马钱子及其不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量测定

　　2.9  醋酸煮砂炒法

  　  取醋酸煮马钱子片,按砂烫法项下炮制。

　　3  结果

　　3.1  色谱条件

    　色谱柱：Hypersil SiO2 (4.6 mm×200 mm,5 μm)；流动相：正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨水(47.5∶47.5∶5∶0.35)；流速：1 mL/min；检测波长：254 nm。士的宁和马钱子碱的分离度值大于1.5,定量方法为外标工作曲线法。士的宁和马钱子碱的理论塔板数分别不低于2 500和3 000。

　　3.2  标准曲线的绘制

   　 精密称取士的宁和马钱子碱对照品分别为11.60 mg和11.20 mg,置25 mL容量瓶中,加氯仿至刻度,作为混合对照品溶液。精密吸取上述对照品溶液3、5、7、9、11、13 μL,注入液相色谱仪,测定其峰面积积分值。以进样量为横坐标,峰面积值为纵坐标绘制标准曲线。士的宁和马钱子碱的回归方程分别为：Y＝2 116.75X＋9.29,r＝0.999 9；Y＝1 249.84X＋21.35,r＝0.999 8。

　　3.3  精密度试验

  　  分别精密吸取上述对照品溶液15 μL,注入高效液相色谱仪,重复进样6次,计算,RSD分别为：士的宁2.01%,马钱子碱1.75%。

　　3.4  重现性试验

  　  对砂烫品煎出液测定5次,结果士的宁平均含量为0.329%, RSD＝1.86%；马钱子碱平均含量为0.108%,RSD＝2.68%。

　　3.5  稳定性试验
   
　　取同一样品试液,分别于2、4、6、8、10、12 h进行测定,得士的宁和马钱子碱的RSD分别为2.14%和2.32%。

　　3.6  回收率试验
   
　　采用加标回收法,取已知含量的炮制品5份,精密称取,精密加入对照品贮备液适量,按样品测定项下方法操作,计算回收率。结果见表1、表2。  表1  士的宁加标回收率试验结果(略)表2  马钱子碱加标回收率试验结果(略)

　　3.7  含量测定
   
　　将马钱子生品和炮制品切成小块后粉碎成细末,过3号筛。精密称取生品及其炮制品各3份,每份约5 g,置100 mL烧杯中,加水35 mL浸1 h,煎45 min,滤出药液,药渣再加水20 mL,煎20 min,过滤,合并滤液并定容至50 mL,再精密量取20 mL于分液漏斗中,加氨水调pH至9～10,用氯仿萃取4次(15、10、5、5 mL),合并氯仿萃取液,水浴浓缩,定容至25 mL。按“3.1”项下色谱条件测定,每次进样15 μL,求得样品煎煮液中士的宁和马钱子碱的含量。结果见图1、表3、表4。表3  不同炮制方法马钱子中士的宁含量测定结果(略)表4  不同炮制方法马钱子中马钱子碱含量测定结果(略)

　　4  结论
   
　　马钱子各炮制品的水煎出物中士的宁和马钱子碱含量以油炸品和砂烫品为高,其中油炸品最高,与生品比较仍达90%以上,这可能与马钱子经油炸和砂烫后质地疏松,其化学成分易于煎出有关。江西法及其改良法炮制品的水煎出物中士的宁和马钱子碱含量较低,其中以醋浸砂炒品最低,士的宁含量为0.132%,仅为生品的31.7%,马钱子碱含量为0.031%,仅为生品的21.8%。马钱子碱的毒性为士的宁的1/8,但其疗效却只有士的宁的1/40,各炮制品中马钱子碱含量下降均比士的宁大,达到了去掉疗效差、毒性大的马钱子碱的目的。可见,江西法及其改良法炮制的马钱子比其砂烫法和油炸法更易降低毒性,使其安全范围增大,从而提高其临床用药的安全性。改良法用5%醋酸溶液代替童便炮制马钱子可缩短炮制时间、简化炮制程序,且5%醋酸溶液与童便pH值大致相当,均为5～6,醋酸廉价易得,醋味宜人。故可考虑用5%的醋酸溶液代替童便炮制马钱子。

【参考文献】
  　　[1] 吴 皓,蔡宝昌,郑培新,等.炮制对马钱子中生物碱的影响[J].中国中药杂志,1994,19(5)：277－279.

　　[2] 龚千锋.樟树中药炮制全书[M].南昌：江西科学技术出版社,1990.250.