生肌膏质量标准研究

                   作者：裴广柱 施书东 马振莲  

【摘要】  目的：研究制定生肌膏的质量标准。方法：择生肌膏的制备工艺、药味或有效成分鉴别和有效成分含量测定三大项目进行研究。制备工艺研究重点是对生地、当归、生龟板的提取，改高温油炸法为水煎提取法，相应调整其他工艺环节;药味或有效成分鉴别采用薄层色谱法、理化法和显微鉴别法;有效成分含量测定采用高效液相色谱法。结果：制备工艺研究成功，取得了一系列重要技术参数，新工艺制品疗效提高36%;成品制剂中全部方药均实施了鉴别检测;生地、当归、炉甘石三味成功进行了主要有效成分含量测定。结论：该研究为制定新的质量标准奠定了坚实基础。

【关键词】  生肌膏; 质量标准; 制备工艺; 方药鉴别; 含量测定

生肌膏方药由珍珠、龟板、生地、当归、生石膏和炉甘石等组成，功效滋阴解毒，生肌敛疮，促进上皮愈合，主治疮疡不愈、烧伤烫伤等。长期临床实践证明，在中西药同类制剂中，生肌膏独具特别显著的治疗效果。但由于受到医药科技发展的限制，其质量标准工作一度停滞不前。为了科学地继承发扬中医药精华，依据当前科技发展新形势，我院药学工作者对生肌膏质量标准的建立进行了研究。现从制备工艺、成分鉴别和含量测定三个重要方面阐述。

　　1 制备工艺

　　1.1 工艺过程

　　1.1.1 取麻油2000g置加热锅内加热至260℃，加入生血余，维持油温260℃～300℃，30min，至血余完全炭化，捞出血余炭，置乳钵内加少量油液研成细糊状，备用;油液另置，备用。

　　1.1.2 取麻油1000g，加热至100℃，加入当归炸提20min;油温升至130℃，续炸5min，至当归饮片微焦而尚未炭化时捞出，油液过滤备用。

　　1.1.3 将过油当归残渣合并生地，水煎法提取2次，每次45min，煎液过滤，浓缩成稠膏备用。另将生龟板碎成0.5×0.5cm2粗粒，水煎法提取6～8次，每次60min，以手拈龟板即酥为度，煎液过滤，浓缩成稠膏备用。

　　1.1.4 将5000g新油兑入炸过血余炭的油液中，维持油温220℃，投入生石膏粉和生炉甘石粉熬炼30min;另取蜂蜡熔化过滤后兑入油液中续炼10min，降温，维持油温80℃，备用。

　　1.1.5 将1.1.2油液与1.1.4油液混合为a;将1.1.3两组稠膏混匀后加适量无水羊毛脂研和均匀为b;按等量递加法将a与b研和均匀，维持温度50℃，为c;取适量c膏与珍珠粉、血余炭糊研和均匀，剩余c膏分次等量兑研，成为终膏d即可。

　　1.2 制备工艺研究

　　1.2.1 油炸血余 油炸血余意在制炭。在1个大气压和25℃±5室温条件下，油温低于260℃，血余不发生炭化反应;油温达260℃开始出现炭化反应，但反应不完全;只有经过一段时间热的蓄积和转换，生血余才能渐次炭化，达300℃时才会呈现较完全的炭化反应，此时血余炭呈蜂窝状固态，用金属软膏刀击之有声，说明恰到好处。油温超过300℃，血余炭受热液化，逐渐产生无焰燃烧和油、炭有焰燃烧。油温300℃超过30min，血余炭无明显变化，但无制剂意义。

　　1.2.2 油炸当归 油炸当归，目的是溶提挥发油。用100℃麻油炸提当归，沸点低于100℃的挥发油均可大部溶出，但饮片表面不变色，说明100℃油温对当归饮片的脱水能力尚不明显。油温超过100℃，较高沸点的挥发油开始溶出，这时当归断面由黄白色逐渐变成暗黄色，证明当归开始脱水。但如果油温超过130℃或130℃超过5min，则当归迅速炭化。当归一旦炭化，就失去了之后的水提价值。因此，油炸当归必须特别强调控制火候，兼顾溶提挥发油和之后的水提水溶性成分。

　　1.2.3 水提生地当归 生地主含梓醇及大量多糖，当归主含除上述挥发油，尚含阿魏酸及多糖。两组有效成分均系亲水疏油物质。老工艺经260℃高温油炸，药油又经60min熬煎，使以上成分损失几乎达到100%，成品制剂中有关成分鉴别均呈阴性反应。新标准采用水提法，从根本上改变了这种状况，成品制剂中有关成分鉴别均呈阳性反应，有关成分的含量均与中药饮片剂量呈平行关系，使成品中有关成分的含量测定成为可能。

　　1.2.4 水提生龟板 生龟板的主要成分为氨基酸，亦是亲水疏油物质。老工艺亦经260℃高温油炸，药油又经60min熬煎，造成100%损失。新标准根据相似相溶规律，改油炸法为水提法，使成品中氨基酸的鉴别和含量测定成为可能。水提生龟板，必须注意，要以生龟板入煎，不可以砂烫品入煎。砂烫品固然容易煎出有效成分，但从中医理论观，生龟板擅长滋阴潜阳，而砂烫龟板滋阴潜阳功效降低。为了最大限度把生龟板中的氨基酸提出来，除适当增加提取次数和提取溶剂之外，应将生龟板碎成小块或粗粒，增大与水溶剂的接触面积。通过比较计算可知，一块12×18×0.2cm3的生龟板，如果碎成0.5×0.5×0.2cm3小块，表面积将会增大863倍，提取效率相应大幅提高。生龟板中氨基酸提尽的“度”就是把生龟板煮“酥”，手拈龟板，一拈即碎。

　　1.2.5 控温缩时 控温是指控制大组分油性基质的熬炼温度;缩时是指适当减少熬油时间。本标准中，除油炸血余炭过程，使25%的基质麻油达到300℃外，其余75%的基质麻油升温均控制在220℃以内，大组分油液熬炼时间也从过去的60min缩减为40min。如此控温缩时，可大幅度减少麻油在高温长时间条件下大量的分解、氧化、聚合反应，大幅度减少低分子醛、酮的生成，从而在最大程度上避免火毒的产生。生肌膏是外用中药软膏，没必要象制黑膏药那样，使麻油高度分解高度聚合，相反，麻油药液熬的“嫩”一点，却能使生肌膏疗效明显提高，用于早、中、后三期外科疮疡诸证，均为适宜。

　　1.2.6 混合兑膏 用水提法收集到了生地、当归和生龟板的稠膏，随即面临如何将水提稠膏与大组分油性基质混合的问题。实践证明，必须解决三方面问题：第一是选择合适的W/O型乳化剂，将水提稠膏乳化切割，然后与大组分油性基质混合;第二是选择恰当的温度70℃～80℃，使乳化切割成功;第三是研磨作功。三者缺一不可，但以第一个条件最为重要。曾做过多次实验，用单硬脂酸甘油酯乳化的水提稠膏，同样在70℃条件下，研磨作功量，超过用无水羊毛脂乳化水提稠膏研磨作功量的100%还多。因此，选定用无水羊毛脂作W/O型乳化剂。

　　2 成分鉴别

　　成分鉴别方法，包括理化法，薄层色谱法和粉末显微法。各种方法所用的试剂、仪器、材料，供试品均由本院药厂提供，所用对照品由山东省药品检验所提供。

　　2.1 炉甘石

　　2.1.1 碳酸盐 取生肌膏1.0g，加乙醚10ml溶洗2次，弃去醚液，收集残渣，加50%乙醇10ml荡洗2次，弃去乙醇液，残渣加10ml稀盐酸，即出现泡沸，发生二氧化碳气，导入氢氧化钙试液中，即生成白色沉淀。

　　2.1.2 锌盐 取以上炉甘石的稀盐酸溶液，加亚铁氰化钾试液，即生成白色沉淀;分离，沉淀在稀盐酸中不溶解。

　　2.2 生石膏

　　2.2.1 钙盐 取生肌膏1.0g，加乙醚10ml溶洗2次，弃去乙醚液，残渣加50%乙醇10ml荡洗2次，弃去乙醇液，残渣加10ml稀盐酸溶解，过滤，滤液作为供试品溶液。取铂丝用盐酸湿润后蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显砖红色。

　　2.2.2 硫酸盐 取供试品溶液，滴加氯化钡试液，即生成白色沉淀;分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶;另取供试品溶液，滴加醋酸铅试液，即生成白色沉淀，分离，沉淀在醋酸铵试液或氢氧化钠试液中溶解。

　　2.3 珍珠(粉末)

　　取生肌膏1.0g，加乙醚10ml溶洗2次，弃去乙醚液，残渣加50%乙醇10ml荡洗2次，弃去乙醇液，收集残渣，干燥、研粉，置显微镜下观察：(散在状态)不规则碎块，半透明，具彩虹样光泽。表面颗粒性由数至十数薄层重叠，片层结构排列紧密，可见致密的成层线条或极致密的微波状纹理。置紫外光灯(365mm)下观察，显浅蓝色或亮黄色，以环周部分较明亮。