利用吸附法从八角中提取分离莽草酸的研究
3 结果
3.1 八角茴香油的得油率[15] X=0.990×3.3050.000×100%=6.543%在提取茴香油的过程中，精油在一直不断地蒸馏出来，水分有所损失。采取多次提取与蒸馏的次数，可以提高八角茴香油的得油率。
3.2 莽草酸定性检测结果在硅胶薄层上，制备的莽草酸样品与莽草酸标准样品在同一位置上出现相同颜色的斑点，Rf值为0.56。
3.2.1 莽草酸标准样品的标准曲线以莽草酸标准样品的色谱峰峰面积对莽草酸标准样品的含量回归，得回归方程Y=53 239X-22 614，r=0.997 2。其线性范围在0～12.0 μg内，具有良好的线性关系。见图3。
3.2.2 精密度的测定结果结果见表1。精密吸取莽草酸标准样品溶液9 μl，按照相同的色谱条件分别重复进样3次，测得其标准偏差为1.702×104，精密度为3.68%，精密度良好。图3 莽草酸标准样品的标准曲线表1 精密度实验结果
3.2.3 样品中莽草酸的高效液相色谱图在柱温为20℃和柱温为30℃条件下，进样10 μl莽草酸标准样品，分别得到20℃和柱温为30℃条件下的莽草酸标准样品的高效液相色谱图见图4～5，在色谱条件下莽草酸标准样品的保留时间分别为4.36，3.75 min，峰形较好，在相应条件下通过将莽草酸样品的峰面积与莽草酸标准样品的峰面积对比，即可算出在相同的色谱条件下莽草酸样品中莽草酸的含量。图4 柱温为20℃标准样品的高效液相色谱图 图5 柱温为30℃标准样品的高效液相色谱图
图6为用硅胶吸附分离纯化的莽草酸样品的高效液相色谱图，进样量为10 μl，柱温为20℃。在色谱条件下2号峰的保留时间为4.30 min，与10 μl莽草酸标准样品的保留时间4.36 min大致相同， 可认为2号峰为莽草酸样品峰，该样品中含有莽草酸。
图7为用201×4强碱性阴离子交换树脂吸附分离纯化的莽草酸样品的高效液相色谱图，进样量为10 μl，柱温为30℃。在色谱条件下1号峰的保留时间为3.69 min，与10 μl莽草酸标准样品的保留时间3.95 min大致相同，可认为1号峰为莽草酸样品峰，该样品中含有莽草酸。 图6 用硅胶纯化、柱温为20℃的莽草酸样品的高效液相色谱图 图7 用201×4树脂纯化、柱温为30℃的莽草酸样品的高效液相色谱图 图8为用D941弱碱性大孔吸附树脂分离纯化的莽草酸样品的高效液相色谱图，进样量为10 μl，柱温为20℃。在色谱条件下3号峰的保留时间为4.09 min，与莽草酸标准样品的保留时间4.36 min基本相同，可认为3号峰为莽草酸样品峰，该样品中含有莽草酸。图8 用D941树脂纯化、柱温为20℃的莽草酸样品的高效液相色谱图 图9为用330弱碱性阴离子交换树脂分离纯化的莽草酸样品的高效液相色谱图，进样量为10 μl，柱温为20℃。在色谱条件下3号峰的保留时间为4.22 min，与莽草酸标准样品的保留时间4.36 min基本相同，可认为3号峰为莽草酸样品峰，该样品中含有莽草酸，但样品中所含杂质较多。图9 用330树脂纯化、柱温为20℃的莽草酸样品的高效液相色谱图
3.3 样品中莽草酸含量、得率及回收率的测定结果按“2.6.5”项中的公式计算得出以下测定结果。结果见表2～3。表2 样品中莽草酸含量测定结果表3 样品中莽草酸得率及回收率测试结果
经高效液相色谱仪测定，50 g八角水提液中的莽草酸质量为2 205.47 mg,含量为4.41%。与一些文献中的报道有一定差距，主要是由于购买的八角的产地与报道的文献的不同。由表2～3数据可知，除330树脂外，用碱性阴离子交换树脂吸附提取出来的莽草酸的含量和回收率比硅胶吸附提取出来的要高一些，但色素的脱除效果不太明显。
4 讨论
在提取茴香油的过程中，精油在一直不断地蒸馏出来，而水分会有所损失。采取多次提取与蒸馏，可以提高八角茴香油的得油率，有利于提高莽草酸的浸出率。
硅胶与碱性阴离子交换树脂吸附分离纯化莽草酸相比，除330树脂外，硅胶吸附提取分离出的产物其莽草酸含量比碱性阴离子交换树脂提取出来的要低，但脱除色素的效果较好。虽然碱性阴离子交换树脂提取出来的产物莽草酸的含量较高，但色素不易脱除，影响莽草酸结晶的颜色。
用强碱性阴离子交换树脂201×4吸附分离纯化的莽草酸的含量达到 91.59%，得率为2.76%，回收率为57.22%，但脱除色素效果较差;用弱碱性大孔吸附树脂D941吸附提取的莽草酸含量为28.02%，得率为0.23%，回收率为1.49%，脱除色素的效果较好。而用硅胶吸附提取的莽草酸的含量为13.36%，得率为0.22%，回收率为0.66%，脱除色素效果最好。
通过实验表明，用强碱性阴离子交换树脂201×4吸附分离纯化莽草酸的效果最好，因此，选用强碱性阴离子交换树脂更适合莽草酸的分离纯化，但如何能更好地脱除色素还有待进一步深入研究。
【参考文献】
[1] 李 伟,曹 庸.八角茴香及其提取物莽草酸的研究进展[J].江苏调味副食品,2007,24(3):1.
[2] 林海禄,彭雪娇,罗明标,等.八角茴香中莽草酸超声提取工艺研究[J].食品科技,2007,29(4):76.
[3] 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2004:4.
[4] 彭 程,胡长利.八角茴香的加工及开发利用[J].农产品资源,2007,10(6):39.
[5] 王 琴,蒋 林, 温其标.八角茴香研究进展[J].粮食与油脂,2007,5:42.
[6] 李 伟,杨 旭.八角茴香及其提取物莽草酸的研究进展[J].中国调味品,2008,1(1):24.
[7] 马 怡,孙建宁,徐球萍,等.莽草酸对血小板聚集和凝血的抑制作用[J].药学学报,2000,35(1):1.
[8] 方玉珍,宋杰云,岑燕飞,等.毒八角酸的镇痛作用研究[J].贵阳中医学院学报,1989,1:59.
[9] 钟昌勇.八角有效成分莽草酸提取新工艺[J].福建林业科技,2008,35(1):214.
[10] 李利军,陈 甜,朱晓勇,等.离子交换树脂对莽草酸吸附特性的研究[J].现代化工,2007,27(2):178.
[11] 辛云海.银杏叶化学成分及银杏酚酸脱除工艺的研究[D].广西师范大学硕士研究生论文，2007,5:44.
[12] 刘 淼.中草药成分提取分离与制剂加工新技术新工艺新标准实用手册，第1卷[M].北京:中国教育出版社,2004：183.
[13] 王晓强,郭亚健,杨春树.高效液相法测定八角属部分植物果实中莽草酸的含量[J].中国中药杂志,2001,26(7):447.
[14] 李 伟,曹 庸,魏 华,等.反相高效液相法测定八角茴香果实中的莽草酸[J].吉首大学学报(自然科学版),2008,29(1):104.
[15] 陆志科,黎 深.快速提取分离八角茴香油的新方法[J].福建林业科技,2007,34(1):5.