桂芍镇痫片质量标准研究

                    作者：管清香,岳峻威,刘昕,朱琨 

【摘要】  目的 建立桂芍镇痫片的质量标准。方法 采用薄层色谱法鉴别桂芍镇痫片中甘草、党参及柴胡,采用高效液相色谱法测定白芍中芍药苷的含量。结果 薄层鉴别的色谱斑点清晰,阴性对照无干扰。芍药苷进样量在0.245 2～0.735 6 μg范围内线性关系良好(r＝0.999 7)。平均加样回收率为98.3%,RSD＝1.52%(n＝5)。结论 本法简便、可靠,所建立的质量标准可有效控制本品的质量。

【关键词】  桂芍镇痫片；芍药苷；质量标准；高效液相色谱法；薄层色谱法

Study on Quality Standard for Guishao Zhenxian Tablets 

　　GUAN Qing-xiang, YUE Jun-wei, LIU Xin, et al

　　School of Pharmacy, Jilin University, Changchun 130021, China

    Abstract：Objective To establish the quality standard for Guishao Zhenxian Tablets. Methods Radix Glycyrrhizae, Radix Codonopsis, Radix Bupleuri were identified by TLC. The content of paeoniflorin in the preparation was determined by HPLC. Results The spots of TLC color spectrum were distinct and there was nointerference from the negative control. The calibration curve was linear over the concentration range of 0.245 2～0.735 6 μg for paeoniflorin (r＝0.999 7) and the average recovery was 98.3%, RSD＝1.52% (n＝5). Conclusion The established quality standard is convenient and reliable, and can be used to control the quality of Guishao Zhenxian Tablets more effectively.

    Key words：Guishao Zhenxian Tablets；paeoniflorin；quanlity standard；HPLC；TLC

    桂芍镇痫片由白芍、党参、柴胡等9味中药组方而成,用于治疗各种发作类型的癫痫,为《卫生部药品标准·中药成方制剂》第3册收载的品种(WS3-B-2591-97)。原质量标准中只有黄芩、白芍的鉴别,无含量测定。为了更好地控制本品质量,本试验对其质量标准进行了研究。采用薄层色谱(TLC)法对制剂中的甘草、党参及柴胡进行了鉴别,采用高效液相色谱(HPLC)法对制剂中君药白芍的主要成分芍药苷进行了含量测定。

　　1  仪器与试药

    LC-20AT高效液相色谱仪,包括SPD-20A检测器、Labsolution色谱数据处理工作站(日本岛津)；赛多利斯电子天平(1/100 000,德国)；KQ-250DE数控型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
   
　　甘草次酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号110723-200411)；党参对照药材(供鉴别用,中国药品生物制品检定所,批号121057-200303)；柴胡对照药材(供鉴别用,中国药品生物制品检定所,批号120992-0301)；芍药苷对照品(供含量测定用,中国药品生物制品检定所,批号110736- 200423)；桂芍镇痫片样品(自制,批号060811、060812、060813)。乙腈为色谱纯,水为重蒸水；其他试剂均为分析纯。

　　2  定性鉴别

　　2.1  甘草的鉴别
    　　
　　取本品10片,除去薄膜衣,研细,称取细粉3 g,加氯仿40 mL, 回流提取30 min,滤过,滤渣挥干溶剂,加甲醇40 mL,回流提取1 h,滤过,滤液蒸干,残渣加水30 mL使溶解,用水饱和的正丁醇提取3次,每次20 mL,合并正丁醇液,用正丁醇饱和的水洗涤2次,每次20 mL,合并正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品,加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法[《中华人民共和国药典》2005年版(一部)附录ⅥB]试验,吸取供试品溶液5～10 μL、对照品溶液4 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以石油醚(30～60 ℃)-甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(10∶20∶7∶0.5)为展开剂[1],展开,取出,晾干,喷以10 %磷钼酸乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。

　　2.2  党参的鉴别
   
　　取本品10片,除去薄膜衣,研细,称取细粉3 g,加正丁醇50 mL,超声处理30 min,滤过,滤液浓缩至约0.5 mL,作为供试品溶液。另取党参对照药材2 g,加水20 mL,微沸煮40 min,滤过,滤液用正丁醇30 mL振摇提取,正丁醇液浓缩至1 mL,作为对照药材溶液。照薄层色谱法[《中华人民共和国药典》2005年版(一部)附录ⅥB]试验,吸取供试品溶液和对照药材溶液各5 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-无水乙醇-水(15∶3∶2)为展开剂[2],展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇,于105 ℃下加热。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。

　　2.3  柴胡的鉴别
  
　　取本品10片,除去薄膜衣,研细,称取细粉3 g,置具塞锥形瓶中,加甲醇50 mL,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加水30 mL使溶解,并转移到分液漏斗中,用水饱和的正丁醇提取3次,每次40 mL,合并正丁醇液,用氨试液40 mL洗涤,弃去氨液,正丁醇层蒸干,残渣加甲醇1 mL使溶解,作为供试品溶液。取柴胡对照药材1 g,加水微沸30 min,滤过,滤液浓缩至约30 mL,转移至分液漏斗中,余项操作同供试品,即得对照药材溶液。照薄层色谱法[《中华人民共和国药典》2005年版(一部)附录ⅥB]试验,吸取供试品溶液和对照药材溶液各10 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-乙醇-水(8∶2∶1)为展开剂[3],展开,取出,晾干,喷以10%磷钼酸乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。

　　3  含量测定

　　3.1  色谱条件与系统适用性

    色谱柱为DiamonsilTMC18(5 μm,200 mm×4.6 mm)；流动相为乙腈-0.1%醋酸溶液(15∶85),流速为1.0 mL/min；检测波长为230 nm；柱温为室温。理论板数按芍药苷峰计算应不低于4 000；分离度R＞1.5。