黄精对D-半乳糖所致衰老小鼠的抗衰老作用研究
作者：王爱梅，周建辉，欧阳静萍
【摘要】 目的：探讨黄精对实验性衰老小鼠的抗衰老作用及机制。方法：以D-半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型，同时给予黄精煎剂，6周后,以超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、脂质过氧化的终产物丙二醛(MDA)为指标，观察黄精延缓衰老作用。结果:黄精能有效提高衰老小鼠脑组织中的SOD、GSH-Px、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性，降低MDA含量。结论：黄精有明显抗衰老作用，其作用机理可能与其清除自由基的作用有关。
【关键词】 黄精；D-半乳糖；衰老；自由基；小鼠
黄精为百合科植物黄精、多花黄精、滇黄精的根茎，是一味传统的补益药，早在《本经》中就有“多年不老，发白更黑，齿落更生”的记载，作为常用中药，前人对黄精水煎液及其醇提物的药理作用进行了较多的研究，证明其具降血糖、显著增加冠脉血流量、抗癌等多种药理作用［1］。我们采用D-半乳糖致亚急性小鼠衰老模型，观察研究黄精的抗衰老作用，初步探讨其作用机制。
1 材料和方法
1.1 材料 D-半乳糖(上海恒信制药厂，批号20010218)；超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),Na+-K+-ATP酶，丙二醛(MDA)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)；黄精购自河南省南阳市医药公司；751型紫外分光光度计(山东高密分析仪器厂)；XHF21高速离心机(北京医用离心机厂)；XW280A旋涡混合器(上海医科大学仪器厂);分析天平(上海精密仪器厂)；电动玻璃匀浆机(宁波新芝生物科技股份有限公司)；雄性昆明种小鼠50只，体重(25±5) g,由南阳医学高等专科学校实验动物中心提供。
1.2 方法
1.2.1 黄精水煎剂的制备 取黄精500 g加自来水2500 mL煎煮30 min，4层纱布过滤，药渣用2000 mL自来水煎煮30 min过滤，合并滤液，浓缩至1 kg/L，高压灭菌，4℃ 冰箱保存备用。
1.2.2 动物分组及给药 将50只小鼠随机分成5组，每组10只，即空白对照组、模型组、黄精低、中、高剂量组。实验组分别以8 g/kg,16 g/kg，24 g/kg黄精煎液灌胃给药，1次/d，对照组、模型组每日灌胃等量生理盐水。
1.2.3 造模方法 模型组和黄精低、中、高剂量组每日颈背部皮下注射10 g/L D-半乳糖0.14 g/kg，空白对照组注射等量生理盐水。
1.2.4 脑组织SOD、MDA、GSH-Px酶、Na+-K+-ATP酶测定［2］ 小鼠脑组织匀浆制备给D-半乳糖及受试药42 d后，断头处死小鼠，迅速取出小鼠脑，用冰冷的生理盐水洗2次，滤纸拭干称质量，剪碎组织块后，倒入匀浆瓶中，量取9倍生理盐水，先取少量倒入装有组织块的匀浆瓶中，冰水中匀浆15 min，然后将余下的生理盐水加入，制成10%的脑组织匀浆。参照南京建成生物工程公司试剂盒说明书方法步骤测定。
1.2.5 统计学处理 实验数据用(x±s)表示，采用方差分析处理数据。
2 结果
2.1 对D-半乳糖亚急性衰老小鼠脑SOD、GSH-PX、MDA含量的影响 见表1。
表1 黄精对D-半乳糖衰老模型小鼠脑组织中SOD、GSH-PX、MDA含量的影响（略）
注：与对照组比较★P＜0.05，★★P＜0.01，模型组比较△P＜0.05，△△P＜0.01。
2.2 对D-半乳糖亚急性衰老小鼠脑、心肌Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性的影响 见表2。
表2 黄精对D-半乳糖亚急性衰老小鼠脑Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性的影响（略）
注：与对照组比较★★P＜0.01，与模型组比较△P＜0.05，△△P＜0.01
3 讨论
机体衰老的分子机制包括诸多因素，而自由基的损伤在衰老机制的研究中占有重要的地位［3-4］。正常情况下，体内存在的氧化防御系统包括SOD，GSH-Px等，对抗氧化应激反应，清除机体内产生的自由基，从而起到抗衰老的作用。因此，SOD、GSH-Px、Na+-K+-ATP、Ca2+-ATP酶活性的高低可间接反映机体清除氧自由基的能力；MDA含量的高低间接反映细胞衰老程度。
本研究证实黄精可以减少衰老小鼠脑组织中MDA的产生，增加SOD,GSH-Px的活性。从而减少脑中氧自由基的产生，增强清除氧自由基的能力，提高机体抗氧化的功能，抑制机体、组织、细胞的过氧化过程，并能明显提高脑细胞Na+-K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶的活性，防止细胞内Ca2+超载从而起到抗衰老的作用。
【】
［1］孙隆儒，李 铣.黄精改善小鼠学习记忆障碍等作用的研究［J］.沈阳药科大学学报，2001，18(4):286-289.
［2］陈 勤.抗衰老研究方法学［M］.北京:医药科技出版社，1997:85.
［3］陈 瑾，李荣亨.衰老的自由基机制［J］.中国老年学杂志，2004，24(7)：35.
［4］李笑萍，喻培先，赵 冬.D-半乳糖衰老模型观察的新指标［J］.中国应用药学杂志，2004，21(6):442-444.
