发病年龄无关，与腋窝淋巴结转移、病理分期和病理分级呈显著性正相关（P<0.05），提示随着乳腺癌恶性程度的增加Survivin蛋白表达也增加。

    3 讨论

    Survivin是近年发现的结构独特的一种IAP家族新成员，是迄今发现最强的凋亡抑制因子，具有抑制细胞凋亡和调节细胞周期的双重功能，与肿瘤发生、密切相关。大量研究表明，Survivin蛋白表达具有组织特异性，在人的各种胚胎组织、发育的胎儿组织和多种肿瘤等增殖细胞中表达，而在成人分化成熟的组织中不表达或低表达 ［1，2］ 。Sur- vivin选择性表达于很多常见肿瘤，在不同肿瘤组 织的表达率不同。

    现有的报道，采用免疫组织化学的方法乳腺癌组织总体表达率为58%～90% ［2，3］ ，本实验采用免疫组化SP法检测Survivin蛋白在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达率为73.3%（44/60），与国内外文献报道基本一致，提示Survivin在乳腺癌的发生发展中起着重要作用。而且，Survivin蛋白在正常乳腺组织不表达，在癌组织高表达，虽然什么因素导致了Survivin基因在肿瘤中再活化仍然不清楚，但Survivin蛋白由于其独特的亚细胞分布被认为是处于细胞增殖与细胞凋亡界面的分子，Sur-vivin的异常表达可能直接促进细胞逃逸生长监控，提示Survivin的异常遗传学改变参与了乳腺上皮细胞的恶性转化过程 ［6，7］ ，有望成为乳腺癌基因的新靶点。

    本研究结果还显示Survivin蛋白在人乳腺浸润性导管癌中的表达与患者的年龄、激素受体（ER、PR）状况无显著相关 ［8］ ，而与临床分期、病理分级和淋巴结转移密切相关。Survivin蛋白表达随着临床病理分期增高而增强，随着组织分化程度降低而增强，有淋巴结转移明显高于无淋巴结转移，这与有关文献报道相符合 ［9］ 。结果说明Survivin的表达强度明显影响肿瘤的恶性程度及发展趋势，使其成为判断恶性肿瘤病人预后及辅助诊断的一项重要指标。ER、PR是性器官生长发育的雌激素和孕激素受体，乳腺癌表达ER、PR，说明癌细胞仍保留激素依赖性生长的特征，对各种治疗有效，尤其是内分泌治疗敏感性高，乳腺癌患者的ER、PR水平作为内分泌治疗和判断预后的一个重要的生物学指标已被人们认可。本实验Survivin与ER、PR之间不存在相关性，提示Survivin可能不受ER、PR的调控，具体情况有待进一步研究探讨。

    文献

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