女性吸毒者Th1/Th2细胞因子和性激素水平分析

                  作者：傅文君 张瑞英 刘淑丹  

【摘要】  目的:通过测定女性吸食海洛因患者外周血中T细胞亚群Th1/Th2细胞因子和血清中性激素的变化,从分子水平探讨吸食海洛因对女性免疫功能和性激素的影响。方法:取吸毒组和正常对照组清晨空腹静脉血3mL,应用双抗体夹心ABC?ELISA法测定Th1/Th2细胞因子,采用放免法检测血清雌激素(E2)、孕激素(P)。结果:吸毒组30例患者Th1细胞因子（IL?2：1.45±0.48μg/L，TNF?β：0.37±0.14μg/L，INF?γ：2.99±0.55μg/L）和Th2细胞因子（IL?4：23.68±11.22μg/L,IL?10:12.11±5.13μg/L）低于32例健康组Th1细胞因子(IL?2：4.09±0.79μg/L，TNF?β：0.91±0.35μg/L，INF?γ：5.69±0.91μg/L)、Th2细胞因子（IL?4：54.24±17.21μg/L,IL?10:22.34±7.26μg/L）水平(P<0.01);吸毒组患者血清雌激素与孕激素水平显著低于健康组(吸毒组E2:38.71±18.18ng/L,P:0.79±0.53μg/L;健康组分别为79.98±34.42ng/L和2.10±0.86μg/L)(P<0.01)。结论:海洛因的摄入可导致青年女性性腺激素水平下降和免疫水平全面下降。

【关键词】  海洛因 女（雌）性 细胞因子类 性腺甾类激素

    【ABSTRACT】  Objective:To investigate the Alterations of Th1/Th2 cytokines and sex hormone in female heroin addicts.Methods:Th1/Th2 cytokines and peripheral blood from female heroin addicts were measured by ELISA and sex hormone by radio immune for 30 female heroin addicts and 32 healthy controls.Results:For 30 female heroin addicts,Th1 cytokines（IL?2：1.45±0.48，TNF?β：0.37±0.14，INF?γ：2.99±0.55）and Th2 cytokines（IL?4：23.68±11.22,IL?10:12.11±5.13）were remarkably decreased than that of 32 healthy controls（Th1:IL?2：4.09±0.79，TNF?β：0.91±0.35，INF?γ：5.69±0.91.Th2 IL?4：54.24±17.21,IL?10:22.34±7.26）(P<0.01);serum and pregnant estrogens were remarkably decreased than that of healthy controls(heroin addicts group:E2（ng/L）:38.71±18.18,P（μg/L）:0.79±0.53 ;healthy control group:79.98±34.42 and 2.10±0.86)(P<0.01).Conclusion:Heroin can result in the decline of the immune function and sex hormone in young female.

    【KEY WORDS】  Heroin,Female,Cytokines,Gonadal Steroid Hormones

    目前,女性吸毒者日益增多，在女性青少年中比例更高，与男性吸毒者相比，对下一代的危险性更大，因为女性在孕期到哺乳期吸毒，对下一代的体格、生理、心理发育都有显著的影响。为此我们对临床上青春期女性海洛因依赖者进行了免疫和性激素水平影响研究，试图了解毒品对女性性腺激素和免疫功能影响。

    1  资料与方法

    1.1  一般资料  选取2006.12～2007.12月金华市强制戒毒所收容的女性吸毒者30例，年龄16～29岁，平均21.5±12.2岁；吸食海洛因1年以上,停吸天数在20d以内，平均吸食海洛因时间为21.1个月；吸毒剂量0.35～5.3g/d,平均2.89 ±1.19g/d,尿吗啡实验阳性。对照组为金华医学院附属体检的健康女性32例,年龄18～28岁,平均20.9±13.4岁,无长期服用药物史（包括相关保健用品）。

    1.2  方法

    1.2.1  标本收集  分别抽取吸毒组和正常对照组清晨空腹静脉血3mL,分离血浆,置-20℃冻存待测。

    1.2.2  细胞因子检测  血浆白细胞介素?2(IL?2),IL?4,IL?5,IL?10,肿瘤坏死因子-β(TNF?β)和INF?γ检测均采用酶联免疫试剂盒,应用双抗体夹心ABC?ELISA法,检测步骤按照试剂盒说明书进行。试剂盒由深圳晶美生物有限公司提供。

    1.2.3  雌性激素检测  均于周期排卵后第7d,促超排卵周期胚胎移植后第5d,采集静脉血5mL,分离血清,-20℃保存。采用天津DPC 公司生产的放射免疫方法试剂盒,测定血清雌二醇(E2)、孕酮(P)。按试剂盒说明书严格操作。

    1.3  统计学处理  采用 SPSS12.0统计软件，数据均用x±s表示,采用t检验。

    2  结果

    2.1  血清Th1/Th2细胞因子的变化见表1,显示吸毒组Th1细胞因子IL?2、TNF?β和INF?γ显著低于或低于对照组(P<0.01)；而Th2细胞因子IL?4、IL?10均低于对照组（P<0.01),但两组的IL?5差异无统计学意义。2008年8月傅文君等：女性吸毒者Th1/Th2细胞因子和性激素水平分析表1  两组血清中细胞因子水平比较

    2.2  表2为吸食海洛因组和健康组血清雌激素、孕激素比较。表2  两组血清雌激素、孕激素水平比较

    3  讨论

    本研究表明吸食海洛因者可导致青年妇女雌激素、孕激素水平下降，同时细胞因子如IL?2、TNF?β、IL?4、IL?10和INF?γ显著降低。说明海洛因的摄入可导致女性内分泌系统和免疫系统的损害。

    海洛因对女性性腺激素有严重的影响，严海燕等[1]的结果显示青春期吸毒组促性腺素释放激素（GnRH）、E2、P 水平低于青春期正常组，而FSH、LH水平则高于青春期正常组。我们的实验结果也显示女性吸毒者血清中雌激素、孕激素水平显著低于对照组（P<0.01）,这与海洛因可能通过中枢、外周神经的阿片受体介导使下丘脑?垂体?卵巢轴功能紊乱有关[2]。

    白细胞介素和肿瘤坏死因子及干扰素这些细胞因子是从免疫活性细胞分泌，具有调节机体免疫功能，参与免疫细胞增殖、分化等作用，本研究中用Th1和Th2细胞产生的细胞因子，探讨免疫功能改变，发现无论是Th1型细胞因子IL?2、TNF?β、INF?γ或Th2型细胞因子IL?4、IL?10的产生，在吸毒者中均明显下降，说明在吸毒者Th1和Th2分泌细胞因子能力下降，这可能与毒品影响了免疫细胞增殖、分化和凋亡功能有关。Zaki等[3]表明海洛因能引起T淋巴细胞对PHA刺激导致的分化能力下降，分泌IL?2、INF?γ、IL?4能力下降，同时分泌IL?5能力升高。而 Yin等[4]将人外周血淋巴细胞与吗啡共孵育,发现吗啡通过增加Fas表达,引起淋巴细胞凋亡，推测海洛因有类似吗啡的作用加速CD3+、CD4+细胞凋亡使数量减少，同时长期使用阿片类毒品使人体外周血单核细胞IL?2蛋白表达量降低,抑制T细胞增殖,也可能与海洛因作用于免疫细胞上阿片受体使其分泌细胞因子能力下降有关。而这些细胞因子的降低将导致介导细胞免疫、细胞毒性T细胞(CTL)生长和活化、巨噬细胞(Mφ)活化能力的下降，同时促进B细胞生长、活化和分化能力下降，造成免疫功能全面下降。这也证实了Bron等[5]报道海洛因成瘾者免疫功能缺陷,和 Carr[6]和Bhargara等[7]发现海洛因广泛抑制机体细胞免疫功能的结果。

    值得注意的是在女性吸毒者中，毒品不仅导致女性内分泌系统紊乱，同时也产生免疫系统的损害，二者间可能有内在的关联，但本研究对细胞因子与雌激素和孕激素之间结果并未作相关性研究，但我们知道，女性激素与免疫系统之间有相互作用、相互调节功能，雌激素通过与淋巴细胞上受体结合影响胞内环核苷酸水平,调控淋巴细胞系前体的发育和功能，具有免疫抑制及免疫刺激双重作用。超生理剂量的E2可抑制外周血淋巴细胞增殖反应,小剂量E2则刺激外周血淋巴细胞增殖[8],为此低水平的雌激素是否是对T淋巴细胞分泌白细胞介素能力下降的代偿或保护性反应，或是原发性因素尚有待进一步研究。

    海洛因的摄入可导致青年女性性腺激素水平下降和免疫水平全面下降。但对女性吸毒者血清中二者下降的机制和相关性尚须进一步研究。

【】
  1 严海燕，杨仁美，木兆慈，等.青春期海洛因依赖女性生殖系统损害的研究[J].药物滥用防治杂志，2003,9（2）：5?7

2 Vallejo R，de Leon Casasola Q,Benyamin R.Opioid therapy and immunosuppressiort a review[J].Am J Ther,2004,11(5):354?365

3 Zaki NG,Osman A,Moustafa H,et al.Alterations of immune functions in heroin addicts[J].Egypt J Immunol,2006,13(1):153?71

4 Yin D，Mufson PR，Wang R，et al.Fas?mediated cell death promoted by opioid[J].Nature,1999,397(6716):218

5 Brown SM,Stimcl B,Taub RN,et al.Immunological dysfunction in heroin addicts[J].ArCH Intem Med,1974,134(6):1001?1006

6 Carr DJ,France CP.Immune alterations in morhpine treated rhesus monkeys[J].Phamacol EXP Ther,1993,267(11):9?15

7 Bhargara HN，Thonas PT,Thorat S,et al.Effects of morphine tolerance and abstinence on cellular immune function[J].Brain Res,1994,642(122):1?10

8 罗丹，刘淑芸.雌激素及其受体亚型在免疫系统中的作用初探[J].中华妇产杂志,2005,2(11):991