肠腑康胶囊A提取工艺的研究
作者：蒙麦侠,杨智峰,杨瑞瑞,郑洁
【摘要】 目的 优选肠腑康胶囊A的提取工艺。方法 建立高效液相色谱法测定橙皮苷含量的方法,以干膏率、橙皮苷含量为考察指标,采用L9(34)正交试验优选提取工艺。结果 最佳提取工艺为加8倍量水,回流提取3次,每次1.5 h。结论 优化的提取工艺稳定、可行。
【关键词】 肠腑康胶囊A；正交试验；高效液相色谱法；干膏率；橙皮苷
Abstract：Objective To optimize the extraction technique of Changfukang A capsule. Methods A RP-HPLC method for Hesperidin was established. With the water extraction rate and Hesperidin as the parameters, the extract condition of Changfukang A capsule was optimized by orthogonal design. Results The optimized extraction technique was as follows：The medicinal material was extracted for 3 times with total 8 times of water, 1.5 hours for each time. Conclusion The optimal preparation prosess was validated to be stable and feasible.
Key words：Changfukang A capsule；orthogonal test；HPLC；extraction rate；Hesperidin
肠腑康胶囊A是由黄芪、党参、炒白术、陈皮、木香、茯苓、炒山楂、干姜、甘草等中药提取精制而成,具有益气健脾、止泻解毒的功效。用于治疗脾虚气滞型溃疡性结肠炎、结肠炎之腹痛、腹泻、黏液便或脓血便者[1]。本试验在提取溶剂不变的条件下,以干膏率及橙皮苷含量为指标,采用正交设计法对肠腑康A胶囊的水提取工艺条件进行优选。
1 仪器与试药
日本岛津LC-2010型高效液相色谱仪；Class-VP色谱数据工作站。橙皮苷(中国药品生物制品检定所,批号110721- 200613)；甲醇为色谱纯,其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 橙皮苷的含量测定方法
2.1.1 对照品溶液的制备
精密称取橙皮苷对照品2.85 mg,置于25 mL量瓶中,加甲醇适量,超声2 min使溶解,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为对照品储备液。精密量取该储备液2 mL,置于10 mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,作为对照品溶液(0.022 8 mg/mL)。
2.1.2 供试品溶液的制备
按照处方量称取黄芪、党参、炒白术、甘草、木香、陈皮、茯苓、炒山楂、干姜等中药,置回流提取器中,按L9(34)正交表安排试验,回流提取,提取液过滤,合并,浓缩至稠膏,置烘箱中80 ℃干燥。精密称取干燥品约0.5 g,精密称定,加20 mL甲醇超声提取20 min,过滤并定容于25 mL 量瓶中,0.45 μm微孔滤膜过滤,作为供试品溶液。
2.1.3 阴性样品溶液的制备
除陈皮外,取处方量的黄芪、党参、炒白术、木香等其他药味,加8倍量水回流提取3次,每次1.5 h,合并滤液,浓缩,干燥。按“2.1.2”项制备方法制备。
2.1.4 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：Lichrosper C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相：甲醇-醋酸-水(35∶4∶61)；检测波长：283 nm。进样量：10 μL；柱温：40 ℃；流速：1.0 mL/min。理论塔板数按橙皮苷峰计算应不低于2 000[2-3]。在该色谱条件下,所用中药中的其他成分对橙皮苷的测定无干扰。色谱图见图1。
2.1.5 方法学考察
橙皮苷含量测定的线性回归方程为：Y＝1 803 443X－159 19(r＝0.999 6),线性范围为：0.165 6～4.968 μg,精密度试验RSD＝0.614%,稳定性试验RSD＝0.825%,重复性试验RSD＝0.40%,加样回收率试验的平均回收率为99.91%,RSD＝1.56%(n＝6)。
2.1.6 测定法
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μL,注入液相色谱仪,测定峰面积,以外标法计算含量,即得。
2.2 干膏率的测定
精密量取“2.1.2”项下提取液250 mL,置已干燥至恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105 ℃干燥3 h,置干燥器中冷却30 min,迅速精密称定重量,计算干膏率。干膏率(%)＝WV/250 W0×100%(W为250 mL药液的干膏重量；V为提取液的体积；W0为药材重量)[4]。
2.3 提取工艺的正交设计
采用L9(34)正交表,以干膏率、橙皮苷的提取量为指标,以加水量、煎煮次数、煎煮时间为因素,每个因素取三水平进行考察,通过正交试验确定最佳工艺条件。正交试验因素水平见表1。表1 正交试验因素水平表（略）