莪术醇生物构建自体瘤苗治疗晚期胃癌患者近期疗效研究
【摘要】 目的：探讨自体瘤苗胃腺癌对患者免疫功能的影响及临床效应。方法：9例瘤苗组实体瘤术后患者应用自体瘤苗，并与对照组8例进行比较，对其疗效进行判断评价，检测治疗前后其NKC活性及CD+3、CD+4、CD+8水平。结果:实验组使用自体瘤苗治疗后,其NKC细胞的活性及CD+3、CD+4水平明显高于对照组及自身治疗前，其CD+8水平低于其他组；近期随诊其生存质量及疗效也明显优于治疗前及对照组。结论：莪术醇生物构建的自体瘤苗能增强胃癌患者的治疗效果，明显提高自身细胞免疫功能，副反应较小，是一种安全、有效、实用的辅助治疗方法。
【关键词】 莪术醇生物构建自体瘤苗 胃肿瘤 免疫功能
Recent Research on Therapeuctic Effects of Autologous Tumor Vaccine of Curcumenal Biological
Structure in Trentment of Patients with Late Carcinoma Ventriculi
GAO Peng1,XU Li?chun，CHEN Ping,LIU Xiao?dan，NI Qing，FANG Xiao?hua,WANG Jia?xing,ZHOU Juan，LIU Li?juan,XU Xiang?yu
1.Yangzhou Chinese Medicine Hosptial,Yangzhou 225002,China;
2.Yangzhou University Cooperation of Chinese and Western Medicine Research Institute,Yangzhou 225000,China;
3.Northern Jiangsu People's Hospital,Yangzhou 225000,China;
4.Yangzhou First People's Hopsital,Yangzhou 225000,China;
5.Nanjing Military Area Command Militarg Medicine Research Institute,Nanjing 210 000,China
［Abstract］Objective:It is probed that the vaiue of autologous tumor vaccine therapy for malignant solid tumours and observe the effect of autoturuour Vaccine replatation on the immunological function of these tumour of stomach patienfs.Methods:9 cases with tumor were treated with Autologous tumor vaccine by modified curcumol.And Another 8 cases were treated by surgery which served as control group.The TLc substes CD+3、CD+4、CD+8 and the active NK cell were tested before and after operation.Results:They were significantly different before and after treatment with autologous tumor vaccine.The ratio of the NKcell activity,CD+3 and CD+4 and subpopulations of the T-lymphocyte,ratio and life quality rose significantly after the treatment(P＜0.05).Conclusions:Vaccine by modified curcummenal therapy can restore cellular immunity so as to enhance the therapeutic efficacy,the clinical symptoms and sighs was significantly improved.
［Key words］Autologous tumor cell vacine by modified cucurma;Tumour of stomach;lmmunity function
肿瘤是严重威胁人类健康的一类疾病，在我国，胃癌的发病率和死亡率仍居恶性肿瘤之首，由于起病隐匿，平时症状不典型。部分III期患者虽然可以进行手术切除，但短期内复发率很高。临床确诊时已处于Ⅳ期的病人约占全部胃癌患者的10％-20％，由此失去了手术机会，化疗是其主要治疗手段，但晚期胃癌对化疗不甚敏感，疗效不太理想［1-3］。中药是祖国的瑰宝，如何将这一瑰宝与医学研究相结合，实行中西医结合治疗肿瘤，此是我们要努力探讨的问题。近年来肿瘤疫苗的研制已成为肿瘤防治领域的热点，采用自体瘤苗回植的特异性主动免疫疗法，提高机体的抗病能力，阻止肿瘤生长、扩散和复发是日前正在积极探索的生物反应调节剂疗法(biologicalresponse modifier therapy,BRMT)的重要内容之一。如何利用传统中药，将传统中药的主要抗癌成分进行提纯，利用其抗癌、免疫原性强特点，对肿瘤细胞进行生物修饰构建，从而增加肿瘤细胞疫苗的抗原性，提高临床治疗效果，是广大肿瘤研究学者关注的课题之一。最近有研究报道，从中药莪术中提取的有效成分莪术醇有较好的免疫原性，用其修饰的肿瘤细胞疫苗有较好的实验治疗效果［4-5］。为探讨自体瘤苗对晚期患者免疫功能的影响、临床应用及疗效评价，我们在原有的研究基础上用莪术醇生物修饰构建人胃腺癌细胞，制成肿瘤疫苗，对9例晚期胃肿瘤患者进行自体特异性主动免疫治疗，现报道如下。
1 一般资料
全组17例,实验组9例，男6例，女3例，年龄(51.48±5.46)岁；对照组8例，男5例，女3例,年龄(52.1±5.39)岁，以上均经病理或细胞学检查确诊为胃腺癌，临床分期均为Ⅲa。
2 实验方法
2.1 瘤苗制备
肿瘤切除后立即取无菌肿瘤组织5-10g左右，置无菌玻璃平板内，0-4℃保存，待制备。以机械方法或酶消化法分散肿瘤组织获取单个瘤细胞，台盼蓝染色判定癌细胞活力。按我们创建的方法用适当浓度的莪术醇(5-10μg/ml)对自体肿瘤细胞进行系列生物修饰构建，制成新型瘤苗，通过系统检定符合标准后置4℃冰箱备用,具体生物修饰构建的材料及方法请参见［6］。
2.2 应用
患者胃肿瘤被切除后1周进行免疫调动(环磷酰胺400mg加入5%葡萄糖500ml内，静脉滴注)，1周后再进行瘤苗免疫接种，免疫接种按设计的三点法进行上臂皮内及皮下注射瘤苗0.5ml/次，其中皮下2点，每点0.2m1/次，于前臂内侧，每点间距＞5cm，双臂交替，每周1次，共4次，内含生物修饰构建的瘤苗细胞(1-2)×107，同时进行对症治疗加常规辅助化疗。对照组患者进行对症治疗加常规辅助化疗。
2.3 观察指标
检测各组治疗前后外周血CD+3、CD+4、CD+8水平以及NKC活性；观察病人全身及注射局部反应情况；记录患者生活质量及治疗效应。
2.4 治疗方法
实验组除采用手术治疗及对症治疗加常规化疗外，采用莪术醇生物构建瘤苗治疗。对照组采用手术治疗及对症治疗加常规化疗，2组均为胃腺癌Ⅲa期，无心、肺、肝、肾严重疾病。
3 实验结果
3.1 莪术醇生物构建瘤苗实验组胃癌患者治疗前后免疫功能结果分析 见表1。表1 实验组生物治疗前后免疫功能的变化(略)
3.2 对照组胃癌患者对症治疗加常规化疗治疗前后免疫功能结果分析
见表2。表2 对照组对症治疗加常规化疗前后免疫功能的变化(略)
3.3 实验组、对照组苗治疗胃癌患者前后免疫功能结果分析 见图1。
3.4 莪术醇生物构建瘤苗胃癌患者实验组、对照组生存质量比较 见图2、表3。表3 实验组、对照组生存质量的变化（略）
3.6 莪术醇构建的自体瘤苗组注射局部反应及全身反应
注射后48-72h无严重过敏反应发生；局部皮肤反应明显，皮下注射的皮丘直径在0.1-1cm之间皮肤发红，部分有硬结，见表4。表4 莪术醇瘤苗注射局部反应(略)
4 讨论
胃癌的治疗一直是消化道肿瘤治疗领域的一个棘手问题，主要由于诊断明确时往往肿瘤已经扩散，手术不能彻底清除癌灶，同时肿瘤患者往往有不同程度的免疫机能受损，更容易造成肿瘤的复发与转移。近年来，生物反应调节疗法(BRMT)在提高机体的免疫力，阻止肿瘤的生长、扩散和复发方面的作用己被国内外众多的学者所重视。实验研究表明，机体的免疫系统在肿瘤的发生、中起着重要的作用，肿瘤疫苗皮内注射这一主动免疫疗法，是将患者被异构化的肿瘤细胞作为疫苗，以激发患者机体的特异性免疫，达到预防肿瘤复发的目的。利用中药有效单体生物修饰构建的肿瘤细胞疫苗的优势在于有更强的抗原性和多价性，能引起机体的免疫应答，加强肿瘤抗原的免疫原性，有助于机体免疫系统有效的识别抗原;同时保持抗原性的形式能激发机体产生特异性主动免疫效应，增强对肿瘤细胞的免疫监视功能［7-11］。
实验研究表明，莪术醇是中药莪术的有效单体，应用莪术醇系列生物处理的肿瘤细胞，能有效地诱导胃肿瘤宿主的抗瘤免疫反应，且对机体无害。使用莪术醇系列生物构建的自体瘤苗治疗后CD+3、CD+4、CD+8细胞的百分率及NKC活性与自身治疗前比较有明显改善(P＜0.05)，与对照组常规治疗前后比较有显著差异(P＜0.05)，此表明莪术醇系列生物构建的自体瘤苗治疗后，能增强肿瘤抗原的免疫原性，提高细胞抗瘤免疫功能，从而诱发和促进机体对肿瘤的排异反应。
研究结果揭示，胃肿瘤患者机体内辅助性T细胞(TH)减少，而抑制性T细胞(TS)增多，机体免疫失衡，功能降低，表现为病情的进一步恶化。经自体瘤苗治疗后，TH细胞增加，TS降低，机体免疫趋于平衡，患者病情好转。在临床近期观察中，我们对2组病人进行随诊观察，近期结果显示瘤苗组肿瘤转移复发数为2例，复发率为22.22%；而对照组近期肿瘤转移复发数为4例，复发率为50%。从病例数及转移复发率上初步分析，瘤苗组明显优于对照组。在生活质量方面实验组明显优于对照组。
研究结果显示，所研究病例均出现程度不同的局部皮肤反应，有报道认为注射局部的反应大小与生存期呈正相关，本组远期疗效有待于进一步探索。本研究使用自体瘤苗均未发现副反应。结果表明，莪术醇系列生物构建的自体瘤苗可以有效地帮助胃肿瘤患者重建受损的T细胞,恢复其细胞免疫功能，从而达到消灭微小转移灶及隐匿灶，防止或延缓肿瘤的复发和转移［12-14］。该疗法无不良反应，治疗简便，随着对其研究的深入,必将成为肿瘤综合治疗的有效方法之一在临床推广应用。
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