乳腺癌反义寡核苷酸治疗的研究进展

       2.3乙酰肝素酶（HPSE）
        乳腺癌的预后与侵袭和转移密切相关，细胞外基质（ECM）和基底膜（BM）在肿瘤的侵袭与转移过程中起屏障作用。HPSE是唯一的哺乳动物的糖苷内切酶，可降解ECM和BM中的HS，它的活动与肿瘤的转移、血管生成，及癌症病人术后的存活率密切相关。 Zhang L等证实人上皮生长因子受体2(HER2)/上皮生长因子受体（EFGR）表达的乳腺癌脑转移病人中，HPSE存在并表现出功能活性，与HER2状态相关联,并有潜力成为乳腺癌脑转移治疗干预的靶点。
        张友磊等设计合成HPSE ASODN，并用阳离子脂质体Lipofectin包埋后转染人乳腺癌MDA435细胞，并建立人乳腺癌裸小鼠皮下侵袭模型和急性血路转移模型检测HPSE mRNA表达和HPSE蛋白表达的变化，计数裸小鼠肺表面肿瘤转移结节数目。结果显示，HPSE ASODN通过下调HPSE mRNA和蛋白表达可显著抑制乳腺癌细胞的侵袭转移和血管生成。
        2.4端粒酶（telomerase）
        Muller和McClintock发现真核细胞线性染色体末端有一特殊结构，称为端粒，它是由简单重复富含G的DNA序列和端粒结合蛋白的组成的一种核蛋白复合物。端粒酶则是由RNA和蛋白质构成的一种核糖蛋白体，它是一种能以自身RNA为模板，反转录合成端粒DNA重复序列从而延长端粒末端的特异性逆转录酶。端粒酶复合体包括人端粒酶RNA(hTR)，人端粒酶逆转录酶（hTERT）等。它在超过90%的乳腺癌中表达，但在邻近的正常组织中不表达，这使得端粒酶成为治疗乳腺癌的新靶点。
        许多学者提出了以反义核苷酸封闭hTR,从而抑制端粒酶活性，达到抑制肿瘤的效果。如Natarajan S等发现在抑制端粒酶表达中，用hTR反义寡核苷酸要比针对hTERT mRNA更为有效。Li ZG等设计试验发现用2.0umol/l 的ASODN转染MCF-7细胞中端粒酶的活性以时间依赖方式显著减少，以致细胞凋亡。
        2.5 Ki-67
        Ki-67是一种核增殖标志基因，在核增殖细胞中表达，而不在休眠细胞中表达。因此它与肿瘤的发生于发展密切相关，具有抑制凋亡、促进肿瘤细胞增殖的作用。蔡会龙等检测了乳腺浸润性导管癌组织中Ki-67的表达，发现Ki-67蛋白与浸润性导管癌TNM分期密切相关。
        Kausch I等利用Ki-67 mRNA 合成的反义寡核苷酸抑制肿瘤细胞的增殖，发现对Ki-67蛋白表达的反义抑制可能是一个抗肿瘤治疗合理途径。汪蕊等构建Ki-67反义核酸载体，并研究阻断Ki-67基因的表达对MDA-MB-435s细胞生物学行为的抑制效应，发现转染Ki-67反义核酸载体组的MDA-MB-435s细胞Ki-67mRNA和蛋白表达明显低于对照组，且细胞增殖首抑制，体外侵袭能力也明显降低。
        2.6 HER-2
        HER-2是EGF受体家族的成员，定位于染色体17q12-21.32上，编码相对分子质量为185000的跨膜受体样蛋白。HER-2参与细胞生长增殖。在≥50岁的早期乳腺癌患者中，肿瘤分级和种类与HER-2表达密切相关。并且在15%—30%的乳腺癌病例中，HER-2过度表达，并与较差的预后和短存活时间相关。
        Sun JZ等针对HER-2 mRNA探究反义寡核苷酸对乳腺癌肿瘤生长的抑制作用。方法是将过度表达HER-2的乳腺癌细胞株SK-BR-3皮下注入BALB/c裸鼠中。使用HA6722反义寡核苷酸，时间和剂量为变化量，观察肿瘤抑制率。结果发现针对HER-2 mRNA的反义寡核苷酸以特异性序列和剂量依赖的方式对乳腺癌的生长进行抑制。
        ASODN作为一种新的分子生物学工具及基因治疗手段，在治疗乳腺癌的应用中受到越来越多的重视，但仍有许多问题需要解决，比如如何提高转染率，如何选择特异性靶点，如何提高ASODN与靶点的亲和力，如何防止细胞内酶对ASODN的降解等。但我们相信随着ASODN技术的发展，ASODN的应用必将成为临床治疗肿瘤的有效途径。
参 考 文 献
[1]张静，姜藻.反义寡核苷酸抑制Survivin表达来增强乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231对多西他赛敏感性的研究[N].东南大学学报（医学版），2009-2 28（1）.
[2]扈煜，黎莉等.Survivin反义寡核苷酸转染对人乳腺癌细胞系MCF-7生长及对长春瑞滨的增敏作用[N].山东大学学报（医学版），2009，Jan;47(1).