CD44v6和CerbB-2在大肠癌中的表达及其与预后的关系

【关键词】  大肠癌;CD44v6;CerbB-2;免疫组织化学

    摘 要  目的:探讨CD44v6和CerbB-2在大肠癌中的联合表达及其与预后的关系。方法:采用免疫组织化学SP法，检测大肠癌及大肠腺瘤标本CD44v6和CerbB-2蛋白表达。结果:CD44v6和CerbB-2在大肠癌与大肠腺瘤中的阳性率均有显著性差异（P<0.05）。在大肠癌中阳性率分别为63.5%和47.6%，均高于大肠腺瘤中的阳性率（分别为11.1%和11.1%）。结论:CD44v6和CerbB-2在大肠癌中均有较高的阳性率，两者的表达与大肠癌淋巴结和肝转移相关，CD44v6和CerbB-2有望成为预测大肠癌转移的临床生物学指标，也可作为判断大肠癌预后的生物学指标。

    关键词  大肠癌;CD44v6;CerbB-2;免疫组织化学

    肿瘤的浸润与转移，是导致患者死亡的关键。大肠癌的发病率近年呈明显上升趋势。应用免疫组织化学技术，对大肠癌各个阶段不同基因表达产物进行动态观察，在肿瘤的基础与临床研究中有重要意义。我们在研究中用免疫组织化学方法检测大肠癌组织中CD44v6和CerbB-2基因的表达情况，并观察其表达特征及其与大肠癌患者预后的关系。

    1 资料与方法

　1.1 研究对象

    收集我院手术切除大肠癌患者的原发灶标本63例，其中男性34例，女性29例，年龄27岁～73岁，平均52.6岁;结肠癌37例，直肠癌26例;高分化腺癌12例，中分化腺癌37例，低分化腺癌6例，粘液腺癌8例。大肠癌伴淋巴结转移者27例，无淋巴结转移者36例;伴肝转移者11例，无肝转移者52例。

    设正常对照组大肠腺瘤18例，为同期外科手术或内镜活检组织，诊断均经病理证实，其中男11例，女7例，年龄24岁～28岁。

　 1.2 主要试剂和方法

    从武汉博士德公司购进丹麦Dako公司生产CD44v6和CerbB-2单克隆抗体、SABC试剂盒、APES和DAB显色试剂盒。PBS缓冲液pH=7.3±0.1，自行新鲜配制。采用免疫组织化学SP法  空白对照中用PBS代替第一抗体，其他步骤相同。

    阳性对照为武汉博士德生物有限公司提供的阳性对照片。

    1.3 结果判断标准

    CD44v6和CerbB-2染色阳性细胞为胞膜染有片状或颗粒状棕黄色。

　 1.4 统计学方法

    采用χ 2 检验和四格表确切概率法，以P<0.05为显著性检验水准。

    2 结果

    2.1. CD44v6和CerbB-2在大肠癌及大肠腺瘤中的表达情况 （见表1）表1 CD44v6和CerbB-2在大肠癌及大肠腺瘤中的阳性率 两种基因在大肠癌、大肠腺瘤中的阳性率均有显著性差异（P<0.05）。

    2.2  两种蛋白阳性率在不同大小肿瘤、分化程度、浸润深度的大肠癌患者中均无差异（P>0.05）。在肿瘤伴淋巴结转移组织中，CD44v6和CerbB-2阳性表达率分别为77.8%和63.0%，均高于无淋巴结转移组（52.6%和36%）;在肿瘤伴肝转移组中，CD44v6和CerbB-2阳性表达率分别为90.9%和81.8%，均高于无肝转移组（57.7%和40.4%）。

　3 讨论

    目前研究认为:癌基因激活、抑癌基因失活及编码产物的过度表达，导致肿瘤细胞的恶性转化和增殖失调。由于大肠癌的发生具有一系列形态学上可识别的阶段性变化，从而为研究基因变异在癌演化过程中的作用提供了良好样本。

    CerbB-2癌基因位于细胞膜上，具有络氨酸激酶活性（TPK） ［1］ 。若基因活化或结构改变，导致过量表达，通过模拟生长因子发挥作用，参与受体信号的处理，增强有丝分裂，促进癌瘤发生。研究认为，CerbB-2的过度表达与乳腺癌、子宫内膜癌、子宫肉瘤等肿瘤的病理类型及肿瘤转移有关 ［2］ 。本研究表明，CerbB-2阳性表达与大肠癌病理类型和临床分期不相关，而与大肠癌淋巴结转移和肝转移相关。

    近年来CD44基因的变异性表达与大肠癌细胞的生长、浸润、转移和预后的关系引起普遍关注。Ishiz在研究结肠癌细胞株的转移中发现，CD44表达的蛋白分子与透明质酸具有亲和力，参与结肠癌细胞与基底层粘连蛋白和IV型胶原的粘连 ［3］ 。有研究发现参与转移有关的变异型外显子普遍存在于结肠癌中，而含有V6等序列的不同CD44表达片断大部分限于肿瘤发展后期，V6在转移性结肠癌中较无转移结肠癌表达更多、密度更大 ［4］ 。

    本组研究表明CD44v6阳性表达与大肠癌病理类型、临床分期无关，但与淋巴结和肝转移相关。CD44v6和CerbB-2高表达可能在大肠癌转移过程中起某种协同作用。

    总之，CD44v6和CerbB-2在大肠癌中均有较高的阳性表达率，CD44v6和CerbB-2有望成为预测大肠癌转移的临床生物学指标。两者的表达与大肠癌淋巴结和肝转移相关，表示预后差，可作为判断大肠癌预后的生物学指标。

    ［1］ 许东哲，林贞花，沈雄虎，等.CD44s和CD44v6在大肠癌中表达的临床意义.临床肿瘤学杂志，2002，7（3）:161～164.

    ［2］ Berns EM，Foekens JA，Van Stanveren IL，et al.Oncogene am-plification and prognosis in breast cancer:relationship with systemic treatment.Gene，1995，159:11～18.

    ［3］ Ishiz S，Ford R，Thomas P，et al.CD44participates in the adhe-sion of human colorectal carcinoma cells to laminin and type IV colla-gen.Surg Oncol，1993，2（4）:255～264.

    ［4］ 晋 雯.P53、CerbB-2Pcna蛋白表达与大肠癌生物学行为 的关系.肿瘤，2002，22（5）:405～406.