桂芍镇痫片质量标准研究

　　3.2  溶液的制备

　　3.2.1  对照品溶液 

　　精密称取芍药苷对照品12.26 mg,置100 mL量瓶中,加甲醇适量使溶解,定容,摇匀,精密量取5.0 mL,置10 mL量瓶中,加甲醇定容,摇匀,经0.45 μm滤膜滤过,即得。

　　3.2.2  供试品溶液 

　　取桂芍镇痫片10片,除去薄膜衣,研细,取细粉0.2 g,精密称定,置50 mL量瓶中,加稀乙醇35 mL,超声处理((功率250 W,频率40 kHz),放冷,加稀乙醇定容,摇匀,滤过,取续滤液,经0.45 μm滤膜滤过,即得。

　　3.2.3  阴性对照品溶液 

　　按处方组成及制备工艺制备不含芍药的样品,按“3.2.2”项下方法处理,即得。

　　3.3  空白干扰试验
   
　　按上述色谱条件,分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液,注入液相色谱仪,测定。结果在供试品色谱中,在与对照品色谱峰相应的位置上有相同保留时间的色谱峰,而阴性对照品溶液在此无峰,见图1。芍药苷与其他组分分离良好,说明阴性样品对芍药苷含量测定无干扰。

　　3.4  线性范围考察

    精密吸取对照品溶液4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 μL,按上述色谱条件测定,记录色谱图,以峰面积为纵坐标,进样量为横坐标,进行线性回归,得回归方程为：Y＝1 547 954X＋14 289 (r＝0.999 7)。结果表明,芍药苷在0.245 2～0.735 6 μg范围内线性关系良好。

　　3.5  精密度试验

    精密吸取对照品溶液10 μL,按上述色谱条件重复进样5次,记录色谱图,计算。结果RSD＝0.81%,表明本法精密度较好。

　　3.6  稳定性试验

    精密吸取供试品溶液10 μL,按上述色谱条件测定,分别于0、4、8、12、24 h进样,记录色谱图,测定峰面积,计算。结果RSD＝1.04%,表明供试品溶液在24 h内基本稳定。

　　3.7  重复性试验

    取同一批样品(批号060811)5份,按“3.2.2”项下方法制备供试品溶液,按上述色谱条件测定,记录色谱图,测定峰面积,计算。结果本品平均含量为13.06 mg/g(RSD＝1.10%),表明本方法重复性良好。

　　3.8  加样回收率试验
   
　　取已知含量的样品(批号060811,含量13.06 mg/g),除去薄膜衣,研细,取0.1 g,精密称定,置50 mL量瓶中,精密加入芍药苷对照品溶液10 mL(浓度为0.122 6 mg/mL),其余按“3.2.2”项下方法制备供试品溶液,按上述色谱条件测定,记录色谱图,计算,结果见表1。本方法回收率在96.7%～100.3%之间,RSD＝1.52%,表明方法的准确性较好。表1  回收率试验结果(略)

　　3.9  样品测定

    取3个批号(060811、060812、060813)的样品,平行2份,按“3.2.2”项下方法制备供试品溶液。精密量取对照品、供试品溶液各10 μL,按上述色谱条件测定,测定峰面积,计算。结果3个批号样品中芍药苷的平均含量分别为4.12、4.09、4.08 mg/片。

　　4  讨论

    曾试验了甲醇-0.1 %磷酸溶液(35∶65)、甲醇-水(30∶70)及乙腈-0.1%醋酸溶液(25∶75)等流动相系统,结果均不理想。而流动相为乙腈-0.1%醋酸溶液(15∶85)时,具有较好的分离度和适宜的保留时间,故以此作为含量测定的流动相。

    在筛选样品中芍药苷的提取条件时,比较了稀乙醇加热回流法和超声提取法,结果超声提取方便、迅速,超声30 min即可提取完全,故样品的处理采用超声提取30 min。

    以TLC法对制剂中的甘草、党参及柴胡进行定性鉴别,斑点清晰,专属性好,无阴性干扰。芍药苷为白芍中的主要成分,可用来作为中成药中白芍的定量指标成分。所建立的HPLC法测定芍药苷含量简便、重复性好,可作为控制本品质量的指标。

【参考文献】
  　　[1] 崔明超,潘金火.抗感冒颗粒的薄层色谱和含量测定研究[J].中国中医药信息杂志,2007,14(9)：53－54.

　　[2] 王乐云,胡建新,袁海雄.妇科白带片的质量标准研究[J].中国中医药信息杂志,2004,11(3)：223－224.

　　[3] 宗红心,赵长杰,朱振亚,等.消癥丸(青香丸)质量标准研究[J].中成药, 2006,28(9)：1297－1300.