神经生长因子早期干预对HIE患儿IL?18的影响
作者：黄惠娟, 陈敬国,郑铠军,夏荣华,陈简,杨秀芳,叶春华,林蔷
【摘要】 目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑损伤（HIE）外周血清IL?18的动态变化及神经生长因子对新生儿HIE的干预作用以及有关分子机制。方法 将2004年1月～2006年10月我院新生儿90例分正常对照组、中重度HIE组、神经生长因子干预组。采用ELISA方法检测1 d,2 d及7 d的血清IL?18的水平。结果 正常对照组、中重度HIE组、神经生长因子干预组的IL?18水平1 d分别为（210.2±32.3） pg/mL,（ 940.2±36.6） pg/mL,（ 842.1±35.5） pg/mL; 3 d分别为（294.2±33.2） pg/mL, （1287.6±39.8） pg/mL,（ 701.2±34.7） pg/mL; 7 d分别为（116.1±30.5） pg/mL, （937.2±36.2） pg/mL,（ 352.7±33.8） pg/mL。结论 HIE患儿血IL?18水平升高,神经生长因子能平衡IL?18的水平,调节免疫功能,保护神经细胞。
【关键词】 新生儿；缺氧缺血性脑损伤；神经生长因子；白介素?18
新生儿缺氧缺血性脑损伤(neonatal hypoxic?ischemic brain damage , HIE)是围生期中的胎儿或新生儿由于各种因素引起的缺氧缺血、脑血流减少或暂停而导致的一种疾病,是窒息后的严重并发症,是导致儿童神经系统伤残的常见原因之一。严重的缺氧缺血性脑损害可产生永久性神经系统缺陷,如脑瘫、智力低下、学习障碍、癫痫等［1］。动物实验和临床研究［2］证实新生儿缺氧缺血性脑病患儿血清中多种细胞因子、趋化因子、黏附因子水平发生变化。IL?18是重要的细胞因子,我院应用神经生长因子NGF对HIE患儿进行早期干预,疗效甚佳，现报告如下。
1对象与方法
1.1 研究对象
选择2004年1月～2006年10月在我院出生的新生儿90例为观察对象。其中HIE组30例,男16例,女14例,均为符合HIE诊断标准［1］ 的中重度HIE患儿；正常对照组30例,为同期出生的正常新生儿,其中男17例,女13例；神经生长因子早期干预组30例,其中男16例,女14例,均为符合HIE诊断标准的中重度HIE患儿,在家属同意下,出生24 h内即开始使用神经生长因子NGF 2 000 u肌注,1天1次, 10 d为一个疗程。3组胎龄均为37～42周,出生体质量2 500～4 000 g。
1.2实验仪器及试剂来源
常温匀速离心机,37 ℃恒温水温箱,高精度移液器,EP?doof管,酶标仪,IL?18试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司,神经生长因子NGF购自厦门北大之路生物工程有限公司。
1.3方法
所有病例生后1 d,3 d及7 d抽取股静脉血3 mL,静置30 min后,在室温条件下,经离心机以3 000转/min的速度匀速离心15 min后,留取上清液,存-80 ℃冰箱保存待检,采用ELISA(酶联免疫吸附试验)方法检测血清,最后经酶标仪在450 nm处读取A值,并在标准曲线上查出其浓度值。
1.4统计学分析
结果以±s表示,所有数据经SPSS 10.0统计分析软件进行处理，以P＜0.05为差异有显著性。
2结 果
中重度HIE组与正常对照组比较,生后1 d,3 d,7 d HIE组IL?18水平均高于正常对照组,尤其以3 d时明显,神经生长因子干预组与中重度HIE组比较,IL?18水平降低,见表1。
表1各组患儿生后1 d,3 d,7 d 血清IL?18水平比较 略
3讨 论
IL?18是由Okamura等［3］在1995年从中毒性休克的小鼠肝脏中发现的一种炎性细胞因子。正常情况下机体不分泌IL?18,但在 IL?1、TNF?a、IL?6、LPS、外毒素等作用下,IL?18可由单核细胞、巨噬细胞、上皮细胞、小胶质细胞等分泌并产生无活性的IL?18前体形式,经IL?1β转换酶在冬氨酸(ASP?X)位点切去前导序列后,才裂解成有活性的IL?18发挥生物学作用。
Hagberg［4］等学者报道在新生小鼠脑缺氧缺血再灌注损伤后12 h时IL?18开始升高,并持续升高24～72 h。实验中将7日龄新生鼠一侧大脑半球制成缺氧缺血模型即实验侧,对侧大脑半球未施加缺氧缺血影响即为对照侧，通过观察后发现，新生鼠脑组织缺氧缺血后第3天和第6天,活性IL?18分泌增加了70%和36%。经双标记免疫荧光测定为小神经胶质细胞,提示脑缺氧缺血后小神经胶质细胞首先被激活，使IL?18分泌增加参与其病理损伤过程。本研究结果显示中重度HIE患儿血清IL?18水平与正常对照组比较明显升高,差异有显著性(P<0.05),说明IL?18参与了HIE的发病过程。
缺氧缺血后神经营养因子(neurotrophic factors，NTF)分泌不足致神经元细胞受损，外源性神经营养因子可以使受损的神经元细胞得以修复。既往认为神经元细胞无再生能力，一旦受损不可能再生。近年来国外学者［5,6］发现只要给予受损的神经元细胞适当的生长内环境，即予以神经营养因子，受损的神经元细胞是可以再生的。神经营养因子是由不同类型细胞产生的各种多肽片段，在外伤和炎症等高代谢状态下，它的合成增加，活性增强。此类多肽片段能够促进胚胎神经元的发育和成熟、维持成熟神经元的存活、促进损伤神经元的再生。其中神经生长因子NGF就是一种最重要的神经营养因子。本实验结果显示，神经生长因子能降低外周血清IL?18的水平，有利于缺氧缺血脑损伤的康复。
【】
［1］金汉珍，黄德珉，官希吉.实用新生儿学［M］.2版，北京：人民卫生出版社，2000：624-631.
［2］ 陈敬国，蒋犁. 缺氧缺血脑组织生化免疫成分的改变［J］. 国外医学:儿分册，2002，29(5):260-262.
［3］ OKAMURA H, TSUTSI H, KOMOTSU T, et al. Cloning of a new cytokine that induces interferon-γ［J］. Nature,1995,378(6552):88-91.
［4］HAGBERG H, LEVERIN A L, ERIKSSON K, et al. Interleukin?18 involvement in hypoxic?ischemic brain injury［J］. J Neurosci, 2002,22(14):5910-5919.
［5］ALOE L，IANNITELLI A. Neurotrophic factors and brain damage in hypoxic?ischemic encephalopathy: a role of nerve growth factor［J］. Ann Ist Super Sanita, 2001,37(4):573-580.
［6］KIM D H，ZHAO X，TU C H ，et al. Prevention of apoptotic but not necrotic cell death following neuronal injury by neurotrophins signaling through the tyrosine kinase receptor［J］. J Neurosurg，2004 ,100(1):79-87.
