麻黄桃仁颗粒对自身免疫性甲状腺炎小鼠血清性激素的影响

              作者：高国宇 吴拥军　王晓红

【摘要】  目的 观察雌二醇、睾酮对自身免疫性甲状腺炎（AIT）的影响和麻黄桃仁颗粒对雌二醇、睾酮水平的干扰。 方法 在建立小鼠自身免疫性甲状腺炎（EAT）的基础上，将麻黄桃仁颗粒分为高、中、低剂量组，并设立模型组、对照组和正常组等，经后采用双抗体放射免疫法测定各组雌二醇、睾酮水平并进行比较。 结果 模型组小鼠血清雌二醇水平高于正常组，而睾酮水平低于正常组，与正常组比较差异有统计学意义（均P<0.01）。麻黄桃仁颗粒高、中剂量组小鼠血清雌二醇水平低于模型组，与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）。麻黄桃仁颗粒3个剂量血清睾酮水平与模型组相比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 雌二醇、睾酮对AIT有一定作用，而麻黄桃仁颗粒具有一定的降低EAT小鼠血清雌二醇水平作用。

【关键词】  甲状腺炎，自身免疫性;小鼠;麻黄桃仁颗粒;雌二醇;睾酮

　　Investigation of Mahuangtaoren Powder on serum sex hormone in mice with autoimmune thyroiditis   
　　【Abstract】 Objective To investigate the effect of on serum sex hormone in mice with autoimmune thyroiditis.Methods After mice models of EAT105were established，mice models of EATwere divided into Mahuangtaoren Powder of high-dose group，middle-dose group and low-dose group.And model group，control group and normal group were de-veloped.After treatment destradiol and testosterone in serum of mice were measured by double antibody Radioimmunoassay.Results Destradiol in model group was higher than that in normal group（P<0.01），testosterone in model group was lower than that in normal group（P<0.01）.Destradiol in Mahuangtaoren Powder of high-dose group，middle-dose group and low-dose group were lower than that in model group（P<0.05）.There were no significant differences between Mahuangtaoren Powder of high-dose group，middle-dose group and low-dose group and model group in testosterone.Conclusion Destradiol and testosterone has an effect on AIT，Mahuangtaoren Powder can decrease destradiol in serum of mice with EAT.
   
　　【Key words】 Thyroiditis;Autoimmunity;Mice;Mahuangtaoren Powder;Destradiol;Testosterone
    
　　自身免疫性甲状腺炎（autoimmune thyroiditis，AIT）是临床上一种常见的器官特异性自身免疫性疾病，其甲状腺主要表现为慢性淋巴细胞浸润性炎症。有报道女性发生自身免疫性甲状腺疾病（autoimmune thyr oidi disease，AITD）的危险性是男性的5～10倍［1］ （各报道不尽一致）。黄继胜等［2］ 追踪调查了桥本甲状腺炎（hashimoto's thyroiditis，HT）3个家族，共计67人，确诊患者21人，认为家族性桥本病（familial hashimoto's thyroiditis，FHD）属于常染色体显性遗传的一种特殊类型———从性遗传。女性激素对自身免疫性疾病的发病可能具有重要的影响和作用。本实验在建立实验性小鼠自身免疫性甲状腺炎（experimental autoim-mure thyro iditis EAT）的基础上，观察了雌二醇、睾酮对AIT的影响和麻黄桃仁颗粒对雌二醇、睾酮水平的干扰。

　　1 资料与方法
    
　　1.1 试剂 雌二醇、睾酮测定试剂盒（北京原子能研究所），甲状腺激素及抗体各试剂盒（原子能研究院），RPMI1640培养基（Gibco公司），甲状腺球蛋白（Por-cine Thyroglobulin，PTg），ConA（Sigma公司），盐酸泼尼松片（南京第二制药厂），牛血清白蛋白（上海中科院生物化学所），其他国产分析纯试剂。
   
　　1.2 动物 ICR小鼠，雌性，体质量18～22g，由南京中医药大学实验动物中心提供。实验动物质量合格证:SCXK（苏）2002-0012;实验动物使用许可证:SCXK（苏）2002-0053。
   
　　1.3 实验性小鼠EAT模型的建立 参见［3～6］。取甲状腺球蛋白（PTg）与福氏完全佐剂充分混合，在小鼠中足跖皮下、背部皮下、腹部皮下、颈部皮下等部位多点皮下注射，每周1次，连续3周。3周后处死小鼠取脾脏制备脾淋巴细胞悬液。免疫小鼠脾淋巴细胞2×10 7 悬液尾静脉注射给正常小鼠，每只0.2mL。动物每日喂饮0.05%碘化钠水，14日后分组实验。
   
　　1.4 动物分组及给药 造模动物随机分为5组:①麻黄桃仁颗粒（MT）高剂量组:给予麻黄桃仁颗粒9.0g生药.kg体质量;②MT中剂量组:给予麻黄桃仁颗粒4.5g生药.kg体质量;③MT低剂量组:给予麻黄桃仁颗粒2.25g生药.kg体质量;④模型组:给予等容量蒸馏水;⑤泼尼松组:给予泼尼松片9mg.kg体质量。所有模型组（EAT）小鼠从第1周开始予以0.05%碘化钠水饮用。⑥正常组，正常小鼠，给予等容量蒸馏水，从第1周开始标准饲料喂养，自由饮水。共6组。各组均灌胃给药，给药体积为15mL.kg体质量，每日给药1次，连续给药26日后处死小鼠，眼眶采血，每次约1.0～1.5mL，测定血清雌二醇、睾酮。
   
　　1.5 实验方法 EAT小鼠血清雌二醇、睾酮测定采用双抗体放射免疫法。
   
　　1.6 统计学方法 计量资料数据采用均数±标准差（ˉx±s）表示，各组之间采用单因素方差分析，统计软件为SPSS10.0，检验水准α=0.05。

　　2 结果
    
　　麻黄桃仁颗粒对EAT小鼠血清性激素的影响 见表1。
    
　　表1 麻黄桃仁颗粒对EAT小鼠血清性激素的影响（略）

　　与正常组比较，△△P<0.01;与模型组比较，*P<0.05
    
　　由表1可见，模型组小鼠血清雌二醇水平高于正常组，而睾酮水平低于正常组，与正常组比较差异有统计学意义（均P<0.01）。麻黄桃仁颗粒高、中剂量组小鼠血清雌二醇水平低于模型组，与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）。麻黄桃仁颗粒3个剂量组血清睾酮水平与模型组比较差异无统计学意义（P>0.05）。表明麻黄桃仁颗粒具有一定的降低EAT小鼠血清雌二醇水平作用。

　　3 讨论
    
　　女性对于感染性疾病和肿瘤有较强的耐受性或抵抗性，同时由于女性具有这种较高的免疫应答状态，也决定了女性自身免疫性疾病的易感性［7］ 。特别是育龄期女性，比男性有更高的易感性，存在明显的性别差异。对AIT来 说，雌激素或孕激素可以加剧甲状腺炎的程度，睾酮则可以减弱，甚至逆转这种刺激作用［1］ 。实验研究也证实，雌激素水平低下可减少或缓解实验性EAT的发病率和甲状腺的炎症反应，而雄激素则对B细胞增殖和分化起抑制作用，可下调炎症抑制性细胞因子白细胞介素-10（IL-10），而促进促炎症细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）的分泌，可促进病理性一氧化氮（NO）的表达，影响T细胞的发育，导致胸腺萎缩，因而引起一系列的免疫学指标改变［10］ 。而越来越多的人赞成男性体内高水平雄激素的保护作用产生了这种性别差异。在人类，雄激素低下的男性各种自身免疫性疾病的患病率明显高于正常男性［11］。
   
　　本实验中模型组小鼠血清雌二醇水平高于正常组，而睾酮水平低于正常组，与正常组比较差异有统计学意义（P<0.01）。说明性激素对AIT有一定作用，但具体作用机理还有待进一步探讨。
   
　　本实验结果中麻黄桃仁颗粒高、中剂量组小鼠血清雌二醇水平低于模型组，与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）。麻黄桃仁颗粒3个剂量血清睾酮水平与模型组相比差异无统计学意义（P>0.05）。这表明麻黄桃仁颗粒具有一定的降低EAT小鼠血清雌二醇水平作用;而麻黄桃仁颗粒对于EAT小鼠血清睾酮水平无作用。这可能与麻黄有肾上腺素样作用有关。麻黄碱能兴奋大脑皮质和皮质下中枢，引起精神兴奋，亦能兴奋中脑、延脑呼吸中枢和血管运动中枢，兴奋肾上腺素能神经而使心跳加快，心肌收缩力加强，心输出量增加，血管收缩［12］ 。
   
　　由此我们可以认为，抑制雌激素或提高雄激素水平的药物可能会减轻甲状腺炎的程度。在中医药AITD的研究中，关于与性激素之间关系的报道较为少见，这可能与中医以往对本病的关注程度不够和受西医影响有关。西医治疗本病大多从调节免疫功能的调节着手有关。因此，探索AIT与性激素的关系，也许可以为治疗AITD开辟另外一条道路。

【文献】
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