GST-π基因与胃癌病理类型及TNM分期的关系

【关键词】  胃癌；胎盘型谷胱甘肽S-转移酶；免疫组织化学；病理类型

　　［摘要］  目的  探讨GST-π基因表达与胃癌病理类型及TNM分期之间的相关性及在胃癌早期诊断中的作用。方法  采用免疫组化SP法，检测265例胃癌石蜡包埋的肿瘤蜡块中GST-π基因表达情况。结果  正常胃黏膜中两种基因均无表达。GST-π基因表达阳性率为65.3%(173/265),与肿瘤病分型差异有显著性(P<0.05)，与TNM分期间差异无显著性(P>0.05)。结论  GST-π的阳性率为65.3%，在高分化胃癌组织中表达阳性率高于低分化癌、印戒细胞癌及黏液细胞癌，提示应注意临床化疗药物的敏感性，提高效果。

　　［关键词］  胃癌；胎盘型谷胱甘肽S-转移酶；免疫组织化学；病理类型
   
　　胃癌是在世界范围高发的肿瘤之一,相关研究一致认为胃癌的形成过程是一个多基因异常和改变积累的过程，胃癌发生及分子改变情况具有区域性，不同地区及不同个体有其独特性［1］。我们用免疫组化染色方法对GST-π基因在胃癌患者中的表达情况进行分析及研究,报告如下。

　　1  材料与方法

　　1.1  材料  病理组织材料来自本院病理科从2002年4月～2005年5月外科手术切除的有完整病历的胃癌标本265例，另取20例正常胃黏膜作为对照。其中男205例，女60例，男：女为3.4∶1，年龄范围为30～83岁，平均59岁。标本经10％福尔马林液固定，石蜡包埋，做4～6μm厚连续切片，每例分别做HE染色和免疫组织化学染色。标本按全国胃癌协作组统一标准进行病理检查，我们对265例胃癌患者进行如下归类：(1)按组织学类型分为高分化腺癌，低分化腺癌，印戒细胞癌，黏液细胞癌；(2)按胃癌TNM分期法:T1(肿瘤浸润至黏膜或黏膜下层),T2(肿瘤浸润肌层或浆膜下层),T3(肿瘤穿透浆膜而未侵及邻近结构),T4(肿瘤侵入邻近结构)。

　　1.2  试剂及方法  免疫组化染色采用SP法，GST-π鼠抗人单克隆抗体及SP试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司，步骤严格按试剂说明书操作，以DAB显色，苏木素复染，福州迈新生物技术有限公司提供的阳性玻片作阳性对照，以PBS替代一抗作阴性对照。

　　1.3  统计学方法  数据运用SPSS 10.0软件包进行卡方检验。

　　1.4  结果判定标准  GST-π基因产物主要表达在细胞核，以细胞核被染成黄色、棕黄色或棕色者为阳性细胞，阳性细胞数超过5％者即判为阳性。并依细胞膜、胞浆或细胞核内出现染色的阳性细胞进行计数，阳性细胞>5％为阳性；阳性切片中若阳性细胞比例<25％为(+)，25％～50％为(++)，>50％为(+++)。

　　2  结果

　　2.1  基因GST-π蛋白表达  265例胃癌中GST-π基因产物主要表达在细胞核，细胞核被染成黄色、棕黄色或棕色者，在265例肿瘤组织中蛋白表达比例为65.3％(173／265)，正常组织无相应基因产物表达。

　　2.2  GST-π表达与病理类型及TNM分期的关系  基因GST-π在胃癌中表达与肿瘤的病理类型差异有显著性(P<0.05),在高分化肿瘤中表达阳性率显著高于低分化肿瘤。TNM分期与基因表达间差异无显著性(P>0.05)。见表1，表2。

　　表1  GST-π表达与病理类型的关系（略）

　　注：P=0.14，P<0.05

　　表2  GST-π表达与TNM分期的关系（略）

　　注：P=0.606，P>0.05

　　3  讨论

　　谷胱甘肽S一转移酶(GST)是一组有着多种同工酶形式的蛋白超基因家族，不同的同工酶位于不同的染色体位置，它们可受外界物质诱导表达及体内控制元件影响。其中从人胎盘中分离的一种酸性GST，即胎盘型GST(GST-π)与肿瘤的关系更为密切。GST-π位于人第11号染色体上，长度约3kb，有7个外显子，其主要分布于胎盘、肺、肾和红细胞中，与组织的分化有关。GST-π能催化机体内有害物质与谷胱甘肽相结合，增强体内各种有毒物质、致癌剂的极性使它们更易排出体外，从而起到解毒的作用。研究证明，GST-π在许多人体恶性肿瘤中有高表达并与肿瘤的化疗药物耐受性相关［2］。研究发现在胃癌等多种恶性肿瘤中有表达［3］显著高于正常组织。本次研究发现GST-π的阳性率为65.3%，在高分化胃癌组织中表达阳性率高于低分化、印戒细胞癌及黏液细胞癌，它们之间差异有显著性(P<0.05),这与王旭光等［4］的研究发现相同。GST-π高表达在高分化肿瘤则提示应注意临床化疗药物的敏感性，提高效果。而与胃癌TNM分期差异有显著性(P>0.05)，说明对早期胃癌诊断的意义有限。

　　［］

　　1  Gurel S,Dolar E.The relationship between c-erbB-2 oncogene expression and clinicopathological factors in gastric cancer. J Int Med Res，1999，27(2):74-78.

　　2  Kang MS,Kim HS.Characteristics of human gastric carcinoma cell lines with induced multidrug resistance. Anticancer Res, 1997，17(5A):3531-3536.

　　3  Strange RC, Spiteri MA.Glutathione-S-transferase family of enzymes.Mutat Res，2001，482(1-2):21-26.

　　4  王旭光，王兰，袁媛.胃粘膜肠上皮化生CST-π的表达及其与H.pylori相关性研究. 消化及介入诊疗杂志，2002，7(3)：