血清粘附分子在系统性红斑狼疮患者中的临床应用

             作者：李薇，谢闻悦，黄立丽，刘俊，张璇，杨永泉

【摘要】  目的  了解各指标与系统性红斑狼疮(SLE)疾病的相互关系。方法  对66例活动期SLE患者血清可溶性粘附分子1（sICAM-1）、sICAM-2、sICAM-3及血清抗核抗体(ANA)、补体C3、C4及红细胞沉降率（ESR）进行调查；对6例SLE患者，分别于临床活动期、恢复期、静止期三个不同阶段采集血标本进行各项指标动态观察，应用ELISA检测技术对各粘附因子、ANA进行调查；全自动双光径免疫浊度分析仪检测补体C3、C4；魏氏沉降法测定ESR。结果  66例SLE患者各项指标均明显高于正常对照，两者间表现出差异有非常显著性（P均<0.001）；动态观察结果表明，SLE患者随临床病情改善，各粘附因子及ESR、ANA水平，均呈逐渐下降的趋势，补体C3、C4逐渐上升。经相关性统计分析，只有sICAM-1与ANA、C4的水平变化分别表现出正相关与负相关（r＝0.997、r＝-0.993；P均<0.05）；结论  粘附分子可能参与SLE疾病过程。
   
    【关键词】  系统性红斑狼疮；可溶性粘附分子；抗核抗体；红细胞沉降率；补体
    
    
    【Abstract】  Objective  To detect the level of soluble intercellular adhesion molecules (sICAM)、ANA、ESR、C3、C4 on 61 systemic lupus erythematosus(SLE) patients. At the same time， dynamic results of these target were monitored on 6 SLE patients during the period of activation、restoration、inactivation .then analyse the relation between the targets and the disease.Methods   Use  ELISA  to  examine sICAM-1、sICAM-2、sICAM-3、ANA (anti nucleus antibody)，IMMAGE Immunochemistry System to check up C3、C4 ，Simultaneity measure ESR on 61 SLE patients and 21 normal cases.Results  All results between SLE and normal cases were showed significant difference (all P<0.001) ；The dynamic results showed the level of sICAM and ANA declined gradually with the improvement of clinic symptom .But only sICAM-1 level correlated well with ANA and C4 after statistical analysis (r=0.997、r=-0.993；P<0.05、P<0.05).Conclusion  sICAM measurement may serve as an additional serologic marker of disease activity in patients with SLE.
   
    【Key words】  systemic lupus erythematosus；soluble adhesion molecules ；antinucleus antibody；ESR；complement body
   
    血清可溶性粘附分子（sICAM）在系统性红斑狼疮患者（SLE）中作用的研究日益受重视，包括从粘附分子探讨SLE的发病机制，粘附分子与病情活动性的判断，抗粘附分子抗体用于SLE的等［1～3］。本文就我院2001～2002年收治的SLE患者血清可溶性粘附分子sICAM-1、sICAM-2、sICAM-3进行调查，与此同时检测抗核抗体(ANA)水平，血清补体C3、C4含量，红细胞沉降率（ESR）从中观察这些指标与疾病的相互关系，现将结果报告如下。
   
    1  资料与方法
   
    1.1  病例选择  本院2001～2002年收治的SLE患者66例，其中男16例，女50例，男女比例 1：3.2，年龄13～79岁，平均43.54±17.02岁。所有病例均在入院时，病情处于活动期，治疗前采集血标本，进行各种指标观察。另对6例SLE患者，其中男1例，女5例，年龄7～48岁，分别于临床活动期、恢复期、静止期不同阶段采集血标本做动态观察。所选病例诊断符合1997年美国风湿病学会（ACR）修订的SLE诊断标准。设门诊健康体检者12例为正常对照，其中男4例，女8例，年龄21～53岁，平均40.25±11.44岁。
   
    1.2  方法  应用ELISA技术对3种sICAM及ANA指标进行调查。sICAM检测严格按试剂盒（DIACLONE.FRANCE）说明书的操作步骤进行，酶标仪（DENLEY DRAGON WELLSCAN MK2）读取数据以试剂盒配给的标准物制定标准曲线求出各项数据，结果以ng/L表示；ANA检测选用美国Trinty Biotech 公司试剂，按试剂盒要求进行试验，样本（Sample）所测的OD值以“S”表示，试剂盒配给的临界值(Cut off值)以“Co”表示。检测结果以S>Co判为阳性，并求出S/Co值，以比值表示。应用全自动双光径免疫浊度分析仪（BECKMAN IMMAGE USA）检测血清补体C3、C4，结果以g/L表示。ESR检测采用魏氏沉降法结果以mm/h表示。
   
    1.3  统计学处理  所有数据经SPSS软件统计处理。各数据以x±s表示；SLE组各数据分别与正常对照比较并进行t检验；4例SLE动态观察各组数据，以3种sICAM分别与ANA、C3、C4、ESR进行两两比较相关分析，结果以r表示。
   
    2  结果
   
    2.1  66SLE患者血清粘附因子及ANA等项目检测结果  见表1。

表1  血清粘附因子及ANA等项目检测结果  （x±s）

注：SLE各数据与对照组比较，P均<0.001
   
    2.2  6例SLE动态观察sICAM-1、sICAM-2、sICAM-3水平分别与ANA、ESR、C3、C4水平进行两两相关性分析，结果只有sICAM-1与ANA、C4分别表现出正相关和负相关，其余结果无明显关联（均P>0.05），见表2、图1。

表2  6例SLE患者血清各项指标动态观察结果  （x±s）

注：与sICAM-1比较r=0.997，*P<0.05；与sICAM-1比较 r=-0.993，**P<0.05

图1  6例SLE患者血清sICAM-1与ANA、C4水平动态观察结果

    3  讨论
   
    SLE患者体内存在多种自身抗体，这些自身抗体与抗原结合形成免疫复合物沉积在关节、小血管或肾小球，激活补体引起机体免疫调节紊乱，从而表达出一系列炎症坏死复杂的临床症状。近年的研究认为多种粘附分子（adhesion molecule， AM）参与了T、B细胞间的活化及两者间的相互作用。有报道淋巴细胞功能相关抗原-1（lymphocyte function associated antigen-1，LFA-1）的3种可溶性配体sICAM-1、sICAM-2、 sICAM-3与 SLE疾病密切相关［1～3］。本文对66例临床处于活动期SLE患者血清3种sICAM及ESR、补体C3、C4多项指标观察结果表明，SLE患者各项指标与正常对照比较明显升高，统计处理表现出差异有非常显著性，而正常人体内粘附因子含量较少（表1）。6例动态观察结果表明，SLE患者随着临床病情由活动期-恢复期-静止期的改善，sICAM-1、sICAM-2、 sICAM-3及ANA、ESR水平逐渐下降，C3、C4逐渐上升，但经相关性统计分析只有sICAM-1分别与ANA、C4的水平变化表现一定的关联（图1），其他指标无统计学意义（表2）。由于ESR与补体C3、C4仍被认为是判断SLE疾病活动的实验室指标，ANA水平变化在某种程度上反映了临床病情，本文在动态观察中初步得到的结果提示，sICAM-1可能参与了SLE疾病过程。 SLE血清sICAM-1的水平报道结果不一［4～6］，其原因可能与检测所用试剂不同有关，本文调查的正常水平为5.73±3.28ng/L(表1)。Pino Otin等［7］在研究中发现SLE血清中sICAM-3升高，在活动期患者尤为显著，认为与T细胞活化有关。本文动态观察中发现SLE患者在疾病活动期3种sICAM均异常增高，当病情恢复至静止期仍然显著的高于正常对照并持续于整个疾病（表2），SLE患者这种血清表达多种可溶性粘附分子的异常，可能与其疾病过程中T、Ｂ细胞活化、免疫复合物产生、补体活化与消耗以及某些细胞因子的异常有一定的关联［8］，sICAM-1与细胞膜ICAM-ｌ是同型蛋白分子，以可溶性状态存在于血循环中，其主要生物学作用是与ICAM-1竞争性结合白细胞表面相应配体，在炎症细胞浸润和免疫反应中发挥作用［2，3］，一些可溶性粘附分子在血清中的浓度可能反映SLE病情的变化。本文调查初步观察到一些现象，而这些现象的发生及粘附分子在SLE疾病中的致病机制还有待更进一步研究。

【文献】

    1  凌燕，孙凌云.粘附因子在系统性红斑狼疮发病机制中的作用.中华风湿病学杂志，2000，3：186-188.    
    2  周同，江永娣，姚建，等.系统性红斑狼疮患者淋巴细胞粘附分子表达的观察.中华内科杂志，1995，34：545-547.    
    3  Sari RA，Taysi S， Erdem F， et al. Correlation of serum levels of soluble intercellular adhesion molecule-1 with disease activity in systemic lupus erythematosus. Rheumatol，2002，4：149-52.    
    4  张开明，郭志孝，尹兴平，等.SLE患者血清sICAM-1测定及皮损sICAM-1表达的研究.中华风湿病学杂志，1999，3：47-48.    
    5  Mrowka C， Slieberth HG .Detection of circulating adhesion molecules ICAM-1， VCAM-1 and  E-selection in Wegener′s granulomatosis， systemic lupus erythematosus and chronic renal failure.Clin Nephrol，1995，43：288-296.    
    6  Spronk PE， Bootsma H， Huitema MG， et al. Levels soluble VCAM-1， soluble ICAM-1， and soluble E-selection during disease exacerbation in patients with systemic lupus erythematosus(SLE)： a long term prospective study.  Clin Exp Immunol， 1994，97：439-444.    
    7  Pino Otin MR， Vinas O ， de la Fuente MA. et al . Exstence of a soluble form of CD 50(intercellular adhesion moleculer-3) produced upon human lymphocyte activation： present in normal human serum and levels are increased in the serum of systemic lupus erythematosus patients. J Immuno， 1995， 154：3015-3024.    
    8  张乃峥.临床风湿病学.上海：上海科技出版社，1999，11.