金鸡菊提取物降血压化学成分实验研究

               作者：梁淑红，哈木拉提，庞市宾，孙玉华

【摘要】  目的研究金鸡菊不同提取物(总提取物、石油醚提取物、氯仿提取物、醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物)对大鼠离体胸主动脉血管环张力的影响。方法采用大鼠体外胸主动脉血管环标本，以累积给药法(0.03，0.10，0.30，1.00，3.00 g/L)观察金鸡菊不同提取物对基础状态和氯化钾预收缩的血管环张力的影响，观察其舒张程度。结果金鸡菊不同提取部位均对基础状态的血管环无影响，对氯化钾预收缩的血管环都有不同程度的舒张作用，其中氯仿部位的舒张作用最明显。结论金鸡菊氯仿提取部位有很强的舒张血管的作用。

【关键词】  金鸡菊; 有效成分; 离体血管环; 血管舒张力

　　Abstract：ObjectiveTo examine the effect of different extracts of Corepsis basalis on the tension of isolated vascular ring of thor aorta.MethodsThe study was performed with the model of isolated rat thoracic aortic rings.The effects of accumulated different extracts of Corepsis basalis(0.03,0.10,0.30,1.00,3.00g/L) on endothelium-intact aortic rings in resting tension or pre-constricted with KCl were observed. Its diastole degree was observed as well.ResultsAccumulated different extracts of Corepsis basalis had no significant effects on endothelium-intact aortic rings in resting tension, but had various degree of diastolic function on pre-constrict with KCl, and the effect of chloroform spot was the most obvious.ConclusionThe coreopsis drummondi chloroform extraction spot has very strong effect on the relaxation of aortic rings.

　　Key words： Coreopsis basalis; Effective component; Exsomatize blood pipe ring; Vasoconstriction

　　金鸡菊Coreopsis tinctoria Nuff.又名雪菊，系菊科(Compositae)金鸡菊属(Coreopsis)的干燥头状花序，单瓣、重瓣或半重瓣。舌状花黄色或金黄色，花期6～9月。大花金鸡菊属于北温带植物，原产于北美，美国弗罗里达州及墨西哥州。我国1936年作为观赏植物引种子至庐山、南岳等地栽培, 目前各地除供观赏外, 还用作全草入药，而且从花中提取的食用色素，主要成分是黄酮类化合物，具有清热解毒和降压之功效[1]。目前在新疆和田地区种植较为广泛，其维语名称为古里恰依(Gulqai)，商品名“雪菊”。当地居民多选用雪菊当茶饮用，其降血压降血脂效果非常好，表明金鸡菊是一味很有希望治疗高血压病等心血管疾病的中草药。但是目前国内外尚未有关于金鸡菊降压、降脂的研究报道。

　　基于此，为了很好的开发利用金鸡菊，本研究对金鸡菊进行了系统的溶剂萃取，分别得到总提取物部位、石油醚萃取部位、氯仿萃取部位、醋酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位，采用大鼠离体胸主动脉血管环灌流模型，以累积浓度给药法[2]观察金鸡菊不同提取部位对基础状态和氯化钾(60mmol/L)预收缩的血管环张力的影响，探讨金鸡菊不同提取部位对血管收缩作用的影响，为进一步开发、利用金鸡菊提供理论依据。

　　1 材料与仪器

　　1.1 药材金鸡菊采自新疆南疆喀什地区皮山县。

　　1.2 动物Wistar大鼠，雄性，体质量(250±26.3)g，由新疆动物实验中心提供，动物合格证号：2003-0001。

　　1.3 试剂普萘洛尔，山西云鹏制药有限公司，国药准字H1，批号：4020768;NaCl，KCl，CaCl2，KH2PO4，MgSO4，NaHCO3、葡萄糖、乙二胺四乙酸，均由上海冠戈实业有限公司生产。K-H生理液配方：NaCl 6.92 g，KCl 0.35 g，CaCl2 0.28 g，KH2PO4 0.16 g，MgSO4 0.29 g，NaHCO3 2.1 g，葡萄糖2.0 g，乙二胺四乙酸0.03 g，溶于1L双蒸水中，pH=7.4;无水乙醇、醋酸乙酯，均由天津市致远化学试剂有限公司提供;石油醚，天津市百世化工有限公司;氯仿，天津市化学试剂三厂;正丁醇，天津市福晨化学试剂厂。

　　1.4 仪器BL-410生物机能实验系统、FT-100生物张力传感器，成都泰盟科技有限公司生产;DL-501型超级恒温器，上海试验设备厂制造;混合气体(95% O2+5%CO2)，乌鲁木齐西明特种气体有限公司。

　　2 方法

　　2.1 金鸡菊有效成分的提取金鸡菊全草500 g，粉碎，分别用体积分数为95%的乙醇回流提取2次和用50%的乙醇回流提取1次，料液比1∶10，2 h/次，合并3次的提取液，减压浓缩回收溶剂得浸膏150 g。再对浸膏进行分层萃取，具体流程见图1。

　　2.2 金鸡菊提取物对血管环张力的影响

　　2.2.1 胸主动脉血管环的制备与稳定[3]大鼠断头处死，开胸迅速取出胸主动脉， 置于预先用混合气体(95%O2和5%CO2)饱和的4℃的 K-H液中，冲洗至无血迹，小心地去除外周的脂肪组织和结缔组织，并剪成2～3 mm长的血管环，将血管环置于盛有10 ml的K-H液(37℃恒温，并持续通入95%O2和5%CO2的混和气体，pH=7.4)的恒温套瓶中，每一根血管环用两个三角型挂钩贯穿血管环管腔，一端固定，另一端连接于张力传感器，张力变化由BL-410生物机能实验系统采集并记录。血管环加静息张力2 g左右，稳定90 min，期间每15 min用预温至37℃的K-H液更换液体。待血管环完全稳定后，即可进行正式实验。图1 金鸡菊有效成分提取、分离流程图

　　2.2.2 金鸡菊不同提取物对血管环基础张力的影响[3]待血管稳定后，记录静息血管环张力，以此作为100 %效应，采用累积加药方法，每5 min加入金鸡菊各个浓度的不同提取物，使灌流液中提取物终浓度分别达0.03，0.10，0.30，1.00，3.00 g/L，记录张力变化，描绘量效曲线，计算其舒张率(%)，并以等量9.0 g/L氯化钠注射液(NS)作为对照。

　　舒张率(%)=加受试药后张力-血管环基础张力血管环基础张力×100%

　　2.2.3 金鸡菊不同提取物对氯化钾预收缩的血管环张力的影响待血管环稳定后，用60 mmol/L的KCl重复刺激3次，诱发血管的最大收缩幅度，连续3次同样的刺激所引起的收缩幅度差别<10%时，以此做为100%收缩张力。按浓度梯度分别加入各提取物(终浓度为0.03，0.10，0.30，1.00，3.00 g/L)、普萘洛尔阳性对照药(终浓度为0.001，0.003，0.01，0.03，0.1 0 g/ L)，空白对照组给予等量的9.0 g/L氯化钠注射液，记录其张力变化。

　　舒张率(%)=加受试药后张力-加受试药前张力药物刺激后张力-药物刺激前张力×100%

　　2.3 统计学方法 所有数据以 ±s表示，两组之间的比较采用t检验，P﹤0.05表示有统计学差异，P﹤0.01表示有显著性差异。