清肺抑火片质量标准研究

　　3.3  测定法

 　   分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μL,注入高效液相色谱仪,测定,即得。

　　3.4  线性关系的考察
  
　　制备浓度为65 μg/mL的黄芩苷甲醇溶液,微孔滤膜滤过,依次进样2.5、5、7.5、10、15、20 μL,对所得峰面积和各对照品进样量作回归处理,得黄芩苷标准曲线,并计算得黄芩苷回归方程：Y＝2 734.336 24X－4.427 33,r＝0.999 9。结果表明,黄芩苷的量在0.163～0.975 μg线性范围良好。

　　3.5  精密度试验

    　取同一批号样品溶液,重复进样6次,每次10 μL。结果供试品中,黄芩苷峰面积积分值RSD＝0.8%(n＝6),表明仪器精密度良好。

　　3.6  重现性试验

  　  取同一批样品(批号20070401),分别按供试品溶液制备方法制备5份样品,照上述色谱条件测定,测得黄芩苷的平均含量19.48 mg/g,RSD＝1.35%(n＝5)。

　　3.7  稳定性试验

　　取同一批号样品溶液,每隔2 h进样1次,每次10 μL,进样6次,结果6次含量RSD＝2.27%,表明样品溶液在10 h内基本稳定。

　　3.8  回收率试验
   
　　取已知含量的清肺抑火片样品(批号20070401)6份,分别添加黄芩苷对照品适量,按供试品溶液的制备方法制成供试溶液,依法测定,结果平均回收率97.43%,RSD＝1.97%,见表1。表1  回收率测定结果（略）

　　3.9  样品的含量测定
   
　　按上述方法测定3批样品中黄芩苷的含量,每份平行测定3次,结果见表2。表2  样品的含量测定结果(略)

　　3.10  阴性干扰试验
   
　　取阴性对照品溶液,按黄芩苷含量测定项下的方法进行测定。结果供试品色谱图中,在与黄芩苷对照品色谱峰相应的位置上,没有色谱峰出现,表明处方中其它药味对其测定无干扰[4]。结果见图1。

　　4 讨论
   
　　方中黄柏、前胡的薄层色谱具有荧光特性,无须喷显色剂, 3,5-二硝基水杨酸比色法测定可以快速进行定性鉴别。鉴别前胡时,溶剂系统的极性需要适当调整,方能显出荧光斑点。实验过程试用了3∶1、3∶2、1∶1的石油醚(60～90 ℃)-乙酸乙酯[3,5]系统,结果斑点重叠；改用三氯甲烷-乙酸乙酯系统时,供试品斑点能明显分开,此系统调节比例为19∶1时,展距适中,斑点清晰,达到较好的分离。对黄柏的鉴别应预先饱和,否则边缘效应严重,应先饱和10～20 min,再展开。苦参鉴别应注意显色剂及展距,展距为8 cm,分离度适中,显色剂为稀碘化铋钾时,色谱斑点清晰；若显色剂为碘化铋钾,则背景重,色谱斑点效果一般。
   
　　黄芩苷是黄芩的主要有效成分,上述含量测定条件为2005版《中华人民共和国药典》(一部)黄芩项下的含量测定方法,复方制剂在此条件下,黄芩苷与其它峰能够很好的分开,无需调整流动相的极性,便可进行定量研究。本方法操作简单,结果可靠,可用于该制剂的质量控制,进一步完善了该制剂的质量标准。

【参考文献】
  　　[1] 中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂[S].第2册.1990. 248.

　　[2] 李玉仿.清肺抑火片的薄层分析[J].天津药学,2002,14(2)：66.

　　[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.141.

　　[4] 国家药典委员会.中华人民共和国药典中药薄层色谱彩色图集[M].广州：广东科技出版社,1993.57.

　　[5] 苗明三,李振国.现代实用中药质量控制技术[M].北京：人民卫生出版社,2000.89.