高效液相色谱法测定热毒平颗粒中绿原酸的含量

　　2.4  精密度试验

    精密吸取对照品溶液10 μL,按上述色谱条件重复进样6次,测定峰面积。结果RSD＝0.52%,表明本方法精密度良好。

　　2.5  稳定性试验

    取同一批号(0602001)样品,按照“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,按上述色谱条件分别在0、1、2、4、6、8 h进样,测定绿原酸峰面积。结果RSD＝0.64%,表明供试品溶液在8 h之内稳定。

　　2.6  重复性试验

    取同一批号(0602001)样品精密称取0.5 g,共6份,按照“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,按上述色谱条件测定每份样品中绿原酸含量。结果绿原酸的平均含量为1.190 mg/g, RSD＝0.88%,表明方法重复性良好。

　　2.7  加样回收率试验

    精密称取绿原酸对照品适量,配制成0.012 4 mg/mL的对照品储备溶液,取同一批号(0602001)样品,研细,混匀,取0.25 g,精密称定,共6份,精密加入绿原酸对照品储备溶液各25 mL,按照“2.2.2”项下方法制得供回收率用供试品溶液,按上述色谱条件测定,计算回收率。结果平均回收率为102.60%, RSD＝1.69%。结果见表1。表1  加样回收率试验结果(略)
 
　　2.8  样品含量测定

    取本品3批,按照“2.2.2”项下方法制备供试品溶液,按上述色谱条件进行测定,结果见表2。表2  样品中绿原酸含量测定结果(略)

　　3  讨论

    取绿原酸对照品的甲醇溶液,在190～650 nm波长范围进行扫描,在327 nm波长处有较大吸收,与2005年版《中华人民共和国药典》中金银花的测定波长一致,故测定波长选定为327 nm。
   
　　以多种比例乙腈-0.2%磷酸溶液(15∶85、13∶87、10∶90)试验选择流动相[3-5],当比例为10∶90时,绿原酸峰分离度大于1.5,保留时间为6.967 min,主峰与杂质峰分离良好,同时无干扰峰,基线平直。

【参考文献】
  　　[1] WS3-B-3965-98,中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂(第22册)[S].

　　[2] 毕跃峰,田 野,裴姗姗,等.金银花中裂环环烯醚萜苷类化学成分研究[J].中草药,2008,39(1)：18－21.

　　[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.153.

　　[4] 刘 冰,王蓉华,徐永波.HPLC法同时测定银黄胶囊中绿原酸、黄芩苷含量[J].中国药事,2006,20(5)：303.

　　[5] 孟品佳,孙毓庆.高效液相色谱法分离金银花成份及测定绿原酸含量[J].药物分析杂志,1990,10(1)：58.