超声乳化法构建化妆品用熊果苷/透明质酸-己二酸二酰肼交联载药微球
3.2 熊果苷标准曲线本方法采用酶解法尽量降低HA的分子量，使其中的熊果苷充分释放，再用乙醇沉淀糖类物质，离心后的清液中没有糖类物质，对紫外分光光度计的药物吸收测量没有影响。经测定，熊果苷最大吸收波长为λmax=280 nm。绘制熊果苷标准曲线，回归方程为：Y=0.088 95+6.34 368X，Y为吸光度，X为熊果苷浓度(μg/ml)。在吸光度Y=0.197～1.295之间，相关系数R=0.998 76。
3.3 载药量和包封率的测定结果经测定，本方法制备的载药微球载药量(DL%)为(8.33±1.52)%，包封率(LE)%为(67.37±1.64)%(n=5)。熊果苷为水溶性功效物质，在微球制备过程中以包埋机制与HA-ADH微球结合。当超声波将HA和熊果苷的溶液(水相)乳化后，由于ADH对HA发生的是缓慢交联，微球中的熊果苷仍处于被物理包埋与游离于乳液中不断变换的动态环境。在这个过程中，粒径小的微球比表面积大，能接触更多的熊果苷分子，从而使包埋效率提高。而粒径大的微球包埋率则相对较低。熊果苷分子一旦被HA包埋，由于ADH的交联作用，HA的粒径处在一直收缩的过程中，孔隙变小，又会对ADH的包埋起到紧实的作用。因此，对多个微球而言，熊果苷游离出HA微球中的量总是小于HA微球在同一时刻对其包埋的量。
3.4 熊果苷/HA-ADH的释药性能
3.4.1 熊果苷/HA-ADH微球的突释和缓释效应图6～9为熊果苷/HA-ADH微球不同情况下累积释药率随时间的变化关系。熊果苷是极性较强的物质，且与水的亲和能力强，在水中的溶解度很大。从图中可以看出，载药微球中熊果苷的释药速率明显低于自然熊果苷的溶解速率，达到了缓释的效果。另外，载药微球中的熊果苷，均存在刚开始“突释”，随后匀速释放的现象。“突释”是吸附在微球表面的熊果苷向介质中快速扩散的结果。释药过程中熊果苷/HA-ADH发生显著溶胀，凝胶骨架变得疏松，为内部药物释放提供通道。此时由于释药空间的增大，药物量的减少，释放速率将变慢。 最后，HA-ADH在水中分散成絮状物质，悬浮在水中，并不溶解。
3.4.2 载药微球性能对释放行为的影响在活性物释放的过程中，通常是微球中被吸附的活性物首先经过水溶解，之后溶解的活性物由于浓度梯度的存在而扩散到接受介质中。对于熊果苷来说，它在水中的溶解度很大，因此它的释放主要受扩散控制。
在负载量一定的情况下，研究不同的微球粒径对熊果苷释放性能的影响，结果如图6所示。可以看出，随着微球粒径的减小，载有活性物的微球体外释放的速率和最终的平衡释放率均增加。不同孔径对负载熊果苷多孔聚合物微球的累积释放百分率的影响见图7。对于多孔的聚合物载体来说，孔径是被负载活性物扩散释放的通道。实验结果显示，孔径越大，释放速度越快。图6 微球粒径对熊果苷释放性能的影响图7 微球孔径对熊果苷释放性能的影响图8 不同负载量对熊果苷释放性能的影响图9 不同温度对熊果苷释放性能的影响
3.4.3 负载量对释放行为的影响在其它条件相同的情况下，改变活性物熊果苷的添加量，制备了负载量分别为20%，35%和50%的多孔聚合物微球，考察其体外释放行为，并与自然熊果苷(原粉)进行对照，结果如图8所示。可以看出，载药微球负载量越低，其突释现象更为明显，第2小时时已可释放载药总量的42%，突释量占总释放量的45%以上。其原因可能在于熊果苷是极性较强的物质，与水有较好的亲和力，再加上熊果苷在释放介质中的溶解度较大，导致释放速率较快。总的来看，载药量高的微球具有更长的缓释时间。
3.4.4 温度对释放行为的影响在负载量一定的情况下，在25～37℃范围内研究温度对熊果苷体外释放行为的影响，结果如图9所示。可以看出，温度对熊果苷的释放行为稍有影响，温度越高，释放率越高。这是因为较高的温度有利于分子的扩散。
4 结论
本实验采用超声乳化法选择油包水W/O乳液体系，以熊果苷为被包裹功效成分，成功制备了熊果苷/HA-ADH微球，成球性和分散性良好。微球载药量(DL%)为(8.33±1.52)%，包封率LE%为(67.37±1.64)%(n=5)。实验还对所制得的载药多孔微球的体外释放行为进行了研究。结果表明，熊果苷/HA-ADH微球对其有较好的缓释作用。微球粒径较大和负载量高时具有较好的缓释效果，孔径对其释放行为也有一定影响，孔径大的具有更快的释放速度;释放介质温度的变化对其释放行为影响较小。
与传统的化妆品配方相比，将多孔聚合物微球系统应用于化妆品中，可以将其中的活性组分缓慢释放到皮肤表面，以达到长时间维持有效浓度、降低毒副作用等目的。另外，多孔聚合物微球的透气性和保湿性，使它能够很好的与皮肤相容。研究微球结构、活性物性质和释放性能的基本规律对于指导化妆品用功效原料的制备，开发适合的透皮吸收缓释载体具有指导意义。
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