栀子的化学成分及抗白血病活性研究

来源：岁月联盟 作者： 时间：2015-05-10

　　3  结果与讨论

　　3．1  结构鉴定
   
　　化合物1:无色片状晶体（三氯甲烷），mp 142～143 ℃。EIMS m/z：414(M+)，与文献［3］报道数据一致；与对照品β谷甾醇共薄层层析，两者的Rf值、斑点颜色完全一致。鉴定为β谷甾醇。
   
　　化合物2:无色针晶(石油醚)，1HNMR(500 MHz，CDCl3) δ：3.96［6H，s，(CH3)2 C3′, C5′OCH3］，3.93(3H，s，C7OCH3)，3.89(3H，s，C4′OCH3), 6.38(1H，d，C8H)，6.50(1H，d， C6H)，6.60(1H，br s， C3H)，7.08(2H，s，C2′H，C6′H)，12.72(1H，br s，C5OH)。以上数据与文献［4］报道一致，确定为5羟基7，3′，4′，5′四甲氧基黄酮。
   
　　化合物3: 白色结晶，mp 269～270 ℃。13CNMR(DMSOd6)δ: 38.3(C1)，23.7(C2)，76.7(C3)，38.3(C4)，52.3(C5)，21.0(C6)，32.6(C7)，38.4(C8)，46.7(C9)，38.1(C10)，24.0(C11)，124.5(C12)，138.1(C13)，41.6(C14)，30.1(C15)，21.0(C16)，46.9(C17)，54.7(C18)，28.2(C19)，27.5(C20)，26.9(C21)，36.2(C22)，22.8(C23)，16.9(C24)，16.0(C25)，15.1(C26)，23.7(C27)，178.2(C28)，21.2(C29)，23.2(C30)。上述数据与文献［5］报道一致，与标准品进行薄层层析对照，Rf值一致，鉴定为熊果酸。
   
　　化合物4:无色针状结晶，mp 167 ℃。ESIMS m/z： 181［MH］-。 IR (KBr)cm-1： 3 260， 2 940，
1 470，1 105，1 030。以上数据与文献［6］报道一致。13CNMR(DMSOd6) δ：71.3(C2,5)，69.6(C3,4)，63.8(C1,6),综上所述鉴定为D甘露醇。
   
　　化合物5: 白色粉末(三氯甲烷)，mp 163～164 ℃。ESIMS m/z：411［M+Na］+。1HNMR(500 MHz，DMSOd6 ) δ：7.45(1H，s，H3)，5.66(1H，brs， H7)，5.11(1H，d，J=6.8Hz，H1)，3.66(3H，s，COOCH3),4.14(q，2H，H10a，10b)。以上数据与文献［4］报道一致，确定为栀子苷。
   
　　化合物6: 无色粉末（甲醇）。ESIMS m/z：427 (M++Na)，1HNMR(500 MHz，DMSOd6) δ：7.56(s，H3)， 5.87(s，H7)，4.92(d，J=8.5 Hz,H1)，4.56(d，J=8 Hz， H1′)， 4.27(q，2H，H10a，10b)， 3.1～3.4(m, 4H，H2′，4′，3′，5′ )。以上数据与文献［6,8］报道基本一致，鉴定为去乙酰车叶草苷酸甲酯。
   
　　化合物7:无色粉末（甲醇）。ESIMS m/z：573 (M++Na)，1HNMR(500 MHz，DMSOd6)δ：7.46(s，H3)， 5.69(s，H7)，5.11 (d,J=5.5 Hz,H1),5.0(d，J=7 Hz，H1′)，4.14(q，2H，H10a，10b)。以上数据与文献［7］报道基本一致，鉴定为京尼平1β龙胆苷。
   
　　化合物8:无色粉末（甲醇）。1HNMR(500 MHz，DMSOd6)δ：7.35(s，H3)， 5.64(s，H7)，5.27(d，H1)，4.45(d，J=8 Hz， H1′)， 4.11(q，2H，H10a，10b)， 3.1～3.4(m, 4H，H2′，4′，3′，5′)。以上数据与文献［6,8］报道基本一致，鉴定为鸡矢藤次苷甲酯。

　　3.2  活性筛选结果
    
　　活性筛选结果（见表1）显示，化合物3(熊果酸) 对3种白血病细胞增殖均表现出了一定的抑制作用，其中对REH细胞系抑制活性最强，IC50为7.5 μg/mL。

　　表1  化合物对3种白血病细胞增殖的抑制作用（略）

　　Table 1  IC50 (50%Inhibitory concentration) of compounds from Gardenia jasminoides Ellis against three different leukemic cell linesIC50/

　　有关熊果酸对急性淋巴细胞白血病细胞的抑制作用此前未见文献报道。本文结果表明，栀子提取物中抑制细胞增殖的活性成分主要在低极性部位，水溶性部分没有显示细胞抑制作用。在分离的得到的化合物中，三萜类成分熊果酸显示出了较强的体外活性，对3种白血病细胞均有一定的抑制作用，尤其对急性淋巴细胞白血病REH细胞株有较强的抑制作用；而其他化合物均没有细胞抑制作用（IC50值大于160 μg·mL-1）。
    　　
　　民间治疗急性淋巴细胞白血病通常是取30～40个焦栀子加水煎汤。30～40个栀子大约25～35 g，熊果酸在栀子中的质量分数约为0.03%～0.04%［9］，相当于约100 mg左右熊果酸的用量，这一用量可在体内一定程度上达到抑制白血病细胞增殖的起效剂量。因此，熊果酸可能为栀子治疗急性淋巴细胞白血病的一个活性成分。当然，栀子中其他成分在治疗急性淋巴细胞白血病中发挥的作用及其机制可能也不可忽略，例如虽然本文中水溶性部分没有显示直接的抑制白血病细胞增殖的活性，但文献研究发现栀子多糖具有比较广谱的体内抑瘤效应［11-12］，栀子中环烯醚萜有机酸酯类成分具有抗氧化和抗炎活性［12］，这些活性作用可能对急性淋巴细胞白血病的治疗也发挥一定的辅助作用。

【参考文献】
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　　［2］ 贾堃．中医癌瘤学［M］ ．西安：陕西科学技术出版社，1996：374.

　　［3］ 国家医药管理局中草药情报中心站．植物药有效成分手册［M］ ．北京：人民卫生出版社，1986：968.

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　　［5］ 斯建勇，陈迪华，潘瑞乐,等．白花蛇舌草的化学成分研究［J］ ．天然产物研究与开发,2006,18(6)：942.

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　　［8］ 苏保宁，贾忠建．利用波谱技术确定环烯醚甙的结构［J］．兰州大学学报：自然科学版,2000,36(1)：58.

　　［9］ 梁迎．高效液相色谱法测定栀子及其炮制品中熊果酸的含量［J］ ．广东药学,2003,13(3)：2

　　［10］ 孟延发，刘景会，李志孝,等．栀子多糖的分离纯化及其基本性质［J］ ．兰州大学学报:自然科学版,1993，29(2)：109.

　　［11］ 石若夫，李大力，田春宇,等．栀子多糖的抗肿瘤活性研究［J］ ．林产化学与工业,2002,22(4)：67.

　　［12］ 那莎，郭国田，王宗殿,等．栀子及其有效成分药理研究进展［J］ ．中国中医药信息杂志,2005,12(1)：90.

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