喉癌患者血清可溶性白细胞介素
作者：姚俊，陈仁辉，王军，崔德威
【关键词】 喉癌
摘 要：目的：研究血清可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）和一氧化氮（NO）水平在喉癌患者中的检测和临床意义。方法：应用单克隆、多克隆双抗体夹心ELISA及硝酸还原酶法检测sIL-R和NO水平。40例喉癌患者为观察组，同期住院的29例声带息肉患者作为良性对照组，30名健康志愿者作为健康对照组。结果：喉癌患者sIL-R水平较良性对照组或健康对照组显著升高（P<0.001），与喉癌淋巴结转移、临床分型亦密切相关；喉癌患者NO水平显著高于良性对照组或健康对照组（P<0.01）。结论：血清sIL-R 水平检测可做为喉癌诊断的一项辅助指标，并有助于了解喉癌的大小，病程及淋巴结转移情况等；NO可能在分子水平上参与了喉癌的发生发展，其检测可作为喉癌患者病情演变的监测指标。
关键词：喉癌； 血清可溶性白细胞介素-受体；一氧化氮
The Detection and Significance of sIL-R and NO in Serum
of Patients with Laryngeal Cancer
Abstract: Objective： To research the detection and clinical significance of sIL-R and NO in serum of patients with laryngeal cancer. Method： Detected the level of sIL-R and NO in serum through monoclonal and polyclonal diploantibody enzyme-linked immunoadsordent assay and nitrate reductase methods. There were 40 patients with laryngeal cancer in observing group， and 29 cases of vocal polyp of the same hospital in benign constracting group. 30 cases healthy volunteer were treated as healthy constracting group. Result： The level of sIL-R in patients with laryngeal cancer was significantly higher than benign contrasting group or healthy volunteer group (P<0.001)， and it was closely related to the condition of lymphonodus metastasis and clinical typing. The level of NO in observing group was significantly higher than benign contrasting group or healthy volunteer group (P<0.01).Conclusion： The detection of sIL-R in serum can be applied as an assist marker of diagnosing laryngeal cancer. It will be useful to know the size ， course and the condition of lymphonodus metastasis of the cancer . NO may be take part in the genesis and development of laryngeal cancer from molecule level and its detection is a useful parameter to estimate the development of laryngeal of cancer .
Key words: Laryngeal cancer； sIL-R； NO
可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）现今已被作为某些恶性肿瘤的诊断、预后与指导的一项重要指标，而一氧化氮（NO）是一种新型的生物细胞信使分子和效应分子，对肿瘤的增长、转移有一定的作用及影响［1］。但目前有关可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）和一氧化氮（NO）水平在喉癌中变化情况的报道极少，本研究通过对喉癌患者进行二者的检测，并与良性和健康组对照，探讨二者与喉癌的关系及临床意义，并进一步提出临床治疗的检测指标。
1 资料与方法
1.1 资料的来源与分组。病例选自2003年1月至2004年12月，经病理检查证实并在广东医学院附属治疗的喉癌患者40例，为观察组，平均年龄（59.23±12.37）岁，其中Ⅰ期5例、Ⅱ期11例、Ⅲ期18例、Ⅳ期6例；另选择同期住院的声带息肉患者29例作为良性对照组，男性21例，女性8例，平均年龄（41.39±14.28）岁；正常献血员30例作为健康对照组，其中男性18例，女性12例，平均年龄(39.85±13.51)岁。
1.2 标本的收集与测定
1.2.1 标本的收集：采静脉血2～3ml，室温下静置2h，经2000r/s离心15min后分离血清， 将标本均于-20℃以下冰柜保存备测。观察组患者在行治疗前1d清晨取血。
1.2.2 可溶性白细胞介素-2受体和一氧化氮的检测：IL-R采用ELISA间接法检测，按试剂盒说明书进行。IL-R检测试剂盒来源于本校免疫教研室。用标准A(OD)值减去空白对照A值绘制标准曲线，在曲线上检得样品sIL-R含量，结果以U/ml表示。NO的测定采用硝酸还原酶法，即用硝酸还原酶特异地将NO3-还原为NO2-，通过检测血清NO3-和NO2-之和反应体内一氧化氮水平［2］，使用波长540nm比色测定，分别读取测定管和标准管的消光值A，按下式：测定管A÷标准管A×100=标本NO含量(μmol/L)，一氧化氮试剂盒(酶法)由南京提供，采用上海分析仪器厂752型分光光度计进行比色法测定。
1.3 治疗方法：观察组患者的治疗依据病情的不同分别采用部分喉切除术、全喉切除术、全喉切除术加单侧颈廓清术及全喉切除术加部分甲状腺切除术，并结合放射治疗，本组患者治疗后均采用信访及定期门诊复查两种形式长期随访。
1.4 统计学处理：采用SAS9.0进行统计学分析，资料中数据均以均数±标准差(±s )表示，进行成组设计的t检验。
2 结 果
2.1 血清可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）水平的比较：观察组sIL-R水平高于良性对照组和健康对照组，有显著性差异（P<0.001）。观察组Ⅳ期患者 sIL-R水平高于Ⅰ期患者，差异有统计学意义（P<0.001）；Ⅱ、Ⅲ期患者sIL-R水平高于Ⅰ期患者，差异有统计学意义（P<0.01）；Ⅳ期患者sIL-R水平与Ⅱ、Ⅲ期患者相比，差异无统计学意义（P>0.05）（见表1）。表1 各组血清sIL-R水平的比较（略）
2.2 血清可溶性白细胞介素-受体（sIL-R）水平与子宫颈癌的淋巴结转移、分化程度的关系：伴有淋巴结转移的患者的血清sIL-R水平高于未发生转移的患者，差异有统计学意义（t=2.75，P<0.01）；Ⅳ期和Ⅱ、Ⅲ期 sIL-R水平均高于I期，差异有统计学意义（t=6.72，P<0.001；t=3.21，P<0.01）。
2.3 血清一氧化氮（NO）水平的比较：喉癌患者血清NO水平明显高于良性对照组和健康对照组，差异有统计学意义（P<0.01）；喉癌I期患者，NO含量为85.93±14.21μmol/L;Ⅱ、Ⅲ期为99.52±15.76μmol/L; Ⅳ期为108.39±16.71μmol/L。分化程度越低，NO含量越高，差异有显著性(P <0.05)。（见表2）。表2 各组血清NO水平的比较（略）
3 讨 论
sIL-R是由多种细胞诸如成熟的活化性T细胞、B淋巴母细胞、未成熟的骨髓前体细胞和胚胎胸腺细胞产生的一种复合糖蛋白，主要由成熟的活化性T细胞产生， 作为一种低亲和力受体与细胞膜上白细胞介素-受体竞争结合IL-，作用类似封闭因子，其通过中和活化T细胞周围的IL-和抑制已活化的T细胞的克隆性扩增，从而抑制机体的免疫反应［3］，与某些疾病的变化密切相关。因此，血清中sIL-R水平的检测可间接地反映机体的细胞免疫功能状态，目前已成为肿瘤免疫的监测指标。
我们的研究结果表明子喉癌病人血清sIL-R水平异常增高，观察组sIL-R水平与正常对照组及良性对照组相比均显著升高，并且喉癌患者中，低分化和中分化者sIL-R水平显著高于高分化者，已发生淋巴道转移的患者sIL-R水平高于未发生转移者。这说明sIL-R水平可做为喉癌的辅助性诊断指标，对于区分喉部良性疾病与喉癌，以及判断喉癌的大小，病程及淋巴结转移情况等有价值。
一氧化氮(NO)是一种新型的生物细胞信使分子和效应分子，由一氧化氮合酶催化L-Arg和分子氧反应生成。浓度较高的NO可通过抑制细胞DNA复制降低呼吸链中关键酶的活性，生成具有强氧化性的羟自由基等途径［4］而发挥细胞毒作用，并参与体内一系列生理和病理条件下的生物过程，调节循环、神经、免疫等系统生理功能，同时也能参与包括肿瘤在内的病理过程，对肿瘤细胞的增殖、转移有一定影响。
本研究结果显示，喉癌病人血清NO水平异常增高，观察组NO水平明显高于正常对照组和良性对照组，并且喉癌患者中，低分化和中分化者NO水平显著高于高分化者，分化程度越低，NO水平越高。这可能是癌细胞可直接或间接通过白细胞介素、肿瘤坏死因子等间接激活巨噬细胞等多种细胞，促进NO合成，造成体内NO水平升高。结果提示NO 可能参与喉癌患者的肿瘤免疫，在喉癌的发生发展中起重要作用。其含量的测定能反映喉癌的病理分化程度，可作为监测喉癌患者病情演化的一项重要指标。
参考：
［1］杜晓东，栾信庸，舒畅. 一氧化氮在耳鼻咽喉科肿瘤的研究进展［J］.临床耳鼻咽喉科杂志,2002,16(6):573-575.
［2］Nathan C. Nitric oxide as secretory product of mammalian cell ［J］. FASEBJ, 1992,6(12):3051-3064.
［3］Lissanip B, Barnis G, Rovekki F, et al.The biological significance of solube interleukin- receptors in solid tumors［J］. Eur Cancer,1990,26(1):33-36．
［4］孙德义，李学佩，孙晓东，等.一氧化氮合酶(NOS)在喉鳞癌中的表达及意义［J］.耳鼻咽喉-头颈外科，2000,7(3):167-170.
