中药对糖尿病周围神经病变大鼠作用的研究
【关键词】 中药;糖尿病/并发症;周围神经病变/病因学;大鼠;实验研究
糖尿病周围神经病变是糖尿病主要的慢性并发症,其发病机理和临床表现涉及多个系统、多个脏器和组织。发病机制尚未完全明了,普遍认为是多种因素共同作用的结果。
1 实验材料
1.1 实验动物 选用8周龄雄性健康Wister大鼠,体重220-250 g,40只。随机分成4组,即模型组、弥可保组、中药组、正常对照组。
1.2 实验用药 中药:黄芪30 g,桂枝15 g,水蛭5 g,葛根20 g,知母15 g,泽泻20 g,延胡索15 g,地龙15g。西药:弥可保(甲钻胺片)
2 实验方法
2.1 模型制备及分组 选取体重(240±20)g雄性Wistar大鼠,光线,自由饮水,自由摄食条件下适应性喂养1 W。然后禁食12 h,将链脲佐菌素临用前用0.1 mmol/L枸橼酸缓冲液(pH:4.2-4.5)避光条件下配成2%浓度溶液,按剂量50 mg/kg左下腹腔内单次注射,72 h后取尾血测血糖,凡血糖>16.7 mmol/L作为糖尿病大鼠。1 W后,将30只糖尿病大鼠,随机分为3组:模型组,中药高剂量组,弥可保组,另取体重、鼠龄相匹配的同批大鼠10只,用0.1 mmol/L枸橼酸缓冲液(pH:4.2-4.5)按同体积左下腹腔内单次注射,72 h后取尾血测血糖,作为正常对照组大鼠。
2.2 给药方法 中药高剂量组每日7.44 g/kg,弥可保组1.35 mg/kg,模型对照组和正常对照组灌以同体积蒸馏水。以上药物均由蒸馏水配制,配制后储存于4℃冰箱中,药液定期配制,每日灌胃1次,连续4 W。
2.3 检测指标 (1)一般状态:观察大鼠精神状态、形体形态、皮毛颜色、光泽,肢体活动、反应等情况。(2)体重测定:将大鼠放到称的托盘中称取大鼠体重,于实验开始和结束各记录1次。(3)血糖测定:将大鼠固定,左手拇指和食指轻轻捏住大鼠尾巴,使尾尖微微上翘,用酒精棉球在尾尖部擦拭消毒,然后用无菌眼科手术剪迅速剪破尾尖皮肤,待尾静脉血慢慢渗出,轻轻将渗出的血液滴到血糖试纸上,把血糖试纸插入血糖仪中,30 s后记录血糖数值。在实验开始和实验期满各记录1次,在测血糖前12 h内禁食,正常饮水。(4)血液流变学测定:血样采集:将大鼠腹腔注射20%乌拉坦5 mL/kg进行麻醉,然后将颈部被毛剪掉,75%酒精棉球擦拭、消毒,用手术刀将颈部皮肤剥开大约2 cm左右的切口,用止血钳轻轻剥离肌肉和皮下组织,暴露气管,在气管左侧找到颈总动脉。剥离颈总动脉,用止血钳把周围肌肉组织和神经组织剥离后穿双线,远心端结扎,近心端用动脉夹阻断血流,在靠近结扎线端用眼科手术剪剪一个“V”形小口,然后插入用浓度为50 u/mL的肝素浸泡的塑料插管结扎,固定。打开动脉夹,接取血液。先接入到用肝素抗凝的血液流变管中,并轻轻左右摇摆,幅度不宜过大,然后送往化验室检测。用普通试管继续接取血液备用。
3 实验结果
3.1 一般状态 实验期满,除正常对照组外,各组大鼠均出现明显多饮、多尿、多食;体重明显下降;皮毛污秽无光泽;精神萎靡、反应迟钝、动作迟缓;蜷卧拱背、后肢活动不灵活,甚至痪废不用等现象。各组大鼠情况均好于模型组,其中中药组表现较好,大鼠体重虽然减轻,但减轻幅度较小,弥可保组大鼠的一般情况均好于模型组,但不及中药组。
动物存活情况:正常对照组动物未出现死亡,模型组死亡3只,中药高剂量组、弥可保组各死亡1只。
3.2 各组大鼠血糖及血液流变学变化 见表1。
表1 各组大鼠血糖及血液流变学变化比较(略)
表1结果表明,与正常组相比,各组大鼠血糖均显著升高(P<0.01),与模型组相比,中药高剂量组血糖降低(P<0.01),弥可保组对血糖影响不大,与模型组相比无统计学差异(P>0.05);以上结果表明,与正常组相比,各组大鼠血液流变学指标均有明显变化(P<0.05),与模型组相比,中药高剂量组改善明显,与模型组相比有显著性差异(P<0.01),效果最好;弥可保组则改善不明显,与模型组相比无统计学差异(P>0.05)。
4 讨论
糖尿病周围神经病变是在糖尿病基础上而来的,以脏腑阴虚燥热、气阴两虚、津液输布失常为基础,随着病程的延长,日久导致瘀血阻滞经络,出现肢体疼痛、麻木等诸多表现[1-4]。
本研究表明中药复方对糖尿病周围神经病变具有抑制作用,改善了神经及血管的结构和功能从而治疗糖尿病周围神经病变。虽然治疗机制还不能完全阐释,但我们认为中药复方治疗糖尿病周围神经病变具有很大的潜力,值得进一步研究和开发。
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[1]姜希才,吴湘华.益气活血法治疗糖尿病周围神经病变82例[J].吉林中医药,2000,(2):24.
[2]张广德.鸡鸣散加味治疗糖尿病周围神经病变[J].中医药信息杂志,1999,6(10):54.
[3]衡先培.通络糖泰治疗糖尿病周围神经病变临床研究[J].成都中医药大学学报,1999,22(2):11.
[4]任爱华.萎痹方治疗糖尿病周围神经病变临床观察[J].中国中西医结合杂志,2000,20(7):543