反相高效液相色谱法检测非那西丁血药浓度

【摘要】 目的 建立人血中非那西丁的高效液相检测方法。方法  在健康人空白血浆中添加非那西丁以及内标物硫酸阿托品，并考察方法的线性、精密度、回收率。 结果  方法检测范围为4-64 ug·ml-1，r=0.9997，线性关系良好，低、中、高浓度天内变异系数分别为1.28%、1.13%、0.89%，天间变异系数分别为RSD分别为2.17%，1.61%，2.10%，加样回收率分别为（98.51±2.47）%、（102.32±2.11）%、（102.87±1.59）%。结论  建立的高效液相色谱方法简便、快捷，监测灵敏度高，可以应用此方法进行非那西丁血药浓度检测。
【关键词】 非那西丁  血药浓度  高效液相色谱           
        非那西丁为解热镇痛类药物，常与其他药物组成复方制剂用于解热镇痛，其本身与代谢产物都具有解热镇痛作用，本文使用反相高效液相色谱方法对非那西丁血药浓度进行检测，可为临床使用含有非那西丁的药物提供参考。
        1  仪器与试药
        日本岛津LC-6A高效液相色谱仪，SPD-6AV紫外检测器，C-R3A数据处理机，pH计（COLE-PARMER，pH WAND，39000-50），非那西丁标准品（中国药品生物制品检定所，NIC-100095），硫酸阿托品标准品（中国药品生物制品检定所，0040-9109），非那西丁原料药（内蒙古元和药业），健康人空白血浆（包头血站），乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯，水为重蒸水。
        2  方法与结果
        2.1色谱条件与标准储备液的制备：
        本文参考文献[1]并对其色谱条件进行了调整，色谱柱C18(Alltech，4.6mm×250mm，5um）；流动相：乙腈-水(25：75），含0.1%三乙胺，磷酸调节pH值至3.0；检测灵敏度为 0.02AUFS，流速1ml•min-1，检测波长210nm，柱温30℃；此色谱条件下硫酸阿托品最低检测限为16ng，非那西丁最低检测限为0.08 ug（S/N=3:1）。非那西丁与硫酸阿托品色谱图见图1。精密称取非那西丁标准品50.0mg，甲醇定容至50ml容量瓶，作为非那西丁标准储备液，冷藏避光保存。 
         
        图1 硫酸阿托品与非那西丁色谱图
        Fig 1  The chromatogram of atropine sulphate and phenacetin
        2.2 样本的前处理：
        取0.5ml血样置离心试管中，加2.5mol•ml-1的高氯酸20ul，振荡混匀，在12000转•min-1高速离心10分钟，上清液20ul进样。