酒制甘肃丹参的炮制工艺研究

                    作者：宋平顺,杨树声,马真金,郭永福

【摘要】  目的 以甘肃丹参中脂溶性成分、水溶性成分为指标,通过正交试验探讨酒制甘肃丹参的炮制工艺。方法 采用高效液相色谱法,以脂溶性成分、水溶性成分含量为指标,通过正交设计筛选炮制工艺。结果 水提取对脂溶性成分转移率仅为2.4%,实际意义不大;而对水溶性成分丹酚酸B含量有显著影响,最佳工艺条件为10%的黄酒,加20%的酒量,在80 ℃炒炙4 min。结论 选择最佳炮制工艺对于酒制甘肃丹参的制备较为合理。

【关键词】  甘肃丹参;炮制工艺;正交试验;丹酚酸B;高效液相色谱法

　　Abstract：Objective With fat-soluble ingredients and water-soluble components as indicators, to investigate the processing technology of wine Gansu Salvia by orthogonal test. Method With fat-soluble ingredients and water-soluble components determined by HPLC, the processing technology of wine Gansu Salvia was optimized by orthogonal test. Result The transfer rate of fat-soluble ingredients with water extraction was 2.4%, with little significance, while it had a significant impact on salvianolic acid B. The best process condition was 10% yellow rice wine, added 20% wine, fried in 80 ℃ for 4 min. Conclusion It was reasonable to choose the best process condition for wine Gansu Salvia.

　　Key words：Gansu Salvia;processing technology;orthogonal test;Salvianolic acid;HPLC

　　甘肃地产丹参药材商品习称“甘肃丹参”,来源于唇形科鼠尾草属植物甘西鼠尾草Salvia przewalskii Maxim.、褐毛甘西鼠尾草Salvia przewalskii Maxim.var.mandarinorum (Diels) Stibal的根及根茎[1],作为丹参代用品,应用历史悠久[2]。目前,甘肃丹参酒制法多为经验操作,选择的辅料、用量、火候等缺乏规范的工艺参数,导致饮片质量不易控制。本研究以脂溶性成分、水溶性成分的含量为指标,采用正交试验设计,探讨酒制甘肃丹参的最佳炮制工艺;并且依据其变化对有关炮制方法和炮制机理进行探讨,为酒制甘肃丹参生产工艺及临床疗效提供依据。

　　1 仪器与试药

　　美国Waters高效液相色谱仪(515型泵,717自动进样器,2487型紫外检测器)。METFIJER AE240电子天平;超声波清洗器KQ2500(昆山市超声仪器有限公司)。DGB/20-002台式干燥箱(重庆试验设备厂制造);电子调温电热套(天津市泰斯特仪器有限公司);水浴锅(河南巩义市英峪予华仪器厂);美的牌电磁炉(美的集团)。

　　丹参酮ⅡA(批号110766-200417)、丹参酮Ⅰ(批号0867- 200003)、二氢丹参酮(批号868-200002)、隐丹参酮(批号852- 9903)、丹酚酸B(批号111562-200504)均由中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用。甲醇、乙腈为色谱纯;水为纯净水;其余试剂为分析纯。辅料黄酒(酒精度分别≥5%、≥10%,浙江绍兴酒厂)、白酒(酒精度≥42%,甘肃省条山酒厂)。甘西鼠尾草Salvia Przewalskii Maxim.的根茎,野生品自采于岷县,经笔者严格鉴定。

　　2 方法与结果

　　2.1 脂溶性成分含量测定[3]

　　2.1.1 色谱条件 大连伊利特C18色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 ?m)。流动相：甲醇-水(80∶20);流速：1.0 mL/min;检测波长：270 nm;进样量：10 ?L;柱温：室温。理论塔板数按丹参酮ⅡA峰计算应不低于2 000。

　　2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取8.44 mg丹参酮ⅡA、5.17 mg丹参酮Ⅰ、5.58 mg二氢丹参酮和4.10 mg隐丹参酮对照品,分别置于100 mL棕色量瓶中,加甲醇定容制成对照品储备溶液。

　　2.1.3 供试品溶液的制备 精密称定甘肃丹参(过3号筛) 0.3 g,置具塞三角烧瓶中,精密加甲醇50 mL,称重,超声处理(功率250 W,频率33 kHz)40 min,放冷,用甲醇补充减失的重量,摇匀。

　　2.2 水溶性成分含量测定[4]

　　2.2.1 色谱条件 大连伊利特C18色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5 ?m)。流动相：甲醇-冰醋酸-水(20∶80∶1)。二元梯度洗脱：0 min→5 min,甲醇10%;5 min→25 min,甲醇10%→35%;25 min→45 min,甲醇35%。流速：1.0 mL/min;检测波长：280 nm;进样量：10 ?L;柱温：45 ℃。理论塔板数按丹酚酸B峰计算应不低于4 000。

　　2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B对照品8.25 mg,置于10 mL量瓶中,加甲醇定容制成对照品储备溶液。

　　2.2.3 供试品溶液的制备 取甘肃丹参样品(过3号筛)0.5 g,精密称定,置50 mL容量瓶中,精密加水50 mL,称定重量,90 ℃水浴回流90 min,放冷,再称定重量,用水补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

　　2.3 酒制甘肃丹参饮片的制备

　　取原药材,除去杂质,洗净,每隔1 h均匀洒1次水,并翻匀,共洒水4～6次,使药材软化,稍晾,切薄片,晾干,即得甘肃丹参饮片。

　　称取甘肃丹参饮片共9份,每份20 g,分别置于9个容器中,按L9(34)正交表安排的9种工艺,加入相应量的辅料,拌匀,闷润2 h,置于电磁炉上的锅中,用相应温度炒至规定的时间(电磁炉控温和定时),晾干,置干燥容器内,备用。另取5 g饮片粉碎成粗粉,测得水分。

　　称取酒制甘肃丹参饮片10 g,置具塞三角烧瓶中,加水40 mL,闷润20 min,置煤气炉加热至沸,文火保持沸腾10 min,取下,过滤;滤渣加水20 mL,置煤气炉加热至沸,文火保持沸腾10 min,取下,过滤;合并两次滤液,定容至50 mL,摇匀,即得酒制甘肃丹参饮片溶液。